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饱和氢气生理盐水对油酸致急性肺损伤大鼠肺的保护作用

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中国急救医学 2011年第5期31卷 426-429页

作者：应佑国何建解放军第二军医大学附属长海医院急诊科上海200433

目的探讨饱和氢气生理盐水是否对油酸所致大鼠急性肺损伤具有保护作用.方法将健康成年SD大鼠30只,随机分为对照组、油酸＋生理盐水组和油酸＋饱和氢气生理盐水组,每组10只.对照组（假手术组）：予股动脉置管留取血气标本,待血流动力... 详细信息

目的探讨饱和氢气生理盐水是否对油酸所致大鼠急性肺损伤具有保护作用.方法将健康成年SD大鼠30只,随机分为对照组、油酸＋生理盐水组和油酸＋饱和氢气生理盐水组,每组10只.对照组（假手术组）：予股动脉置管留取血气标本,待血流动力学稳定后经尾静脉注入生理盐水0.1 mL/kg;油酸＋生理盐水组：注入高纯度油酸0.1 mL/kg,余同对照组;油酸＋饱和氢气生理盐水组：注入高纯度油酸5 min后给予腹腔注射饱和氢气生理盐水5 mL/kg,余同油酸＋生理盐水组;同时予前两组腹腔注射等量生理盐水,3 h后再次留取动脉血标本并处死大鼠.检测血气分析,肺组织髓过氧化物酶（MPO）活性、丙二醛（MDA）及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）和NF-κB p65水平;观察肺组织病理变化.结果与注射油酸前比较,生理盐水治疗组和饱和氢气生理盐水治疗组在注射油酸3 h后PaO2显著降低（P〈0.05）,且显著低于对照组（P〈0.05）.此外,饱和氢气生理盐水治疗组PaO2显著高于生理盐水治疗组（P〈0.05）.与对照组比较,生理盐水治疗组和饱和生理氢气盐水治疗组肺组织MPO活性及MDA水平显著增加（P〈0.01,P〈0.05）,且饱和氢气生理盐水治疗组显著低于生理盐水治疗组（P〈0.05）.生理盐水治疗组和饱和氢气生理盐水治疗组肺组织TNF-α、IL-1β和NF-κB p65水平显著高于对照组（P〈0.05）,且饱和氢气生理盐水治疗组显著低于生理盐水治疗组（P〈0.05）.结论饱和氢气生理盐水能够降低大鼠油酸肺损伤模型中肺的损伤程度,其机制可能与氢分子在体内的选择性抗氧化作用有关.

关键词：饱和氢气生理盐水肺损伤油酸氧化应激抗氧化

饱和氢气生理盐水对高龄大鼠肾脏衰老影响的研究

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饱和氢气生理盐水对高龄大鼠肾脏衰老影响的研究

作者：袁晓亮苏州大学

学位级别：硕士

目的：观察饱和氢气生理盐水对高龄大鼠肾脏衰老氧化指标和肾脏组织P53、P16、SIRT1表达的影响，研究其发挥抗肾脏衰老作用及其机制，为延缓肾脏衰老、防治慢性肾脏疾病提供理论基础和新方法。方法：(1)分组：清洁级健康雄性成年(3个月... 详细信息

目的：观察饱和氢气生理盐水对高龄大鼠肾脏衰老氧化指标和肾脏组织P53、P16、SIRT1表达的影响，研究其发挥抗肾脏衰老作用及其机制，为延缓肾脏衰老、防治慢性肾脏疾病提供理论基础和新方法。方法：(1)分组：清洁级健康雄性成年(3个月)SD大鼠10只，为成年对照组。清洁级健康雄性高龄(180个月)SD大鼠20只，随机分成两组，高龄组n=10，饱和氢气生理盐水组n=10;(2)实验步骤：成年组及高龄组以5ml/kg·d生理盐水灌胃，饱和氢气生理盐水组以5ml/kg·d饱和氢气生理盐水灌胃，其余条件三组等同，喂养八周后取所有大鼠肾脏组织;(3)标本检测：肾脏衰老氧化指标SOD、MDA及8-OHdG;采用RT-PCR观察肾组织中P53、P16、SIRT1的表达水平。结果：(1)衰老氧化指标：高龄组SOD活力较成年对照组明显降低(125.5±7.262VS165.7±8.631，P=0.0026);高龄组肾脏组织MDA和8-OHdG的含量均较成年对照组明显升高(0.630±0.099VS0.336±0.056，1.609±0.119VS1.046±0.083)，P值分别为0.0197和0.0013;饱和氢气生理盐水组SOD活力较高龄组明显升高(202.8±16.78VS125.5±7.262，P=0.0006);饱和氢气生理盐水组肾脏组织MDA和8-OHdG均较高龄组明显降低(0.214±0.654VS0.630±0.099,0.598±0.122VS1.609±0.119)，P值分别为0.0029和饱和氢气生理盐水组肾脏组织P53和P16mRNA表达量均较高龄组明显降低(0.03757±0.00477VS0.19540±0.02843,0.00006±0.00001VS0.00058±0.00013)， P值分别为饱和氢气生理盐水组SIRT1mRNA表达量较高龄组明显升高(0.04177±0.00310VS0.00810±0.00192，P饱和氢气生理盐水能够发挥延缓肾脏衰老的作用;其延缓肾脏衰老作用可能与抑制P53、P16而提高SIRT1的表达有关。

