检索结果-南通市图书馆

腺苷通过内质网应激诱导食管癌ec109细胞凋亡

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

腺苷通过内质网应激诱导食管癌EC109细胞凋亡

作者：韦碧柳汕头大学

学位级别：硕士

研究目的: 探讨内质网应激在腺苷(adenosine)诱导ec109细胞凋亡中的作用及其分子机制。方法: ec109细胞培养后按以下方法进行实验,(1)四氮唑蓝检测法(MTT):腺苷2 mmol L作用于ec109细胞不同时间(24～72 h)及将ec109细胞暴露于不同浓度... 详细信息

研究目的: 探讨内质网应激在腺苷(adenosine)诱导ec109细胞凋亡中的作用及其分子机制。方法: ec109细胞培养后按以下方法进行实验,(1)四氮唑蓝检测法(MTT):腺苷2 mmol L作用于ec109细胞不同时间(24～72 h)及将ec109细胞暴露于不同浓度腺苷(0.5～4 mmol L)作用36 h,四氮唑蓝检测法观察腺苷对ec109细胞生存率的时效和量效关系。(2)原位末端转移酶标记技术(TUNEL):不同浓度腺苷(0.5～4 mmol L)处理ec109细胞36 h ,原位末端转移酶标记技术检测细胞凋亡情况(3)免疫荧光染色法:细胞贴壁后加入正常培养基(空白组和对照组)或含腺苷2.0 mmol L培养基(腺苷处理组)处理细胞36 h,免疫荧光观察腺苷2.0 mmol L作用前后内质网应激相关蛋白(GRP78、Caspase-4、Caspase-3、CHOP)的表达及亚细胞定位。(4)免疫印迹法(Western blotting):细胞传代至培养瓶,24 h后分别加入含不同浓度腺苷(0.5～4 mmol L)的培养基处理36 h,提取细胞总蛋白质,免疫印迹法检测细胞内质网应激相关蛋白(GRP78、Caspase-4、CHOP)及NF-κB和凋亡执行者Caspase-3分子的表达情况。结果: 1、腺苷2 mmol L与ec109细胞作用24,36,48和72 h,细胞存活率分别为(57.7 15.0)%,(56.5 11.1)%,(43.8 5.7)%和(28.8 4.1)%,呈时间依赖性下降(r=0.9192,Pec109细胞36 h,随药物浓度增加,细胞存活率依次为(83.14 11.2)%,(67.86 6.72)%,(55.31 5.01)%和(45.39 5.45)%,呈剂量依赖性降低(r=0.8252,Pec109细胞36 h,细胞凋亡率分别为(15.5 1.1)%,(28.2 0.8)%,(40.1 2.2)%和(50.6 1.3)%,与对照组(2.1 0.3)%相比均明显增加(r =0.874,Pec109细胞作用36 h,免疫荧光法检测结果表明,对照组ec109细胞胞浆中出现GRP78的表达,腺苷处理组表达增多;Caspase-4,Caspase-3和CHOP在对照组ec109细胞胞浆中无表达,提示ec109细胞经腺苷处理后Caspase-4,Caspase-3和CHOP蛋白出现表达并发生核移位 4、Western blotting结果表明GRP78, Caspase-4, Caspase-3, CHOP和NF-κB表达量呈剂量依赖性增加(rGRP78=0.9471, rCaspase-4=0.8977,rCaspase-3=0.968, rCHOP=0.9762, rNF-κB=0.9471, Pec109细胞凋亡,与我们既往的对HepG2细胞研究结果一致。 2、在腺苷诱导ec109细胞凋亡过程中,内质网应激相关蛋白GRP78、Caspase-4、Caspase-3、CHOP、NF-κΒ的表达明显升高Caspase-4、Caspase-3、CHOP发生明显核易位从胞浆转移进入胞核内,表明内质网应激通路被活化,ec109细胞凋亡与内质网应激途径可能有关。

关键词：腺苷细胞凋亡内质网应激食管癌ec109细胞

白藜芦醇联用紫杉醇对食管癌ec109细胞凋亡的影响

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

中医肿瘤学杂志 2020年第3期2卷 43-48,59页

作者：刘晓洁李永梅霍峻锋赵劲竹董亚龙周凯瑞张雪燕李蕾蕾王淙郑州大学药物研究院河南郑州450001 滨州医学院烟台附属医院山东烟台264000 河南省新乡市第二人民医院河南新乡453000

目的探讨白藜芦醇联合紫杉醇对食管癌ec109细胞凋亡的影响及其机制。方法实验分为白藜芦醇组、紫杉醇组、白藜芦醇联用紫杉醇组以及空白对照组。采用MTT法检测各个用药组对ec109细胞活力的影响;采用流式细胞仪检测各个用药组对细胞凋亡... 详细信息

