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马氏钳蝎蝎毒短肽BmK622的分离纯化和一级结构测定

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化学学报 2003年第4期61卷 630-634页

作者：张乃霞吴宫王跃丰王中华冯传莉吴厚铭中国科学院上海有机化学研究所上海200032

应用凝胶过滤、离子交换和HPLC反相色谱法从马氏钳蝎粗毒中分离纯化得到蝎毒多肽BmK62 2 .联合运用串联质谱法和Edman降解法 ,鉴定了BmK62 2N端 19个残基的序列 ,经过数据库检索 ,发现数据库中用cDNA克隆方法鉴定了序列的马氏钳蝎蝎毒短... 详细信息

应用凝胶过滤、离子交换和HPLC反相色谱法从马氏钳蝎粗毒中分离纯化得到蝎毒多肽BmK62 2 .联合运用串联质谱法和Edman降解法 ,鉴定了BmK62 2N端 19个残基的序列 ,经过数据库检索 ,发现数据库中用cDNA克隆方法鉴定了序列的马氏钳蝎蝎毒短肽BmTX3一级序列N端 19个残基与BmK62 2已测定的N端 19个残基序列完全相同 ,BmK62 2的分子量测定和氨基酸组成分析的结果表明 ,BmK62 2与BmTX3分子量相同、氨基酸组成一致 ,从而BmK62 2的一级结构为 :FGLIDVKCFASSECWTACKKVTGSGQGKCQNNQCRCY .

关键词：马氏钳蝎蝎毒短肽 BmK622 分离纯化串联质谱法 Edman降解法一级结构

马氏钳蝎毒素中多肽BmK4112的分离纯化和一级结构测定

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Acta Biochimica et Biophysica Sinica 2000年第4期32卷 351-355页

作者：李医明吴宫张乃霞吴厚铭中国科学院上海有机化学研究所!上海200032

对马氏钳蝎粗毒中多肽进行分离纯化及鉴定。应用凝胶过滤、离子交换和HPLC反相色谱方法分离纯化样品。应用二巯基苏糖醇 (DTT)还原 ,碘乙酸保护法对纯化样品进行修饰 ,修饰样品经酶解后应用Edman降解法 ,并结合ESI MS法和串联质谱法 (MS... 详细信息

对马氏钳蝎粗毒中多肽进行分离纯化及鉴定。应用凝胶过滤、离子交换和HPLC反相色谱方法分离纯化样品。应用二巯基苏糖醇 (DTT)还原 ,碘乙酸保护法对纯化样品进行修饰 ,修饰样品经酶解后应用Edman降解法 ,并结合ESI MS法和串联质谱法 (MS MS)分析肽的序列。比较修饰前后的质谱 ,测定分子中的二硫键数目。分离纯化获得多肽BmK4112 ,其一级结构为TPYPVNCKTDRDCVMCGLGISCKNGYCTGQC。分子中含三对二硫键。经搜寻蛋白质序列库 ,BmK4112为一新的多肽。

关键词：马氏钳蝎 BmK4112 串联质谱(MS-MS) CID质谱序列分析

马氏钳蝎蝎毒分离组分Ⅲ体外抗癌活性的实验研究

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中国病理生理杂志 1996年第1期12卷 72-77页

作者：臧梦维董伟华孔天翰刘桂亭钱玉珍郑智敏杨红艳河南医科大学病理生理教研室中国协和医科大学基础医学院药理教研室河南医科大学人体解剖教研室

蝎毒组分Ⅲ（ｓｃｏｒｐｉｏｎｖｅｎｏｍｃｏｍｐｏｏｃｎｔⅢ，ＳＶＥⅢ）是从马氏钳蝎粗毒分离纯化获得的有效成分之一。本文用ＳＶＣⅢ处理体外培养的人喉癌ＨＥｐ￣（－２）细胞系和人直肠腺癌Ｃ１１８４细胞系，研究其抗癌活性。... 详细信息

蝎毒组分Ⅲ（ｓｃｏｒｐｉｏｎｖｅｎｏｍｃｏｍｐｏｏｃｎｔⅢ，ＳＶＥⅢ）是从马氏钳蝎粗毒分离纯化获得的有效成分之一。本文用ＳＶＣⅢ处理体外培养的人喉癌ＨＥｐ￣（－２）细胞系和人直肠腺癌Ｃ１１８４细胞系，研究其抗癌活性。结果表明，以丝裂霉素做为阳性对照，ＳＶＣⅢ（１．６～８．０μｇ／ｍｌ）对两种癌细胞呈毒性和杀伤作用（Ｐ＜０．０１）。当ＳＶＣⅢ浓度为４．８、６．４和８．０μｇ／ｍｌ时，ＨＥｐ￣（－２）细胞和Ｃ１１８４细胞的克隆形成率降低（Ｐ＜０．０１），具有剂量依赖性，半数抑制浓度分别为５．０１μｇ／ｍｌ和６．６μｇ／ｍｌ。较大剂量ＳＶＣⅢ处理癌细胞２４ｈ，生长抑制率呈明显增高，以后趋于坪式。ＳＶＣⅢ还使有丝分裂指数和多核率减少。分化程度较高的ＨＥｐ－２细胞对ＳＶＣⅢ更为敏感。提示ＳＶＣⅢ是存在于蝎毒中的天然、高效低毒的抗癌成分。

