检索结果-南通市图书馆

马尾松毛虫质型多角体病毒多角体蛋白基因的表达与定位

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国病毒学 2006年第1期21卷 52-56页

作者：李斗林李艳秋张珈敏杨波陈伍国周伟东胡远扬武汉大学生命科学学院病毒学国家重点实验室湖北武汉430072

为了表达马尾松毛虫质型多角体病毒(DpCPV)多角体蛋白基因(S10片段)并探讨多角体蛋白在真核细胞中的定位,从DpCPV中分离出S10,与pET-28a载体连接成重组表达质粒pET28-S10;将S10克隆到杆状病毒转座载体pFASTBACHTb中,依次筛选出重组转座... 详细信息

为了表达马尾松毛虫质型多角体病毒(DpCPV)多角体蛋白基因(S10片段)并探讨多角体蛋白在真核细胞中的定位,从DpCPV中分离出S10,与pET-28a载体连接成重组表达质粒pET28-S10;将S10克隆到杆状病毒转座载体pFASTBACHTb中,依次筛选出重组转座质粒pFASTBACS10,重组穿梭质粒BacmidS10,重组杆状病毒AcS10。多角体蛋白基因表达后,用SDS-PAGE、Western-blot和免疫荧光技术对表达产物进行了检测。结果表明:S10原核表达质粒、重组杆状病毒成功获得;在昆虫细胞中表达的质型多角体蛋白主要定位于细胞质,同时有少量产物定位于细胞核。

关键词：马尾松毛虫质型多角体病毒多角体蛋白基因杆状病毒转座载体定位

马尾松毛虫质型多角体病毒非结构蛋白p44在Bac-to-Bac系统中的表达和亚细胞定位

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

生物技术通报 2016年第3期32卷 122-128页

作者：彭晗王洪秀王金昌关丽梅靳亮万翠香南昌大学生命科学与食品工程学院南昌330077 江西省农业科学院农业应用微生物研究所南昌330200 江西省科学院微生物研究所南昌330029

为探寻马尾松毛虫质型多角体病毒(DpCPV 1)p44蛋白的功能,构建了DpCPV 1基因组S8片段的原核表达体系,表达纯化蛋白后免疫家兔制备了多克隆抗体。利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统,构建了3种重组的杆状病毒质粒(Bacmid-p44、Bacmid-p44-e ... 详细信息

为探寻马尾松毛虫质型多角体病毒(DpCPV 1)p44蛋白的功能,构建了DpCPV 1基因组S8片段的原核表达体系,表达纯化蛋白后免疫家兔制备了多克隆抗体。利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统,构建了3种重组的杆状病毒质粒(Bacmid-p44、Bacmid-p44-e GFP和Bacmid-e GFP)。转染昆虫细胞Sf9进行表达,通过Western blot检测和蛋白的亚细胞定位观察。Western blot检测结果显示,Bacmid-S8在昆虫细胞Sf9中表达实际蛋白的大小为35 kD,比在原核系统中表达的蛋白(44 k D)略小;利用激光共聚焦显微镜观察p44-e GFP的融合蛋白的亚细胞定位发现,融合p44的绿色荧光蛋白(eGFP)主要聚集在细胞质中,而未融合的eGFP则分布于整个细胞,说明DpCPV 1的p44蛋白定位于细胞质中。

关键词：马尾松毛虫质型多角体病毒多克隆抗体真核表达细胞定位

马尾松毛虫质型多角体病毒NSP1蛋白在昆虫细胞表达及定位

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

生物技术通报 2016年第11期32卷 208-214页

作者：靳亮许翠萍王金昌关丽梅张稳超黄朝高学梅王洪秀江西省科学院微生物研究所南昌330029 江西省科学院鄱阳湖重点实验室南昌330029 鲁东大学生命科学学院烟台264025 江西省农业科学院农业应用微生物研究所南昌330200

马尾松毛虫质型多角体病毒(Dendrolimus punctatus cytoplasmic polyhedrosis virus,Dp CPV)基因组S5片段编码一个由881个氨基酸组成、分子量为101 k D的非结构蛋白(NSP1)。为探寻Dp CPV NSP1蛋白的功能,将Dp CPV 1基因组S5-1片段的抗原... 详细信息

马尾松毛虫质型多角体病毒(Dendrolimus punctatus cytoplasmic polyhedrosis virus,Dp CPV)基因组S5片段编码一个由881个氨基酸组成、分子量为101 k D的非结构蛋白(NSP1)。为探寻Dp CPV NSP1蛋白的功能,将Dp CPV 1基因组S5-1片段的抗原区(1-600 bp)进行了原核表达,并将纯化蛋白免疫家兔,制备多克隆抗体。将稀释后的病毒液感染甜菜夜蛾幼虫,感染后每天解剖甜菜夜蛾并取中肠样品,通过Western blot检测NSP1蛋白的合成时间曲线。Western blot检测结果显示,S5片段表达的蛋白在病毒感染第1天就有合成,并且除了检测到全长的蛋白(101 k D)外,也检测到了80 k D和20 k D的蛋白条带,说明NSP1蛋白为早期表达蛋白,并且蛋白发生了切割。另外,首次对Dp CPV 1 S5片段进行了在昆虫细胞中表达和昆虫亚细胞定位,结果显示,昆虫细胞定位于细胞的细胞质。