目的探讨白藜芦醇联合紫杉醇对食管癌ec109细胞凋亡的影响及其机制。方法实验分为白藜芦醇组、紫杉醇组、白藜芦醇联用紫杉醇组以及空白对照组。采用MTT法检测各个用药组对ec109细胞活力的影响;采用流式细胞仪检测各个用药组对细胞凋亡的影响;采用罗丹明123外排实验检测各个用药组细胞的外排功能;采用HPLC法检测各个用药组细胞内紫杉醇的含量。结果MTT实验结果显示,与单用紫杉醇相比,白藜芦醇减弱了紫杉醇对细胞增殖的抑制作用;克隆形成实验结果显示,与单用紫杉醇组相比,白藜芦醇和紫杉醇联用后,ec109细胞的克隆形成能力明显增强;Hochest 33258实验结果显示,白藜芦醇和紫杉醇联用后,相对于单用紫杉醇组,ec109细胞的凋亡小体以及核裂解数减少;流式细胞术分析细胞凋亡的结果显示,白藜芦醇和紫杉醇联用后,与单用紫杉醇组相比,凋亡率明显下降。HPLC和罗丹明123外排实验结果证明,白藜芦醇和紫杉醇联用后,与单用紫杉醇组相比,紫杉醇在细胞内的含量明显降低。结论白藜芦醇具有拮抗紫杉醇诱导的细胞凋亡作用,其机制可能与白藜芦醇增加了细胞的P-gp蛋白的表达、减少了紫杉醇在细胞内的滞留从而导致紫杉醇的药效减弱有关。

关键词：紫杉醇白藜芦醇拮抗作用食管癌ec109细胞

黄芪多糖诱导细胞自噬抑制食管癌ec109细胞增殖的研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中南药学 2022年第4期20卷 856-862页

作者：常明智张思雨郝艳娇张森露张晓丽河北北方学院河北张家口075000 新乡医学院三全学院河南新乡453003

目的研究黄芪多糖(APS)对食管癌ec109细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭能力的影响及其与细胞自噬的关系。方法体外培养ec109细胞,实验分为以下几组:浓度为0(对照组)、1.0、1.5、2.0 mg·mL^(-1)的黄芪多糖组,5μmol·L^(-1) PIK-Ⅲ(自噬抑制... 详细信息

目的研究黄芪多糖(APS)对食管癌ec109细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭能力的影响及其与细胞自噬的关系。方法体外培养ec109细胞,实验分为以下几组:浓度为0(对照组)、1.0、1.5、2.0 mg·mL^(-1)的黄芪多糖组,5μmol·L^(-1) PIK-Ⅲ(自噬抑制剂)组,2.0 mg·mL^(-1)黄芪多糖联合5μmol·L^(-1) PIK-Ⅲ组。采用MTT法检测各组ec109细胞的增殖活性;吖啶橙染色实验和流式细胞术检测黄芪多糖组细胞的凋亡;扫描电镜观察黄芪多糖组ec109细胞表面结构的变化;Transwell细胞迁移、侵袭实验分别检测黄芪多糖组ec109细胞的迁移和侵袭能力;激光共聚焦显微镜检测黄芪多糖组LC3的荧光表达强度;Western blot检测黄芪多糖组自噬相关蛋白Beclin1、P62和LC3B的表达水平。结果与对照组相比,随着黄芪多糖浓度的升高,ec109细胞增殖抑制率及凋亡率显著增加;细胞表面结构破坏程度增加;细胞迁移和侵袭能力受到显著抑制;LC3荧光表达强度增强(Peclin1和LC3B表达水平显著增高(Pec109细胞的增殖、迁移和侵袭,并促进ec109细胞的凋亡,其机制可能与黄芪多糖诱导ec109细胞自噬有关。

关键词：黄芪多糖食管癌ec109细胞增殖凋亡自噬

食管鳞癌组织与食管癌ec109细胞中ASPP2表达水平及临床意义

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

基层医学论坛 2020年第29期24卷 4276-4277页

作者：吴小丽吉安县中医院江西吉安343100

目的探讨食管鳞癌(ESCC)组织与食管癌ec109细胞中p53凋亡刺激蛋白2(ASPP2)表达水平及临床意义。方法选择我院2017年1月—2020年1月经手术病理诊断为ESCC的患者65例为研究对象,通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法测食管癌ec109细胞中ASPP2 m... 详细信息

