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中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 2023年第3期58卷 250-255页

作者：霍慧敏姚茜赖永静卢苇刘春磊黄中恒韦正波谢莹广西医科大学生命科学研究院南宁530021 广西区域性高发肿瘤早期防治研究重点实验室南宁530021 广西医科大学第一附属医院耳鼻咽喉头颈外科南宁530021 广西医科大学附属肿瘤医院头颈外科南宁530021

目的验证首日悬浮法对于提高鼻咽癌类器官(nasopharyngeal carcinoma-patient derived organoids,NPC-PDO)构建成功率的有效性。方法收集2022年1月至7月广西医科大学附属肿瘤医院和广西医科大学第一附属医院初诊的14例鼻咽癌(nasopharyn... 详细信息

目的验证首日悬浮法对于提高鼻咽癌类器官(nasopharyngeal carcinoma-patient derived organoids,NPC-PDO)构建成功率的有效性。方法收集2022年1月至7月广西医科大学附属肿瘤医院和广西医科大学第一附属医院初诊的14例鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)患者样本,男性患者13例,女性1例,年龄(43.0±12.0)岁。取其中3例患者的肿瘤样本消化成单细胞悬液后平均分成2组,同时采用直接接种法和首日悬浮法对比NPC-PDO的构建效果;取余下11例患者样本随机采用直接接种法或首日悬浮法进行NPC-PDO的构建。通过光学显微镜对比两种方法构建的NPC-PDO直径大小和成球数量;采用3D细胞活力检测试剂盒对比细胞活力;采用台盼蓝染色计算细胞存活率;对可成功传代5代以上且经病理学检测与来源组织一致的病例数进行统计;采用活细胞工作站观察悬浮过夜状态下细胞的动态变化情况。采用独立样本t检验对2组计量资料进行比较,采用卡方检验对分类资料进行比较。结果相比于直接接种法,首日悬浮法构建的NPC-PDO直径和成球数都增加,且保持更高的细胞活性,同时,构建成功率明显提高(80.0%比16.7%,χ^(2)=4.41,P悬浮状态下部分细胞发生聚集现象并提高了增殖能力。结论首日悬浮法可以在样本量较少时提高NPC-PDO的培养成功率。

关键词：鼻咽肿瘤鼻咽癌类器官 3D细胞培养首日悬浮法

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