关键词：蝎毒类细胞株抗肿瘤药马氏钳蝎

马氏钳蝎中一种新的α—神经毒素三级结构的分子模建

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复旦学报（自然科学版） 2000年第B4期39卷 16-22页

作者：宗祥福王建颖材料科学系

用同源模建与马氏钳蝎中的一种新的α型昆虫神经毒素的三级结构进行了计算。尽管此毒素具有非典型的二硫桥结构，但还是保持了蝎毒的一般的结构特征。其中４个二硫键的位置为：Ｃｙｓ１２－Ｃｙｓ６３，Ｃｙｓ１６－Ｃｙｓ３６，Ｃｙｓ... 详细信息

用同源模建与马氏钳蝎中的一种新的α型昆虫神经毒素的三级结构进行了计算。尽管此毒素具有非典型的二硫桥结构，但还是保持了蝎毒的一般的结构特征。其中４个二硫键的位置为：Ｃｙｓ１２－Ｃｙｓ６３，Ｃｙｓ１６－Ｃｙｓ３６，Ｃｙｓ２２－Ｃｙｓ４６，及Ｃｙｓ２６－Ｃｙｓ４８，１个α螺旋分别由２个二硫键桥连接到中间那个β主链与其他结构连接在一起。所以ＢｍＫαＩＴ１个的芯结构并不象其他毒那样紧密。

关键词：蝎毒分子模建马氏钳蝎 α-神经毒素三级结构

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马氏钳蝎毒对大鼠神经和骨胳肌的作用

生理学报 1982年第4期34卷 428-433页

作者：施玉樑徐耀忠徐科中国科学院上海生理研究所

本工作在大鼠膈神经膈肌标本上观察马氏钳蝎（Buthus marensi Karsch）毒对神经、肌肉和神经肌肉接头传递的作用,结果如下:1.在蝎毒(3×10-5g/ml)作用下,由吸附电极引导的膈神经单相动作电位的下降相逐渐延长,形成平台,3小时后电位时程... 详细信息

本工作在大鼠膈神经膈肌标本上观察马氏钳蝎（Buthus marensi Karsch）毒对神经、肌肉和神经肌肉接头传递的作用,结果如下:1.在蝎毒(3×10-5g/ml)作用下,由吸附电极引导的膈神经单相动作电位的下降相逐渐延长,形成平台,3小时后电位时程可达100ms 以上。2.蝎毒(5×10-7—6×10-5g/ml)显著改变肌纤维动作电位的波形,降低肌细胞的静息膜电位。如用6×10-5g/ml 浓度蝎毒处理膈肌,半小时内即可使肌纤维动作电位下降相大大延长,形成平台。一小时后膜电位由对照的78±4mV 降低至59±13mV,2小时后至55±8mV（平均值±S.D.）。3.河豚毒（3μM）可使被蝎毒降低了的肌细胞膜电位迅速复原,但随着时间的延续还可以再出现缓慢的轻度下降。4.在河豚毒（3μM）使肌细胞动作电位消失后,向溶液中加入蝎毒,半小时后将二者一并洗去,重新出现的动作电位亦带有明显的平台。5.在接头传递已被高 Mg++或筒箭毒碱阻遏的标本上加蝎毒后,单个间接刺激可诱发出一串终板电位,甚至引起肌肉收缩。6.蝎毒(1×10-5g/ml)明显增加小终板电位的发放频率,作用1小时后其频率可高达每秒100次以上。7.肌肉对间接刺激的收缩反应在加入蝎毒后首先增大,然后逐渐下降,在1×10-5g/ml 浓度蝎毒作用下1.5—2小时传递阻遏,此时肌肉对直接刺激

关键词：蝎毒小终板电位动作电位肌纤维肌细胞大鼠骨胳肌刺激电极马氏钳蝎静息膜肌细胞膜生理溶液膜电位生物电位收缩反应

马氏钳蝎哺乳动物神经毒素Ⅱ的部分氨基酸顺序

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生物化学与生物物理进展 1989年第1期16卷 46-47页

作者：罗广祥张丽青顾梓伟吉永华徐科中国科学院上海有机化学研究所中国科学院上海生理研究所

用DABITC-PITC双偶合微量手工顺序方法和羧肽酶法,测定了马氏钳蝎哺乳动物神经毒素Ⅱ的N-端和C-端部分氨基酸排列顺序。N-端氨基酸顺序为:H-Val-Arg-Asp-Ala-Tyr-lle-Ala-Asp-Pro-Asn-Asn-(Cys)-Val-Tyr-Glu-(Cys)-Ala-。C-端氨基酸顺序... 详细信息

