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对氧磷酶1参与香猪高脂模型脂质代谢研究

湖北农业科学 2012年第7期51卷 1404-1406页

作者：徐霖李升冉雪琴王嘉福贵州大学动物科学学院贵阳550025 贵阳学院生物与环境工程系贵阳550005 贵州大学教育部绿色农药与农业生物工程重点实验室贵阳550025

猪动脉粥样硬化形成过程和解剖特征与人极为相似,为研究动脉粥样硬化发病机理,建立了贵州小香猪高脂模型,并设了对照组。通过饲养试验,测定猪动脉粥样硬化形成过程中与脂质代谢密切相关的4种关键因子,即血清总胆固醇(Total cholesterol,... 详细信息

猪动脉粥样硬化形成过程和解剖特征与人极为相似,为研究动脉粥样硬化发病机理,建立了贵州小香猪高脂模型,并设了对照组。通过饲养试验,测定猪动脉粥样硬化形成过程中与脂质代谢密切相关的4种关键因子,即血清总胆固醇(Total cholesterol,TC)、低密度脂蛋白(Light density lipoproteincholesterol,LDL)、高密度脂蛋白(High-density lipoprotein cholesterol,HDL)、超氧化物歧化酶(Super-oxide Dismutase,SOD)及对氧磷酶1(Paraoxonase-1,PON1)活性,研究PON1与脂质代谢之间的关系。研究结果显示,PON1在香猪高脂模型中活性降低。

关键词：动脉粥样硬化(Atherosclerotic,AS) 对氧磷酶1(Paraoxonase-1) 脂质代谢香猪高脂模型

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己烯雌酚对幼年香猪睾丸细胞的影响

畜牧兽医学报 2010年第11期41卷 1510-1514页

作者：田兴贵李江森主性冯会利刘若余贵州大学动物科学学院贵阳550025 集美大学水产学院厦门361021

为了认识己烯雌酚(DES)对幼年雄性香猪睾丸生殖细胞和支持细胞数的影响,将20只20～25日龄幼年雄性香猪分成4组,对照组只注射生理盐水,试验组连续9d(每天1次)经腹腔分别注射不同剂量(0.03、0.3、3mg·kg-1)己烯雌酚后,最后一次注射24h后... 详细信息

为了认识己烯雌酚(DES)对幼年雄性香猪睾丸生殖细胞和支持细胞数的影响,将20只20～25日龄幼年雄性香猪分成4组,对照组只注射生理盐水,试验组连续9d(每天1次)经腹腔分别注射不同剂量(0.03、0.3、3mg·kg-1)己烯雌酚后,最后一次注射24h后取左侧睾丸,入40g·L-1多聚甲醛固定24h,常规制备5μm石蜡切片,用免疫组织化学方法对睾丸支持细胞特异性蛋白生长转录因子4(GATA4)进行检测。显微镜下分别计数支持细胞和生殖细胞数,并统计分析。结果发现:己烯雌酚用量为0.3和3mg·kg-1能促使睾丸生殖细胞数显著增多(P香猪睾丸生殖细胞增殖而抑制其支持细胞增殖。DES的作用因细胞类型不同而有所不同,但其机制还需进一步研究。

关键词：己烯雌酚香猪睾丸支持细胞生殖细胞

阿克苏某场香猪毕氏肠微孢子虫的分子检测与鉴定

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中国兽医科学 2019年第9期49卷 1173-1178页

作者：张盈李东方赵爱云邢金明敖维平井波齐萌张龙现塔里木大学动物科学学院新疆阿拉尔843300 河南农业大学牧医工程学院河南郑州450002

为了解阿克苏某场香猪毕氏肠微孢子虫感染情况、基因型及基因亚型分布特点,基于ITS基因位点,采用PCR法检测44份香猪粪便DNA样本,发现18份呈毕氏肠微孢子虫阳性,感染率为40.9%(18/44),其中断奶前和断奶后仔猪的感染率分别为100%(9/9)和32... 详细信息

为了解阿克苏某场香猪毕氏肠微孢子虫感染情况、基因型及基因亚型分布特点,基于ITS基因位点,采用PCR法检测44份香猪粪便DNA样本,发现18份呈毕氏肠微孢子虫阳性,感染率为40.9%(18/44),其中断奶前和断奶后仔猪的感染率分别为100%(9/9)和32.1%(9/28),成年母猪未发现感染。鉴定出5个毕氏肠微孢子虫基因型:EbpA、EbpC、Peru8、MJ12和1个新基因型(命名为XJP-Ⅰ),种系发育分析显示5种基因型均属于组群1。对上述18份阳性样本基于微卫星(MS1、MS3、MS7)和小卫星(MS4)位点进行多位点序列分型,形成了8个多位点基因型。结果显示,该场香猪源毕氏肠微孢子虫存在人兽共患基因型,具有遗传多样性。

