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防治马腺疫中药组方筛选及药效学评价研究

防治马腺疫中药组方筛选及药效学评价研究

作者：朱怡萱新疆农业大学

学位级别：硕士

马腺疫是由马链球菌马亚种(Streptococcus equi subspecies equi,S.equi)引起的一种细菌性疫病,具有高度传染性、急性接触性的特点,表现发热、精神抑郁、下颌咽下淋巴结肿胀,严重时会出现呼吸窘迫等典型临床症状。目前马腺疫主要通过抗... 详细信息

马腺疫是由马链球菌马亚种(Streptococcus equi subspecies equi,S.equi)引起的一种细菌性疫病,具有高度传染性、急性接触性的特点,表现发热、精神抑郁、下颌咽下淋巴结肿胀,严重时会出现呼吸窘迫等典型临床症状。目前马腺疫主要通过抗生素和疫苗进行防治,但随着耐药菌株、变异菌株的出现,防治效果并不理想。中兽药具有毒副作用小、广谱等特点,为防治马腺疫提供了新思路。因此本研究拟创制出一种可防治马腺疫的中药组方,同时结合体内外试验验证其药效学作用,并初步探寻该组方对马腺疫致病菌-马链球菌马亚种的抑菌机制。本研究根据相关文献及书籍记载,选取其中出现频率高且药效强劲的27味单药,针对实验室保存的S.equi新疆株,通过体外抑菌试验(牛津杯法、最小抑菌浓度、最小杀菌浓度、联合药敏实验),结合L(2)正交试验初步筛选抗S.equi中药组方的最佳优选因素。再通过L(3)正交试验,优化得到基础组方的最佳配比。最后依据中兽医理论,向基础组方中增添两味补益药,通过体内保护率试验得到加味组方的最佳配比并联合组织脏器病理变化,验证加味组方各组的体内抑菌效果。结果显示,S.equi对7味中药敏感,其中浙贝母与雪白睡莲联合药敏指数>2,二者拮抗,故删除浙贝母。基础组方的最佳配比是赤芍:甘草:大黄:雪白睡莲:山豆根:苦参=4:2:2:4:4:1;由加味试验结果可知,在黄芪:当归=1:1配伍浓度为500 mg/m L时加味,最优组方的保护率可达87.5%,且加味各组组方对S.equi所致的小鼠肺脏炎性损伤修复良好,将最终优选加味组方命名为组方1。基于对新药开发的要求,本研究通过急性毒性试验、体外抑菌试验(牛津杯法、最小抑菌浓度、最小杀菌浓度)和马腺疫小鼠模型体内治疗试验,验证复方临床用药的安全性及有效性。急性毒性试验显示组方1毒性极低,最大耐受量为480 g/kg,可保证临床正常用药安全;S.equi在体外对组方1高度敏感,抑菌圈直径可达15.56 mm,最小抑菌浓度为0.3125 g/m L,最小杀菌浓度为0.1563 g/m L;体内治疗结果可见,组方1对马腺疫小鼠动物模型的保护率为75%,可有效降低S.equi对小鼠的侵袭力。最后,测评了组方1对S.equi的生长情况(细胞膜与细胞壁完整性、通透性,细菌形态变化)和毒力因子表达(透明质酸酶、溶血素S活力、FNEB锚定蛋白表达量)的影响,初步探究组方1抑制S.equi的作用机制。由结果可知,组方1可通过破坏S.equi细胞壁完整性、增大细胞膜通透性等对S.equi生长产生抑制,同时组方1可以有效抑制透明质酸酶、溶血素S活力,显著降低FNEB锚定蛋白的表达量。综上所述,本研究成功研制出一种可以有效抑制S.equi的中药组方,可为临床治疗马腺疫提供一定的技术支持。

关键词：马链球菌马亚种马腺疫中药组方药效学评价抑菌机制

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马腺疫的诊断及综合防治措施

当代畜禽养殖业 2023年第4期43卷 44-46页

作者：王娜党娟戴伶俐云涛东升德吉得石昊李军燕张帆刘威内蒙古自治区农牧业科学院内蒙古呼和浩特010031 鄂尔多斯市动物疫病预防控制中心内蒙古鄂尔多斯017000 内蒙古自治区动物疫病预防控制中心内蒙古呼和浩特010010 阿拉善盟阿拉善右旗阿拉腾朝格苏木综合保障和技术推广中心内蒙古阿拉善737300 锡林郭勒盟动物疾病预防控制中心内蒙古锡林浩特026000 鄂尔多斯东胜区农牧技术推广中心内蒙古鄂尔多斯017000