关键词：马尾松毛虫质型多角体病毒 NSP1 抗体制备真核表达细胞定位

马尾松毛虫质型多角体病毒S4的cDNA克隆及序列分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国病毒学 2003年第3期18卷 246-250,F003页

作者：赵淑玲梁昌镛洪靖君彭辉银中国科学院武汉病毒研究所湖北武汉430071

从马尾松毛虫质型多角体病毒湖南株中提取病毒核酸,回收、纯化第四片段S4,经RT-PCR扩增得到了S4的cDNA克隆并测定了其全序列。结果表明,S4全长由3262个碱基组成,包含一个编码1058个氨基酸的完整开放阅读框架。Blast同源分析显示,DpCPV s... 详细信息

从马尾松毛虫质型多角体病毒湖南株中提取病毒核酸,回收、纯化第四片段S4,经RT-PCR扩增得到了S4的cDNA克隆并测定了其全序列。结果表明,S4全长由3262个碱基组成,包含一个编码1058个氨基酸的完整开放阅读框架。Blast同源分析显示,DpCPV s4与LdCPV S4、BmCPV S4和RRSV S2编码蛋白氨基酸的同源性分别为94％、92％和22％。另外,氨基酸序列部分区域与Methanosarcina mazei Goel的甲基化转移酶有同源性,且序列中含有鸟苷酸转移酶活性位点。

关键词：马尾松毛虫质型多角体病毒 S4 cDNA克隆序列分析多聚腺昔化

马尾松毛虫质型多角体病毒P44、P50蛋白的表达与定位

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

马尾松毛虫质型多角体病毒P44、P50蛋白的表达与定位

作者：彭晗南昌大学

学位级别：硕士

马尾松毛虫以松针为食,是一种危害较大的森林害虫。马尾松毛虫质型多角体病毒(Dendrolimus punctatus cytoplasmic polyhedrosis virus,DpCPV)是马尾松毛虫的病原微生物,为我国特有物种。DpCPV在农业方面的主要用途是用做微生物杀虫剂,... 详细信息

马尾松毛虫以松针为食,是一种危害较大的森林害虫。马尾松毛虫质型多角体病毒(Dendrolimus punctatus cytoplasmic polyhedrosis virus,DpCPV)是马尾松毛虫的病原微生物,为我国特有物种。DpCPV在农业方面的主要用途是用做微生物杀虫剂,具有安全、高效、无污染的特性。DpCPV的增殖主要通过直接感染目的昆虫的方式,但是受外界环境影响较大。目前对马尾松毛虫质型多角体病毒的研究主要集中在对病毒自身核苷酸序列及其结构的分析,而对有关核酸编码蛋白的修饰、定位和功能的研究报道却较少。因此深入研究DpCPV结构蛋白的修饰机制,将有助于了解病毒入侵机制,为后续马尾松毛虫病毒制剂的生产与虫害的防治工作提供理论依据。本研究通过分别构建DpCPV的P44和P50蛋白的原核和真核表达载体,实现两者原核表达和真核共表达,研究两者的相互作用,并对P50蛋白在昆虫细胞内的定位进行探究。研究结果显示:DpCPV s7编码的结构蛋白P50和s8编码的非结构蛋白P44在大肠杆菌内成功表达,与理论的蛋白分子量大小一致;免疫家兔制备多克隆抗体分别和相应的蛋白进行免疫印迹反应,鉴定了多克隆抗体的特异性;在昆虫细胞Sf9中实现了P50和P44蛋白的共表达。P50在真核细胞内表达的蛋白大小与在原核细胞内表达蛋白的大小一致,P44在真核内表达的大小比原核表达的略小。可见在昆虫Sf9细胞内,P50蛋白不能自我剪切修饰,同时也表明P44蛋白未参与P50蛋白的切割修饰。利用激光共聚焦显微镜观察P50-eGFP的融合蛋白亚细胞定位发现,P50蛋白定位于细胞质中。本研究初步探索了Dp CPV不同片段所编码的蛋白间的相互作用,同时对P50在昆虫细胞中的定位进行了探究。实验结果为后续研究P50蛋白的切割修饰机制提供基础数据,同时也为探究DpCPV非结构蛋白与结构蛋白的相互作用提供了方法学参考,而对P50蛋白的定位研究则为研究其他RNA病毒中的结构蛋白表达定位提供了可参考的方法,本实验的结果数据为探索DpCPV侵染昆虫细胞机制提供了相关实验依据。

关键词：马尾松毛虫质型多角体病毒多克隆抗体原核表达真核表达

马尾松毛虫质型多角体病毒对人体及哺乳动物细胞的安全性研究

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

广东林业科技 1988年第1期 1-3页

作者：潘国兴李玉辉刘清浪吴若光曾陈湘华南师范大学生物系广东省林业科学研究所

本文从细胞水平及亚细胞水平观察研究了马尾松毛虫质型多角体病毒(Dendrolim-us punctatus cytoplasmic polyhedrosisviruses,缩写为 DPCPV,下同)对人体及两种哺乳动物细胞的影响。结果表明:马尾松毛虫质型多角体病毒对人体及哺乳动物... 详细信息