关键词：马氏钳蝎神经毒素II 氨基酸顺序

马氏钳蝎中性神经毒素BmK M4 0.20nm晶体结构测定

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中国科学（C辑） 2000年第1期30卷 78-84页

作者：何小林刘新奇曾宗浩李宏民王淼张英王大成中国科学院生物物理研究所北京100101

BmKM4是一种中性蝎神经毒素 ,在BmK系列中具有中等毒性 ,属GroupⅢα 型毒素 .纯化样品结晶为六方晶体 ,空间群为P6 1.运用X射线衍射分析技术 ,通过分子置换法在 0 .2 0nm分辨率水平测定了BmKM4晶体结构 ,并对模型结构进行了修正 .最后... 详细信息

BmKM4是一种中性蝎神经毒素 ,在BmK系列中具有中等毒性 ,属GroupⅢα 型毒素 .纯化样品结晶为六方晶体 ,空间群为P6 1.运用X射线衍射分析技术 ,通过分子置换法在 0 .2 0nm分辨率水平测定了BmKM4晶体结构 ,并对模型结构进行了修正 .最后的晶体学R因子为 0 .1 42 ,自由R因子为 0 .1 73,模型的标准键长偏差为 0 .0 0 1 5nm ,标准键角偏差为 1 .75 3° .在一个不对称单位里加入了 6 4个水分子 .精化的结构显示第 1 0位残基含有 1个反常的非脯氨酸顺式肽键 .将精化后的结构与GroupⅡα 型蝎毒素BmKM8(酸性弱毒素 )的结构进行比较 ,并以此为基础讨论该cis肽键可能的结构意义 .

关键词：蝎神经毒素中性毒素分析晶体结构马氏钳蝎

马氏钳蝎酸性神经毒素(Bmk M8)0.25nm分辨率晶体结构测定

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中国科学（C辑） 1996年第3期26卷 213-222页

作者：李宏民金雷曾宗浩王淼张英王大成中国科学院生物物理研究所北京100101

马氏钳蝎中一种酸性弱神经毒素BmK M8的晶体结构测定.BmK M8的X射线衍射数据用面探测器收集,利用碱性蝎神经毒素AaHⅡ的晶体结构作初始模型,取1.5～0.35nm范围的强度数据,应用分子置换法,经交叉旋转函数,PC-refinement和平移函数的计算... 详细信息

马氏钳蝎中一种酸性弱神经毒素BmK M8的晶体结构测定.BmK M8的X射线衍射数据用面探测器收集,利用碱性蝎神经毒素AaHⅡ的晶体结构作初始模型,取1.5～0.35nm范围的强度数据,应用分子置换法,经交叉旋转函数,PC-refinement和平移函数的计算,确定了BmK M8分子在晶胞中的正确取向和位置,建立初始模型.从该模型提供的初始位相出发,得到了BmK M8晶体的初始相角,采用立体化学制约的最小二乘修正技术在0.8～0.25nm分辨率范围内进行了结构精化.修正结果,最后的晶体学 R因子为0.171,键长标准偏差为 0.0019nm,键角标准偏差为2239°.BmK M8分子由1段两圈半a螺旋(由19～28位氨基酸组成)和3段反平行的β折叠(由2～4,32～37,45～51位氨基酸组成)构成三维折叠的核心,由此核心向外伸出3个Loop区.描述了BmK系列之一的BmK M8分子的肽链折叠特征,辨识出可能存在于所有蝎毒素中的共同的结构模块(Motif),并讨论了保守的芳香残基和荷电残基的空问分布特征及其与毒性的可能关系.这是首次报道一种酸性神经毒素的晶体结构.

关键词：马氏钳蝎晶体结构蝎神经毒素酸性毒素

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马氏钳蝎蝎毒对大鼠左心室功能的影响

第一军医大学学报 1992年第3期12卷 239-242页

作者：龚剑平龚彦德刘菊芳张永胜第一军医大学防护教研室第一军医大学药理教研室

经大鼠右颈总动脉左心室插管,静脉注射马氏钳蝎蝎毒,观察血压、心率、左心室内压、左心室舒张末期压、左心室内压最大变化速率、零负荷时左室心肌最大收缩速度等指标的变化。结果表明,马氏钳蝎蝎毒具有升高血压、增强心肌收缩力、显著... 详细信息

经大鼠右颈总动脉左心室插管,静脉注射马氏钳蝎蝎毒,观察血压、心率、左心室内压、左心室舒张末期压、左心室内压最大变化速率、零负荷时左室心肌最大收缩速度等指标的变化。结果表明,马氏钳蝎蝎毒具有升高血压、增强心肌收缩力、显著改善左心室收缩功能的作用。其升压作用与肾上腺素α受体有关,其正性肌力作用与肾上腺素β受体关系不大,蝎毒分子内的4对双硫键是其产生心血管作用所必需的。

关键词：马氏钳蝎蝎毒心肌收缩性能