马腺疫是由马链球菌马亚种引起的一种马属动物急性接触性传染病,主要感染马、驴和骡等马属动物。该病发病率高,传染性强,严重危害着世界马产业的发展,并造成巨大的经济损失。本文对该病的诊断及综合防治措施进行概述,以期为畜牧行业工... 详细信息

马腺疫是由马链球菌马亚种引起的一种马属动物急性接触性传染病,主要感染马、驴和骡等马属动物。该病发病率高,传染性强,严重危害着世界马产业的发展,并造成巨大的经济损失。本文对该病的诊断及综合防治措施进行概述,以期为畜牧行业工作者提供参考。

关键词：马腺疫诊断防治措施

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岔口驿马产区马腺疫和马鼻肺炎血清学调查

中兽医医药杂志 2022年第2期41卷 63-65页

作者：王福财马骏王淑芳甘肃省天祝县动物疫病预防控制中心甘肃天祝733299 甘肃省皋兰县动物疫病预防控制中心甘肃皋兰730200

为明确岔口驿马产区内马腺疫(equine strangles)和马鼻肺炎(equine rhinopneumonitis,ER)流行情况,保障岔口驿马产业健康稳定发展,特进行血清学调查。按随机采样方式,采集甘肃省天祝县16个乡镇的岔口驿马血清510份,用ELISA方法进行马链... 详细信息

为明确岔口驿马产区内马腺疫(equine strangles)和马鼻肺炎(equine rhinopneumonitis,ER)流行情况,保障岔口驿马产业健康稳定发展,特进行血清学调查。按随机采样方式,采集甘肃省天祝县16个乡镇的岔口驿马血清510份,用ELISA方法进行马链球菌(Streptococcus equi,S.equi)和马疱疹病毒(Equine herpesviruse,EHV)抗体检测。结果显示,510份马血清中检测出S.equi抗体阳性血清73份,总阳性率为14.31%;检测出EHV抗体阳性血清66份,总阳性率为12.94%。其中,1岁龄以内马匹S.equi和EHV抗体阳性率分别为1.04%、8.33%,1岁至3岁龄马匹抗体阳性率分别为27.19%、14.04%,3岁至5岁马匹抗体阳性率分别为17.33%、14.67%,5岁以上马匹抗体阳性率分别为10.00%、13.33%,且存在同时检测出S.equi和EHV抗体阳性的情况,混合抗体阳性率为6.27%。岔口驿马产区应针对马腺疫和马鼻肺炎,因地制宜,科学制定防控措施。

关键词：岔口驿马产区马腺疫马鼻肺炎血清学调查

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驴场马腺疫防治技术规程

畜牧产业 2022年第2期 27-30页

作者：无中国畜牧业协会

ICS 65.020.30B 41团体标准T/CAAA 059—20212021-05-28发布2021-07-15实施前言本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不... 详细信息

ICS 65.020.30B 41团体标准T/CAAA 059—20212021-05-28发布2021-07-15实施前言本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由中国畜牧业协会提出并归口。

关键词：标准化工作导则团体标准 AAA 马腺疫专利 T/C 发布 ICS

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马腺疫

畜牧兽医科技信息 2013年第10期29卷 16-18页

作者：郭纪珂王晓钧中国农业科学院哈尔滨兽医研究所马传染病与慢病毒病研究团队哈尔滨150001 内蒙古农业大学呼和浩特010010

马腺疫（俗称槽结）是马链球菌马亚种引起的散发性或地方流行性的马属动物急性接触性传染病。各种年龄马都可发病，以1岁左右的幼驹最易感染。该病最早由Jordanus Ruffus在1251年的兽医科学杂志上报道，以发热、上呼吸道粘膜卡他性化脓... 详细信息