本文从细胞水平及亚细胞水平观察研究了马尾松毛虫质型多角体病毒(Dendrolim-us punctatus cytoplasmic polyhedrosisviruses,缩写为 DPCPV,下同)对人体及两种哺乳动物细胞的影响。结果表明:马尾松毛虫质型多角体病毒对人体及哺乳动物细胞不发生影响。为安全应用马尾松毛虫质型多角体病毒防治马尾松毛虫提供了科学依据。

关键词：原代细胞 PIB 对照组人胚肾细胞哺乳动物细胞马尾松毛虫质型多角体病毒

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

马尾松毛虫质型多角体病毒对桑蚕的感染

广东农业科学 1981年第5期 26-28页

作者：方定坚杜经元易敬华邓健如刘清浪吴若光广东省农科院蚕业研究所安徽省农科院蚕桑研究所广东省林业科学研究所

近十年来,利用昆虫病毒作为防治害虫的手段越来越得到广泛的重视。我省于七十年代初期发现马尾松毛虫(Dendrolimus punctatus)的多角体病毒后,经鉴定有质型多角体病毒(CPV)和核型多角体病毒(NPV)两型。通过室内及林地的毒杀试验,对马尾... 详细信息

近十年来,利用昆虫病毒作为防治害虫的手段越来越得到广泛的重视。我省于七十年代初期发现马尾松毛虫(Dendrolimus punctatus)的多角体病毒后,经鉴定有质型多角体病毒(CPV)和核型多角体病毒(NPV)两型。通过室内及林地的毒杀试验,对马尾松毛虫有较好的防治效果。室内试验毒杀率达95％以上,林地试验毒杀率为73.5—99.1％,是一种较有前途的昆虫微生物杀虫剂。但是,据报道,赤松毛虫(Dendrolimus spectabilis)质型多角

关键词：马尾松毛虫质型多角体病毒继代桑蚕家蚕 CPV 松毛虫

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

马尾松毛虫质型多角体病毒生产方法的研究

广东林业科技 1983年第1期 7-8页

近年来,我省应用马尾松毛虫质型多角体病毒防治松毛虫,已逐步推广,防治面积达二万多亩。但因病毒生产方法没有很好解决,未能生产出大量病毒,以供大面积防虫需要。我们先后进行了室内养虫、林地搭栅养虫、林地放卵块养虫及林间放养幼虫... 详细信息

近年来,我省应用马尾松毛虫质型多角体病毒防治松毛虫,已逐步推广,防治面积达二万多亩。但因病毒生产方法没有很好解决,未能生产出大量病毒,以供大面积防虫需要。我们先后进行了室内养虫、林地搭栅养虫、林地放卵块养虫及林间放养幼虫等生产病毒方法的研究。都有一定效果,尤以后

关键词：马尾松毛虫质型多角体病毒病毒液卵块松毛虫幼虫试验林

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

家蚕对马尾松毛虫质型多角体病毒的敏感性

昆虫学报 2003年第4期46卷 409-416页

作者：洪靖君段家龙赵淑玲彭辉银安徽农业大学蚕业丝绸系中国科学院武汉病毒研究所生物防治室武汉430071 中国科学院武汉病毒研究所生物防治室

用虫体克隆技术 ,对马尾松毛虫质型多角体病毒湖南株 (DpCPV HN)进行了分离纯化 ,鉴定为质型多角体病毒 1型。以家蚕春蕾×镇珠杂种F1 代及自交的F2 代 4或 5日龄幼虫进行毒力测定 ,以纯化的家蚕质型多角体病毒对F1 代幼虫的毒力测定为... 详细信息

用虫体克隆技术 ,对马尾松毛虫质型多角体病毒湖南株 (DpCPV HN)进行了分离纯化 ,鉴定为质型多角体病毒 1型。以家蚕春蕾×镇珠杂种F1 代及自交的F2 代 4或 5日龄幼虫进行毒力测定 ,以纯化的家蚕质型多角体病毒对F1 代幼虫的毒力测定为对照。结果表明 :家蚕品种春蕾×镇珠对家蚕质型多角体病毒敏感 ,马尾松毛虫质型多角体病毒湖南株能引起其感染发病 ;马尾松毛虫质型多角体病毒湖南株感染家蚕品种春蕾×镇珠F1 代幼虫和F2 代幼虫 2 8天后的半致死剂量(LD50 )分别为 885个和 18个CPB (质多角体 ) ,前者为后者的 4 9倍。马尾松毛虫质型多角体病毒湖南株感染后的家蚕 ,其结茧率、化蛹率、羽化率、全茧量、茧层量和单蛾产卵数均有所下降 ,全茧量、茧层量、茧层率和单蛾产卵数与病毒感染剂量之间无显著关联。

关键词：马尾松毛虫质型多角体病毒家蚕质型多角体病毒家蚕敏感性虫体克隆