关键词：饱和氢气生理盐水高龄大鼠肾脏衰老

饱和氢气生理盐水对大鼠原位肝移植术后脑保护作用及机制研究

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饱和氢气生理盐水对大鼠原位肝移植术后脑保护作用及机制研究

作者：陈铭欣天津医科大学

学位级别：硕士

目的只有拥有良好的血液循环,才能维持机体各组织与器官的正常代谢,才能维持机体的功能。组织细胞发生缺血性损伤(ischemia injury),是局部组织、器官由于各种原因造成了缺血。随着学术研究和临床实验的发展,研究人员发现在缺血一定时间... 详细信息

目的只有拥有良好的血液循环,才能维持机体各组织与器官的正常代谢,才能维持机体的功能。组织细胞发生缺血性损伤(ischemia injury),是局部组织、器官由于各种原因造成了缺血。随着学术研究和临床实验的发展,研究人员发现在缺血一定时间下,重新恢复供血,普遍会发生器官组织功能代谢障碍及结构破坏。说明虽然恢复了供血,但是原来缺血的组织和器官功能反而退化了,甚至比缺血前的损伤还要严重。因此将这种血液再灌注后缺血性损伤进一步加重的现象称为缺血再灌注损伤(ischemia-reperfusion injury,IRI)。近年来,随着肝移植手术的大规模开展,人们越来越多地重视肝移植手术的器官保护问题。由于经历缺血与再灌注过程,不同器官面临着不同程度的损伤,影响了肝移植患者术后的远期预后。引起缺血再灌注损伤的机制,目前考虑与氧化应激及细胞凋亡有关。本研究拟评价饱和氢气生理盐水对大鼠原位肝移植术后急性脑损伤的保护作用,进一步探讨自噬参与下脑保护效应的分子机制。方法健康成年雄性SD大鼠56只,周龄80周,体重22050g,采用随机数字表法分为4组,每组8只(n=8):假手术组(S组)、肝移植组(OLT组)、饱和氢气生理盐水处理组(HS组)及氯喹预处理组(CQ组)。S组行单纯开关腹操作,并游离相应血管;OLT组建立大鼠原位肝移植模型,并于无肝期前5min经下腔静脉缓慢注射生理盐水(6ml/kg);HS组同样建立大鼠原位肝移植模型,并于无肝期前5min经下腔静脉缓慢注射饱和氢气生理盐水(6ml/kg);CQ组于模型建立前1h经腹腔注射自噬抑制剂氯喹60mg/kg,其它处理同HS组。再灌注后6h通过组织学指标观察脑损伤情况;TUNEL染色定量检测细胞凋亡情况;western blot检测自噬及凋亡相关蛋白的表达水平。结果与S组比较,OLT组MDA升高,SOD降低,细胞凋亡明显增加,Caspase-3和cyt c的表达水平显著上调;与OLT组比,HS组MDA水平低,SOD水平高,细胞凋亡明显减少,并且Caspase-3和cyt c的表达水平显著降低,与此同时,p53磷酸化、LC3Ⅱ及beclin-1的表达明显上调;而CQ组应用氯喹,抵消了一部分饱和氢气生理盐水的作用。OLT组、HS组和CQ组凋亡指数显著高于S组,HS组凋亡指数显著低于OLT组,而CQ组凋亡指数明显高于HS组。结论氢,作为一种还原剂,具有抗氧化,抗凋亡的特性。氢的组织保护作用关键在于中和自由基。与大多数熟知的抗氧化剂不同,氢的分布有许多特点:它可以穿透生物膜,渗透至细胞质,线粒体和细胞核。虽然氢的活性属于中等,但是它快速的气体扩散速度,使它高效地降低细胞毒性自由基。氢气可选择性清除羟自由基(?OH)及过氧亚硝基(ONOO?),而不与其它具有生理功能的活性氧自由基反应。本研究于无肝期前5min经下腔静脉注射饱和氢气生理盐水6ml/kg,结果表明,其脑组织MDA含量降低,SOD活性升高,大鼠脑组织病理改变得到明显改善,提示饱和氢气生理盐水可以减轻肝移植术后脑组织氧化应激损伤。进一步的研究结果显示,饱和氢气生理盐水处理明显上调p53磷酸化水平,并且LC3Ⅱ和beclin-1表达水平升高,活化Caspase-3和cyt c的表达均显著下调,说明饱和氢气生理盐水可通过调控p53的表达,诱导细胞自噬;自噬可以抑制由氧化应激介导的细胞凋亡,从而缓解组织损伤。因此,饱和氢气生理盐水可缓解大鼠原位肝移植术后急性脑损伤。