马腺疫（俗称槽结）是马链球菌马亚种引起的散发性或地方流行性的马属动物急性接触性传染病。各种年龄马都可发病，以1岁左右的幼驹最易感染。该病最早由Jordanus Ruffus在1251年的兽医科学杂志上报道，以发热、上呼吸道粘膜卡他性化脓性炎症、颌下淋巴结急性化脓性炎症为典型症状。该病呈世界性分布并造成了很大的经济损失。

关键词：马腺疫急性接触性传染病化脓性炎症地方流行性颌下淋巴结马属动物马链球菌兽医科学

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马腺疫链球菌的分离鉴定与疫苗的研制

黑龙江畜牧兽医 2013年第5期 109-111页

作者：康立超陈新华钟发刚黄新韩猛立何延华新疆农垦科学院畜牧兽医研究所绵羊繁育生物技术重点实验室新疆石河子832000 新疆农四师七十七团新疆伊犁835601

为了有效控制马腺疫的发病,通过无菌采集病马脓液进行细菌分离、纯化,生化鉴定和16SrDNA测序分析。结果表明:共分离、鉴定出5株马链球菌马亚种,1株马链球菌兽疫亚种,1株金黄色葡萄球菌;分离株均具有较高致病性;制备的灭活疫苗能够有效... 详细信息

为了有效控制马腺疫的发病,通过无菌采集病马脓液进行细菌分离、纯化,生化鉴定和16SrDNA测序分析。结果表明:共分离、鉴定出5株马链球菌马亚种,1株马链球菌兽疫亚种,1株金黄色葡萄球菌;分离株均具有较高致病性;制备的灭活疫苗能够有效地预防马腺疫的发病。

关键词：马腺疫链球菌分离鉴定 16S rDNA 疫苗

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马腺疫链球菌的分离鉴定及其灭活疫苗的研制

马腺疫链球菌的分离鉴定及其灭活疫苗的研制

作者：杜茂昌西北农林科技大学

学位级别：硕士

马腺疫是一种由C型链球菌马链球菌马亚种（Streptococcus equi subspecies equi,S.equi）引起的急性接触性马属动物传染病,在我国牧区发病率很高,以2岁以下幼驹易感,给牧民造成巨大的经济损失,但尚无有效的预防和控制措施。为尽快缓解... 详细信息

马腺疫是一种由C型链球菌马链球菌马亚种（Streptococcus equi subspecies equi,S.equi）引起的急性接触性马属动物传染病,在我国牧区发病率很高,以2岁以下幼驹易感,给牧民造成巨大的经济损失,但尚无有效的预防和控制措施。为尽快缓解马腺疫在我国牧区的流行情况,本项研究进行了马腺疫灭活疫苗制备方法的探讨,试验获得的病原菌为分离自马腺疫重症马的野毒株（HLJ2011）,利用该菌株制备灭活疫苗能够为小鼠提供良好的保护力。本文从HLJ2011菌株生物学特性及马腺疫灭活疫苗小鼠免疫保护效力两个方面进行了系统的研究。结果如下:1.HLJ2011株生物学特性研究:本试验从病畜下颌破溃脓汁病料中分离出1株主要致病菌,对该菌的16S rRNA鉴定、生化鉴定、不同接种浓度生长曲线、菌落形成单位（Colony-Forming Unit,CFU）与OD值关系、马腺疫链球菌毒力测定进行了研究。结果表明,通过16S rRNA鉴定及生化鉴定该菌为S.equi,该菌不同接种浓度生长曲线表明,各浓度生长曲线基本相同,接种浓度越高,对数生长期越短;1%接种浓度培养8~10 h时CFU最大,可达1×109 CFU;用1×107 CFU腹腔攻毒8周龄Balb/c小鼠,死亡率100%,用改良寇氏法计算得出,该菌对小鼠半数致死量为5×105 CFU。2.马腺疫灭活疫苗对小鼠免疫保护效力的研究方面:通过不同温度和甲醛浓度完成HLJ2011灭活条件的筛选以及马腺疫灭活疫苗对小鼠的免疫保护效力的研究。在4℃、28℃及37℃条件下不同甲醛浓度对灭活效果的影响试验表明,温度越高或甲醛浓度越高,灭活时间越短。采用28℃、1%甲醛灭活12 h后,加入某高分子聚合物佐剂,经无菌检验后制成马腺疫灭活疫苗,对5组小鼠进行不同剂量的免疫后,分别进行不同剂量攻毒试验,结果表明小鼠经106 CFU灭活疫苗免疫后,保护率为80%。本试验完成了对分离菌株HLJ2011的生物学特征研究,以及利用该菌株制备灭活疫苗对感染小鼠保护性试验。本项研究为我国马腺疫病原学研究和疫苗研究奠定了重要基础。

