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香薄防敏挥发油治疗过敏性鼻炎的实验研究及安全性评价

香薄防敏挥发油治疗过敏性鼻炎的实验研究及安全性评价

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作者：胡逸中上海中医药大学

学位级别：硕士

目的香薄防敏挥发油是源于祖国医学的香佩疗法和西方的芳香疗法、采用徐氏儿科治疗过敏性鼻炎的经典用药制成的外用制剂,其组成药物为广藿香、薄荷、紫苏叶、荆芥。本研究选择过敏性鼻炎模型小鼠为研究对象,以杯状细胞、嗜酸性粒细胞、... 详细信息

目的香薄防敏挥发油是源于祖国医学的香佩疗法和西方的芳香疗法、采用徐氏儿科治疗过敏性鼻炎的经典用药制成的外用制剂,其组成药物为广藿香、薄荷、紫苏叶、荆芥。本研究选择过敏性鼻炎模型小鼠为研究对象,以杯状细胞、嗜酸性粒细胞、白介素4（IL-4）、组胺（HIS）、干扰素-γ（IFN-γ）、免疫球蛋白E（IgE）、CD3+、CD4+、CD8+作为观察指标,以糠酸莫米松鼻喷剂作为对照药物,分析香薄防敏挥发油治疗过敏性鼻炎的药效学;并以肌酐（Cre）、尿素氮（BUN）、谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）为观察指标,通过最大给药量实验对香薄防敏挥发油进行安全性评价,为香薄防敏挥发油防治过敏性鼻炎及临床用药的安全性提供理论及实验依据。方法实验一香薄防敏挥发油治疗过敏性鼻炎的实验研究:将36只SPF级雌性Balb/c小鼠随机分成六组,即:空白对照组、过敏性鼻炎模型组、糠酸莫米松组、香薄防敏挥发油低浓度组、香薄防敏挥发油中浓度组、香薄防敏挥发油高浓度组,每组6只。除空白对照组外,其余各组以卵清蛋白腹腔致敏和滴鼻激发制备过敏性鼻炎模型。观察各组小鼠行为学表现、鼻黏膜病理切片确认造模成功。造模成功后,各组给予雾化吸入相应药物,挥发油低、中、高浓度组分别按5g/m、10g/m、20g/m雾化给药;阳性对照组给予浓度为0.0075mg/ml的糠酸莫米松鼻喷剂,空白对照组及模型组均给予生理盐水,雾化量为6ml/次,每日1次,每次30min,连续1周。给药期间,除空白组外,其余各组小鼠隔日行一次鼻腔局部抗原攻击,维持对鼻黏膜的刺激,直至实验结束。以HE染色观察鼻黏膜病理改变,以PAS法观察鼻灌洗液（NLF）中杯状细胞的改变,以酶联免疫吸附法观察血清中IL-4、HIS、IFN-γ、IgE的改变,以免疫组化法观察脾脏组织中CD3+、CD4+、CD8+的改变。实验二香薄防敏挥发油的安全性评价研究:将20只雌雄各半的SPF级Balb/c小鼠随机分成2组,即:空白组、给药组,每组10只。给药组以浓度为40g/m的香薄防敏挥发油一次性雾化2h,雾化量为20ml,空白组给予等体积等时长的生理盐水雾化。连续观察14天,观察并记录动物一般情况（包括精神状态、毛发、粪便等）、体质量变化及死亡情况。观察期结束后以酶联免疫吸附法观察血清中Cre、BUN、AST、ALT的改变,并做小鼠肺、肝、肾病理组织检测。结果1.与空白组比较,模型组小鼠喷嚏及搔鼻次数明显增多（P敏性鼻炎症状。2.鼻黏膜病理改变:空白对照组鼻粘膜排列均匀,形态正常。模型组鼻粘膜嗜酸性粒细胞浸润严重,炎症浸润明显,出现明显的小血管扩张和间质水肿现象,随着挥发油浓度的增加,炎症细胞浸润明显减轻,但嗜酸性粒细胞仍有浸润。阳性对照组有少量嗜酸性粒细胞和炎性细胞浸润。3.小鼠鼻灌洗液杯状细胞含量:与空白组相比,模型组NLF中可见大量杯状细胞;与模型组比较,低、中、高浓度组及阳性对照组NLF中杯状细胞明显减少。4.小鼠血清IL-4含量:与空白组比较,模型组含量明显升高,差异具有统计学意义（P0.05）;三组挥发油组间比较,高浓度组对IL-4水平下调作用与中浓度组及低浓度组相较均有显著差异（P0.05）;三组挥发油组间比较,高浓度组对IFN-γ水平上调作用与低浓度组相较有显著差异（P0.05）;三组挥发油组间比较,高浓度组对HIS水平的下调作用与低、中浓度组相较有显著差异（P<0.05）。7.小鼠血清IgE含量:与空白组比较,模型组含量明显升高,差异具有统计学意义（P<0.05）;与模型组比较,阳性对照组及中、高浓度组含量明显降低,差异具有统计学意义（P

关键词：香薄防敏挥发油过敏性鼻炎杯状细胞嗜酸性粒细胞白介素4 干扰素-γ 组胺免疫球蛋白E CD系列

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