关键词：氢饱和氢气生理盐水肝移植脑损伤自噬凋亡

饱和氢气生理盐水对大鼠心肌缺血再灌注损伤模型的影响

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中华保健医学杂志 2014年第4期16卷 296-298页

作者：樊清波赵江涛简立国秦秉玉河南省人民医院重症医学科郑州450003 郑州大学第二附属医院心血管内科

目的研究饱和氢气生理盐水对大鼠心肌缺血再灌注模型梗死质量百分比、血流动力学变化及血清肿瘤坏死因子(TNF-α)表达的影响。方法 90只大鼠随机分为3组:G1组,假手术组(n=30);G2组,缺血再灌注(I/R)组(n=30);G3组,缺血再灌注用饱和氢气... 详细信息

目的研究饱和氢气生理盐水对大鼠心肌缺血再灌注模型梗死质量百分比、血流动力学变化及血清肿瘤坏死因子(TNF-α)表达的影响。方法 90只大鼠随机分为3组:G1组,假手术组(n=30);G2组,缺血再灌注(I/R)组(n=30);G3组,缺血再灌注用饱和氢气生理盐水处理组(n=30)。结扎大鼠冠状动脉前降支(LAD)30 min,松扎再灌注24 h,制备心肌缺血再灌注损伤模型,再灌注24 h后测量心肌梗死质量百分比、血流动力学及TNF-α的基因表达情况。结果与G1组相比,再灌注24 h后G2、G3组左心室收缩压(LVSP)、等容收缩期左心室压力上升的最大速率[+(dp/dt)max]、等容舒张期左心室压力下降的最大速率[-(dp/dt)max]显著下降(P饱和氢气生理盐水能有效减小梗死质量百分比,改善血流动力学参数,其机制可能与其降低炎性反应相关。

关键词：饱和氢气生理盐水缺血再灌注血流动力学基因表达

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饱和氢气盐水对大鼠急性肺损伤的保护作用

中国急救医学 2013年第4期33卷 337-341,I0001页

作者：应佑国秦宗和何建上海交通大学医学院附属第三人民医院ICU 上海201900 解放军第二军医大学附属长海医院急诊科上海

目的探讨饱和氢气盐水在油酸导致的大鼠急性肺损伤（ALI）中的作用及其机制。方法将健康成年SD大鼠80只随机分为4组：对照（Ⅰ）组、肺损伤（Ⅱ）组、肺损伤静脉H，干预（Ⅲ）组和肺损伤腹腔H2干预（Ⅳ）组，每组20只。检测血气分析；... 详细信息