关键词：毕氏肠微孢子虫香猪 PCR 多位点序列分型

云南香猪PRRSV分离株ORF7基因遗传变异分析

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中国兽医学报 2021年第1期41卷 13-19页

作者：郑龙龙朱玲云刘萍丹赵德育刘佳毕峻龙杨贵树舒相华云南农业大学动物科学技术学院云南昆明650201 楚雄州动物疫病预防控制中心云南楚雄675000

为了解2014年云南省香猪群体中猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的流行特征,将疑似猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)病例肺脏和淋巴结研磨处理后接种Marc-145细胞进行盲传,传至第2代48 h时出现2株病毒致Marc-145细胞聚集融合、巨细胞等病毒致细... 详细信息

为了解2014年云南省香猪群体中猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的流行特征,将疑似猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)病例肺脏和淋巴结研磨处理后接种Marc-145细胞进行盲传,传至第2代48 h时出现2株病毒致Marc-145细胞聚集融合、巨细胞等病毒致细胞病变(CPE)效应现象,将其命名为YN-2XZ1和YN-3XZ2。细胞冻融3次后,使用Reed-Muench法计算病毒的半数感染力(TCID_(50))分别为10^(6.75),10^(6.05)TCID50/100μL。对ORF7基因进行序列测定、分析及N蛋白的免疫印迹(WB)检测,并与美洲经典毒株VR-2332、国内2001-2014年部分序列进行比对结果显示,本次获得的2株PRRSV之间核苷酸同源性为100%,与国内流行的变异毒株进化同步,说明目前云南香猪群中PRRSV以变异毒株为主,可能不具有高暴发性和高致病力,不会引起重大经济损失和社会恐慌,但仍需对此加以关注。通过磷酸化分析得出,暴发HP-PRRSV前N蛋白35位丝氨酸磷酸化概率67.4%~99.8%,暴发HP-PRRSV后N蛋白35位丝氨酸磷酸化概率低于50%,提示该位点氨基酸不易于磷酸化可能与NSP-2蛋白基因缺失从而引起HP-RRSV有关,需进一步研究验证。

关键词：香猪 PRRSV CPE ORF7基因 N蛋白

利用miRNA芯片筛选不同月龄香猪肝脏中差异表达的miRNA

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中国畜牧兽医 2017年第3期44卷 673-678页

作者：李升许亚楠牛熙冉雪琴贵州大学农业生物工程研究院贵阳550025 贵州大学动物科学学院贵阳550025

为研究miRNA在香猪发育时期的调控功能,试验对3和7月龄香猪肝脏组织中存在表达差异的miRNA进行了筛选。提取3和7月龄香猪肝脏组织总RNA,通过与miRNA芯片杂交,经统计学分析,以变化倍数≥2倍(P<0.05)为阈值,筛选3和7月龄香猪肝脏中表达丰... 详细信息

为研究miRNA在香猪发育时期的调控功能,试验对3和7月龄香猪肝脏组织中存在表达差异的miRNA进行了筛选。提取3和7月龄香猪肝脏组织总RNA,通过与miRNA芯片杂交,经统计学分析,以变化倍数≥2倍(P香猪肝脏中表达丰度差异的miRNA,并运用实时荧光定量PCR进行验证。结果发现,与3月龄相比,7月龄香猪肝脏中有11条miRNA表达下调和9条miRNA表达上调,下调倍数最多的是miR-27b,上调倍数最多的是miR-155。对选取的4条差异表达的miRNA进行实时荧光定量PCR反应,结果显示,4条miRNA表达变化趋势与芯片结果一致。本研究结果表明,不同月龄香猪肝脏中的miRNA表达丰度有差异,其中一些可能参与了机体生长发育时期肝细胞的脂肪代谢过程。

关键词： miRNA表达谱香猪肝脏

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调控香猪繁殖候选miRNA筛选

中国畜牧兽医 2021年第9期48卷 3118-3127页

作者：禄欢牛熙黄娅丽李升冉雪琴黄世会王嘉福贵州大学农业生物工程研究院贵阳550025 贵州大学动物科学学院贵阳550025

研究旨在从香猪卵巢small RNA测序数据中挖掘调控香猪繁殖的microRNA(miRNA),解析miRNA调控香猪卵巢功能及繁殖性状的分子机制,对于猪的遗传选育具有重要意义。研究选取发情期和间情期的香猪各4头,屠宰后取其卵巢组织,提取总RNA进行smal... 详细信息