关键词：马腺疫分离鉴定灭活疫苗保护效力

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马腺疫、马急腹症的临床病案分析

马腺疫、马急腹症的临床病案分析

作者：买占海新疆农业大学

学位级别：硕士

随着马匹的日益增加,马腺疫等传染病严重的影响着马匹生长发育,马急腹症等内科病对国外引进的优质马匹造成了生命威胁,因此,本研究通过分析2013年3月至2015年3月新疆伊犁昭苏县某马场的临床病案,制定一个有效的治疗方案对今后发生马腺... 详细信息

随着马匹的日益增加,马腺疫等传染病严重的影响着马匹生长发育,马急腹症等内科病对国外引进的优质马匹造成了生命威胁,因此,本研究通过分析2013年3月至2015年3月新疆伊犁昭苏县某马场的临床病案,制定一个有效的治疗方案对今后发生马腺疫及马急腹症防治提供临床依据。通过临床症状诊断分析、直肠检查、实验室血液学分析和治疗马的急腹症病例34例、马腺疫76例。马急腹症应用中药、西药及中西结合治疗,其中31例马急腹症痊愈,3例肠因扭转病治疗无效死亡,治愈率达91.2%;马腺疫发病率为49%,其中幼驹98.6%,成年马1.4%,应用中药、西药及中西医结合治疗,一过型病畜35例,典性型27例,恶性型14例,继发脓毒败血症死亡4例,治愈率为94.7%,病死率为5.3%。血液学检测结果显示:(1)采用西药治疗马腺疫后,白细胞和红细胞的数量以及红细胞压积还有淋巴细胞数以及血红蛋白指标的变化恢复到正常范围内(P马血清中的TNF-α和IL-6含量均降低,但是变化不明显(P马腺疫后,白细胞数、血红蛋白含量降低至正常(P0.05)。临床中应用中药治疗马腺疫效果比西药治疗效果好,中西结合治疗马急腹症效果较好,为今后马腺疫及马急腹症的治疗和预防提供参考依据。

关键词：马急腹症马腺疫中草药临床病案

新疆伊犁地区马鼻肺炎、马腺疫、马流产沙门菌病的血清学调查

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中国预防兽医学报 2017年第7期39卷 540-543页

作者：袁贝李海马陈赵亚南马玉辉朱义忠苏艳新疆农业大学动物医学学院新疆乌鲁木齐830052 新疆昭苏县畜牧兽医局新疆伊犁835000 新疆伊犁种马场新疆伊犁835000

为了解新疆伊犁地区的马鼻肺炎、马腺疫及马流产沙门菌病的流行现状和特点,本研究从新疆伊犁地区养马最为集中的10个乡镇和3个国有马场采集了818份血清样品。分别采用ELISA法和微量凝集法进行马疱疹病毒(EHV)、马腺疫链球菌(S.equi)和... 详细信息

为了解新疆伊犁地区的马鼻肺炎、马腺疫及马流产沙门菌病的流行现状和特点,本研究从新疆伊犁地区养马最为集中的10个乡镇和3个国有马场采集了818份血清样品。分别采用ELISA法和微量凝集法进行马疱疹病毒(EHV)、马腺疫链球菌(S.equi)和马流产沙门菌(S.abortus)的抗体检测,并应用统计学方法从年龄、性别、地域及养殖规模等方面对影响这3种病感染的风险因素进行了分析。检测结果显示该地区EHV抗体阳性率为28.85%,S.equi抗体阳性率为24.69%,S.abortus抗体阳性率为25.31%。性别和年龄对马鼻肺炎感染影响显著(p马链球菌抗体阳性率的影响显著(p马流产沙门菌抗体阳性率的影响显著(p马疱疹病毒(EHV)和马腺疫链球菌(S.equi)的混合感染率较高。本研究为新疆地区马的这3种传染病有效防控提供了调查数据。

关键词：马鼻肺炎马腺疫马流产沙门菌病血清流行病学调查