目的探讨饱和氢气盐水在油酸导致的大鼠急性肺损伤（ALI）中的作用及其机制。方法将健康成年SD大鼠80只随机分为4组：对照（Ⅰ）组、肺损伤（Ⅱ）组、肺损伤静脉H，干预（Ⅲ）组和肺损伤腹腔H2干预（Ⅳ）组，每组20只。检测血气分析；肺组织髓过氧化物酶（MPO）活性、丙二醛（MDA）以及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）和NF-κBp65含量；并观察肺组织病理变化。结果与注射油酸前比较，Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组在注射油酸3h后PaO2显著降低（P〈0．05）。同时与I组比较也存在PaO2显著降低（P〈0．05）。此外，Ⅲ和Ⅳ组PaO2显著高于Ⅱ组（P〈0．05），且Ⅳ组PaO：高于Ⅲ组（P〈0．05）。与I组比较，Ⅱ组肺组织MPO活性及MDA水平显著增加（P〈0．01），Ⅲ和Ⅳ组肺组织MPO活性及MDA水平明显增加（P〈0．05），Ⅲ和Ⅳ组肺组织MPO活性及MDA水平与Ⅰ组比较显著降低（P〈0．05），且Ⅳ组肺组织MPO活性及MDA水平较Ⅲ组低（P〈0．05）。Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组大鼠肺组织TNF-α、IL-1β和NF-κBp65水平明显高于Ⅰ组（P〈0．05）。与Ⅱ组比较饱和氢气盐水治疗可降低油酸致肺损伤大鼠肺组织TNF-α、IL-1β和NF-κBp65水平（P〈0．05），且腹腔给药治疗较尾静脉给药治疗可更进一步降低油酸致肺损伤大鼠肺组织TNF-α、IL-1β和NF-κBp65水平（P〈0．05）。结论饱和氢气生理盐水能够降低大鼠油酸肺损伤模型中肺的损伤程度，且经腹腔注射给药效果更好，其机制可能与氢分子在体内的选择性抗氧化作用以及对肺组织内炎细胞浸润和炎症级联反应的抑制有关。

关键词：饱和氢气生理盐水肺损伤氧化应激抗氧化

Wnt/β-catenin通路在HS抑制大鼠肝脏缺血/再灌注损伤中的作用

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Wnt/β-catenin通路在HS抑制大鼠肝脏缺血/再灌注损伤中的作用

作者：方祀福暨南大学

学位级别：硕士

目的通过建立SD大鼠肝脏部分缺血再灌注损伤模型,观察饱和氢气生理盐水预处理减轻大鼠肝缺血再灌注损伤作用。通过病理检测、测定大鼠肝功能、肝组织氧化应激指标和Wnt/β-catenin通路相关蛋白表达水平,从分子学层面探讨Wnt/β-catenin... 详细信息

目的通过建立SD大鼠肝脏部分缺血再灌注损伤模型,观察饱和氢气生理盐水预处理减轻大鼠肝缺血再灌注损伤作用。通过病理检测、测定大鼠肝功能、肝组织氧化应激指标和Wnt/β-catenin通路相关蛋白表达水平,从分子学层面探讨Wnt/β-catenin通路在氢气生理盐水减轻大鼠肝缺血再灌注损伤中的作用,为氢气在减轻肝脏缺血再灌注损伤的临床应用提供理论基础。方法随机将40只雄性SD大鼠分为5组,Sham组,I/R1+NS组和I/R1+HS组,I/R2+NS组和I/R2+HS组。除Sham组外,I/R1组、I/R2组缺血时间分别为20min,60min,其再灌注时间均为6h。含NS组术前15分钟腹腔注射生理盐水,HS组术前15分钟腹腔注射饱和氢气生理盐水,剂量为10ml/Kg。采用国内外广泛认可的Nauta法建立肝缺血再灌注模型,阻断70%的肝脏血液供应。在各组大鼠肝脏再灌注6h后取检测样本,检测血清ALT、AST含量;比色法检测肝组织中MDA、MPO含量;显微镜观察肝组织病理形态学改变;应用TUNEL检测肝细胞凋亡情况;Western blot检测肝组织β-连环蛋白和DKK-1蛋白蛋白表达水平。结果1.对大鼠肝脏缺血时间分别为20min、60min,恢复血流再灌注6h后,各对照组和试验组与Sham组对比,血清中ALT、AST水平明显升高(P饱和氢气生理盐水预处理明显减轻大鼠肝脏缺血再灌注损伤。2.饱和氢气生理盐水可能通过Wnt/β-catenin信号通路发挥作用,通过抑制β-catenin蛋白的降解,抑制DKK-1蛋白的表达,从而进入细胞核调控细胞凋亡和炎症起到对肝脏缺血再灌注的保护作用。