研究旨在从香猪卵巢small RNA测序数据中挖掘调控香猪繁殖的microRNA(miRNA),解析miRNA调控香猪卵巢功能及繁殖性状的分子机制,对于猪的遗传选育具有重要意义。研究选取发情期和间情期的香猪各4头,屠宰后取其卵巢组织,提取总RNA进行small RNA测序,利用生物信息学方法检测miRNA表达谱,筛选差异表达的miRNA,预测差异表达miRNA靶基因,并对靶基因进行GO功能富集和KEGG通路富集分析。结果显示,香猪卵巢组织中miRNA在染色体上呈不均匀分布,主要分布于1号染色体和X染色体上。香猪卵巢中共有627个已知猪miRNAs表达,其中有34个差异表达miRNAs,表达量前五的分别是miR-23、let-7i-5p、miR-103、miR-30e-5p和miR-1271-5p。GO功能分析结果显示,靶基因主要参与的生物学过程是细胞过程(cellular process),主要分布于细胞(cell),主要分子功能是结合(binding);KEGG显著富集通路中,促性腺激素释放激素受体通路(gonadotropin-releasing hormone receptor pathway)、胰岛素样生长因子通路(IGF pathway)和表皮生长因子受体信号通路(EGF receptor signaling pathway)与卵母细胞的发育成熟相关,因此推测miR-23b、let-7i-5p、miR-103、miR-30e-5p和miR-1271-5p可能参与了香猪繁殖调控。本研究初步筛选出5个可能调控香猪繁殖性能的miRNAs,可为从分子水平提高香猪产仔数提供理论基础。

关键词： miRNA 卵巢靶基因繁殖力香猪

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香猪实验性乙型脑炎模型的研究

中华实验和临床病毒学杂志 1993年第4期7卷 377-379页

作者：殷国庆赵红南京市传染病医院，江苏 210003

用乙型脑炎A2病毒株在ICR小鼠脑内传代及扩增病毒，制成20%鼠脑悬液。按2.5ml/kg给香猪静脉内注射，同时颅内接种1ml。被攻击的香猪5天内出现典型的乙型脑炎临床表现。组织学及超微结构也出现与人类乙型脑炎相似的表现。

关键词：乙型脑炎病毒动物模型香猪乙型脑炎

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香猪卵巢microRNA组学研究

香猪卵巢microRNA组学研究

作者：禄欢贵州大学

学位级别：硕士

microRNA(miRNA)是一类内源性非编码RNA长度约为22 nt左右,miRNA通过与靶基因m RNA的3’非翻译区(3’Untranslated Region,3’UTR)结合,降解m RNA或抑制m RNA翻译过程来发挥转录后调控作用。miRNA广泛分布于各种真核生物,参与机体细胞... 详细信息

microRNA(miRNA)是一类内源性非编码RNA长度约为22 nt左右,miRNA通过与靶基因m RNA的3’非翻译区(3’Untranslated Region,3’UTR)结合,降解m RNA或抑制m RNA翻译过程来发挥转录后调控作用。miRNA广泛分布于各种真核生物,参与机体细胞增殖、分化、凋亡、胚胎发育、物质代谢、肿瘤的发生抑制和细胞信号转导等各项生命活动。香猪是贵州地方猪品种之一,是重要的经济动物主要特点是性成熟早产仔数少,产仔数少是阻碍香猪生产业发展的关键因素。本研究旨在从香猪卵巢small RNA测序数据中挖掘调控香猪发情的miRNA分子,分析香猪发的情分子调控机制,为从分子水平解析香猪产仔数提供理论依据。研究以发情期和发情间期的香猪为供试动物,屠宰后取其卵巢组织提取总RNA进行small RNA测序,利用生物信息学方法检测香猪卵巢miRNA表达谱筛选差异表达的miRNA,并预测差异表达miRNA的靶基因,对靶基因进行GO功能富集和KEGG通路富集分析,最后初步筛选出香猪卵巢中对香猪发情具有调控作用的miRNA。本研究获得的结果如下:1.基于高通量small RNA测序,利用生物信息学方法检测香猪卵巢miRNA表达谱。发情间期的香猪卵巢中miRNA序列比发情期多,发情期香猪卵巢中共有68342条miRNA序列,其中61448条来源于猪6894条来源于与人牛小鼠的同源,发情间期的香猪的卵巢中共有71122条miRNA序列,其中63530条来源于猪7592条来源于与人牛小鼠的同源。2.发情期和发情间期的香猪卵巢miRNA序列,均表现出与牛的miRNA序列同源的最多与小鼠同源的最少,发情期和发情间期的香猪卵巢miRNA序列中分别有26.50%和25.40%的序列在猪、人、牛、小鼠四个物种间保守。3.香猪卵巢中miRNA序列注释显示,发情间期的香猪卵巢中表达的miRNA分子比发情期要丰富。发情间期和发情期香猪卵巢中分别有607和594个miRNA分子表达,其中577个在发情期和发情间期共同表达,发情期香猪卵巢特有表达17个,发情间期特有表达30个。4.根据差异表达的阈值P1或log FC香猪的发情具有调控作用的miRNA分子(mi R-23b、let-7i-5p、mi R-103、mi R-30e-5p、mi R-1271-5p、mi R-181a、mi R-125b)。6.经过实时荧光定量PCR试验验证,随机检测的6个miRNA序列(mi R-133b、mi R-143-3p、mi R-7-5p、mi R-500-5p、mi R-145-5p、mi R-23b),在发情期与发情间期的香猪卵巢中均有表达,与测序分析结果比较发现大致趋势是一致的。