目的探讨食管鳞癌(ESCC)组织与食管癌ec109细胞中p53凋亡刺激蛋白2(ASPP2)表达水平及临床意义。方法选择我院2017年1月—2020年1月经手术病理诊断为ESCC的患者65例为研究对象,通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法测食管癌ec109细胞中ASPP2 mRNA的表达,对照组未经顺铂干预,观察组采用顺铂干预。记录2组食管癌ec109细胞中ASPP2 mRNA表达水平,并分析ESCC组织与顺铂干预前后的食管癌ec109细胞中ASPP2表达的关系。结果观察组ASPP2 mRNA表达水平为(3.67±0.92)×102/μL,高于对照组的(1.24±0.51)×102/μL,差异有统计学意义(P食管癌ec109细胞中ASPP2表达相关(P食管癌ec109细胞中ASPP2表达水平,可为ESCC临床诊疗提供参考依据。

关键词：食管鳞癌食管癌ec109细胞 p53凋亡刺激蛋白2 相关性

二巯基丙磺酸钠对食管癌ec109细胞系和小鼠艾氏腹水癌的作用研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

山东医学高等专科学校学报 2008年第6期30卷 455-459页

作者：张永东山东医学高等专科学校山东临沂276002

目的观察二巯基丙磺酸钠(DMPS)对食管癌ec-109细胞和小鼠艾氏腹水癌的作用。方法在体外培养的食管癌ec-109细胞株中,通过MTT实验,观察不同浓度的DMPS对肿瘤细胞生长增殖的抑制作用;通过荧光显微镜和细胞凋亡-Hoechst33258染色试剂盒,观... 详细信息

目的观察二巯基丙磺酸钠(DMPS)对食管癌ec-109细胞和小鼠艾氏腹水癌的作用。方法在体外培养的食管癌ec-109细胞株中,通过MTT实验,观察不同浓度的DMPS对肿瘤细胞生长增殖的抑制作用;通过荧光显微镜和细胞凋亡-Hoechst33258染色试剂盒,观察不同浓度的DMPS对肿瘤细胞凋亡的诱导作用。在小鼠艾氏腹水癌中,观察不同浓度的DMPS对小鼠生存期的影响。结果体外实验中,终浓度为8、4、21、mmol/L的DMPS应用24 h和48 h后,对肿瘤细胞的生长增殖有显著地促进作用(P细胞的生长增殖(P细胞凋亡数量无显著改变(P>0.05),但应用72 h后,各浓度组可显著增加肿瘤细胞凋亡数量(P细胞的凋亡而显著地抑制体外食管癌ec109细胞系的生长增殖;腹腔注射751、50 mg/kg连续10 d,可延长艾氏腹水癌小鼠的生存时间。

关键词：二巯基丙磺酸钠食管癌ec109细胞小鼠艾氏腹水癌凋亡

甾体3-氰基-2-氨基吡啶5g对ec109细胞增殖、凋亡的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

郑州大学学报（医学版） 2018年第2期53卷 143-146页

作者：石晓丽秦甜甜刘卫华徐晓微张秀娟周凯瑞霍金玲杨腾蛟王淙郑州大学药物研究院郑州450001

目的:考察甾体3-氰基-2-氨基吡啶5g(S3C2A-5g)对食管癌ec109细胞增殖和凋亡的影响。方法:采用不同浓度的S3C2A-5g作用于ec109细胞不同时间后,MTT法检测细胞增殖;结晶紫染色检测细胞克隆形成;流式细胞术检测细胞凋亡;DCFH-DA染色检测细... 详细信息

目的:考察甾体3-氰基-2-氨基吡啶5g(S3C2A-5g)对食管癌ec109细胞增殖和凋亡的影响。方法:采用不同浓度的S3C2A-5g作用于ec109细胞不同时间后,MTT法检测细胞增殖;结晶紫染色检测细胞克隆形成;流式细胞术检测细胞凋亡;DCFH-DA染色检测细胞内活性氧的含量;采用Hoechst染色和免疫荧光法检测细胞水平的Cleaved Caspase-3表达。结果:S3C2A-5g对ec109细胞的增殖抑制作用有明显的浓度和时间依赖性,0.40μmol/L S3C2A-5g的抑制率可达到(24.31±1.05)%。S3C2A-5g抑制细胞克隆形成,诱导细胞凋亡。诱导凋亡的机制与活性氧和Cleaved Caspase通路相关。结论:S3C2A-5g通过抑制克隆形成,促进食管癌ec109细胞凋亡,进而抑制细胞增殖。其诱导细胞凋亡的机制可能与细胞内氧化损伤及Caspase家族相关蛋白激活有关。

关键词：食管癌ec109细胞细胞增殖细胞凋亡氧化损伤甾族化合物