关键词：缺血再灌注饱和氢气生理盐水氧化应激 Wnt/β-catenin通路大鼠肝脏

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不同给氢方式对兔氢气代谢的影响

中国组织工程研究 2012年第11期16卷 2023-2027页

作者：黄国庆詹蔚熊艳文明祥李颖庆廖晓星中山大学附属第一医院急诊科广东省广州市510080

背景:不同给氢方式均可对缺血再灌注损伤产生治疗作用,目前尚缺乏不同给氢方式对机体氢气代谢影响的研究。目的:比较等体积氢水腹腔、静脉注射及氢气腹腔注射对兔氢气代谢的影响,以利于提供更优化的氢气治疗方案。方法:20只新西兰大白... 详细信息

背景:不同给氢方式均可对缺血再灌注损伤产生治疗作用,目前尚缺乏不同给氢方式对机体氢气代谢影响的研究。目的:比较等体积氢水腹腔、静脉注射及氢气腹腔注射对兔氢气代谢的影响,以利于提供更优化的氢气治疗方案。方法:20只新西兰大白兔在监测呼气氢气基础值后,依次予以饱和氢气生理盐水、氢气10mL/kg腹腔注射及氢水10mL/kg10min内静脉泵入,持续监测呼气氢气浓度,等降至基础值并稳定30min以上后再进行下一方式给氢干预。记录各种给氢方式呼气氢气浓度的达峰时间、峰浓度,计算半衰期和曲线下面积,比较3种给氢方式对呼气氢气浓度的影响。结果与结论:腹腔注射氢水、氢气及静脉注射氢水3种方式达峰时间分别为(3.25±1.80),(17.8±6.48)和(7.45±1.39)min,差异有显著性意义(P氢气均可迅速提高呼气氢气浓度,腹腔注射氢气能长时间维持呼气氢气高浓度。

关键词：氢气饱和氢气生理盐水代谢腹腔注射静脉注射

腹腔注射氢气与腹腔氢水对大鼠氢气代谢的影响

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广西医学 2012年第11期34卷 1488-1491页

作者：林涛黄国庆文明祥廖晓星广西桂林市第二人民医院急诊科桂林市541001 中山大学附属第一医院急诊科广州市510080

目的比较腹腔注射氢气与氢水对鼠氢气代谢的影响。方法 20只SD大鼠,在监测呼气氢气基础值后,均先后腹腔注射氢气及饱和氢气生理盐水1 ml/100 g及2 ml/100 g。记录不同给氢方式呼气氢气浓度的达峰时间、峰浓度,计算半衰期和曲线下面积,... 详细信息

目的比较腹腔注射氢气与氢水对鼠氢气代谢的影响。方法 20只SD大鼠,在监测呼气氢气基础值后,均先后腹腔注射氢气及饱和氢气生理盐水1 ml/100 g及2 ml/100 g。记录不同给氢方式呼气氢气浓度的达峰时间、峰浓度,计算半衰期和曲线下面积,比较不同给氢方式对呼气氢气浓度的影响。结果腹腔注射1 ml/100 g氢水、氢气、达峰时间(Tmax)分别为(3.48±1.54)min、(15.85±7.24)min,注射2 ml/100 g氢水、氢气分别为(5.48±1.88)min、(21.25±11.65)min;1 ml/100 g氢水、氢气峰浓度(Cmax)分别为(35.04±12.43)ppm、(44.43±16.13)ppm,2 ml/100 g氢水、氢气分别为(49.45±18.89)ppm、(62.82±23.74)ppm,同剂量不同方式比较及同方式不同剂量比较,差异有统计学意义(P氢气半衰期(T1/2)分别为(8.37±3.22)min、(125.08±73.68)min,双倍剂量氢水、氢气分别为(11.21±4.84)min、(168.46±85.77)min;1 ml/100 g氢水、氢气较基础值增加的曲线下面积(AUC)分别为(279.43±161.67)ppm/min、(4 249.87±1 689.74)ppm/min,2 ml/100 g氢水、氢气分别为(384.03±172.25)ppm/min、(6 834.04±2471.67)ppm/min。可见同剂量不同方式比较及同方式不同剂量比较差异有统计学意义(P氢气均可迅速提高呼气氢气浓度,存在量效关系。腹腔注射氢气能长时间维持呼气氢气高浓度。

关键词：氢气饱和氢气生理盐水大鼠代谢