关键词：香猪卵巢 miRNA 发情周期

香猪基因组10个结构变异标记的鉴定及育种应用研究

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香猪基因组10个结构变异标记的鉴定及育种应用研究

作者：王志勇贵州大学

学位级别：硕士

为了研究结构变异(Structural variation,SV)位点在香猪群体中的多态性以及结构变异位点与香猪生长繁殖性状之间的关系。在实验室前期研究中通过对18头贵州地方猪进行基因组重测序,并对测序数据质控、序列比对,经过生物信息学分析,挑选... 详细信息

为了研究结构变异(Structural variation,SV)位点在香猪群体中的多态性以及结构变异位点与香猪生长繁殖性状之间的关系。在实验室前期研究中通过对18头贵州地方猪进行基因组重测序,并对测序数据质控、序列比对,经过生物信息学分析,挑选并确定了与香猪生长繁殖相关的10个结构变异位点。为了验证10个结构变异位点是否影响香猪的生长性状和繁殖性状。本研究以242头189天左右日龄的香猪和148头母猪为研究对象,利用PCR技术对10个结构变异位点进行基因分型检测,统计分析各个SV位点在香猪群体中的遗传信息,并将SV位点与香猪生长指标进行关联分析;利用10个SV位点作为标记位点,构建GBLUP育种模型,使用Python程序计算148头母猪个体产仔数基因组育种值,筛选种猪。研究结果如下:1.本研究通过PCR技术对10个SV位点进行基因检测分析后发现,所选择的SV位点在242头香猪群体中都存在多态性。其中JAK2-I-sv289、ADCY3-I-sv506、KLF3-I-sv250、PDIA4-I-sv275、ACSL3-I-sv300、THOC2-I-sv199共6个位点均属于中度多态(0.250.05)。***2-I-sv289位点与香猪的平均日增重、体长和腹围显著相关且均呈极弱相关关系(0香猪的胸围和腹围显著相关且均呈极弱相关关系(0香猪的胸围和腹围显著相关(P香猪的腹围显著相关且呈极弱相关关系(0香猪的体宽和腹围显著相关且呈极弱相关关系(0香猪的体长、体高和腹围显著相关且呈极弱相关关系(0香猪的管围显著相关且呈极弱相关关系(0香猪的平均日增重、管围显著相关且呈极弱相关关系(0香猪的各体尺指标间均不存在相关性。综上所述:JAK2-I-sv289、KLF3-I-sv250、NAMPT-I-sv579、ACSL3-I-sv300、IGF1-I-sv302、PLCB1-I-sv313共6个结构变异位点可作为选育香猪生长指标的分子标记位点。3.以10个结构变异位点作为分子标记位点,构建GBLUP育种模型,使用Python程序计算148头母猪个体产仔数的基因组育种值,根据育种值大小,进行降序排序,共筛选出38头优良母猪,其余母猪作为备用种猪使用。本文的研究结果对于了解、掌握香猪的生长发育与繁殖情况,开辟了正确的使用方法,挑选验证影响香猪生长繁殖性状的10个SV位点,对更好发挥品种效应具有重要的意义,可为香猪的生长发育及繁殖性状分子标记辅助选择提供参考,为优良品种的选育奠定了基础。

关键词：香猪生长性状结构变异位点关联分析基因组育种值