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GOLPH3对食管癌细胞系增殖凋亡及放射敏感性影响研究

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中华放射肿瘤学杂志 2019年第8期28卷 606-609页

作者：刘杨蒋月杨原源刘晓徐文才郑州大学附属肿瘤医院/河南省肿瘤医院放疗科 450008

目的研究GOLPH3对食管癌细胞系增殖凋亡及放射敏感性的影响。方法以qRT-PCR和蛋白印迹法分别检测食管癌细胞系和正常食管上皮细胞GOLPH3 mRNA和蛋白水平,在OE33细胞中转染GOLPH3 siRNA,同时给予照射处理。MTT检测细胞增殖,流式细胞术检... 详细信息

目的研究GOLPH3对食管癌细胞系增殖凋亡及放射敏感性的影响。方法以qRT-PCR和蛋白印迹法分别检测食管癌细胞系和正常食管上皮细胞GOLPH3 mRNA和蛋白水平,在OE33细胞中转染GOLPH3 siRNA,同时给予照射处理。MTT检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,细胞克隆实验检测放射敏感性,蛋白印迹法检测活化的Caspase-3(Cleaved Caspase-3)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、活化的Caspase-9(Cleaved Caspase-9)蛋白水平。结果食管癌细胞中GOLPH3 mRNA和蛋白水平明显高于正常食管上皮细胞(P食管癌OE33细胞中GOLPH3 mRNA和蛋白水平。下调GOLPH3或者照射处理以后的食管癌细胞的增殖活性降低,细胞凋亡率升高,并且细胞中Cleaved Caspase-3、Bax、Cleaved Caspase-9蛋白水平也升高(P细胞经照射处理以后,细胞增殖活性下降更多,细胞凋亡率和细胞中Cleaved Caspase-3、Bax、Cleaved Caspase-9蛋白水平升高更多(P细胞经照射处理后,细胞放射增敏比为1.673。结论GOLPH3在食管癌细胞中高表达,下调其表达可以增加OE33细胞放射敏感性,诱导细胞凋亡并抑制其增殖。

关键词：食管癌细胞系凋亡放射敏感性 GOLPH3基因

电离辐射对食管癌细胞系(ECA109和TE13)r-H2AX表达的影响

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基础医学与临床 2013年第3期33卷 361-362页

作者：史鸿云祝淑钗卢付河王玉祥何丽河北大学附属医院放疗科河北保定071000 河北医科大学第四医院放疗科河北石家庄050017

维持一个完整的基因组对于细胞的稳定性是至关重要的，由电离辐射和类辐射药物产牛的DNA双链损伤是最主要的细胞薄损伤，如果小能修复这种损伤就会导致基因组不稳定和肿瘤的形成或其他年龄相关疾病。体内外的研究都证明H2AX的修饰在调... 详细信息

维持一个完整的基因组对于细胞的稳定性是至关重要的，由电离辐射和类辐射药物产牛的DNA双链损伤是最主要的细胞薄损伤，如果小能修复这种损伤就会导致基因组不稳定和肿瘤的形成或其他年龄相关疾病。体内外的研究都证明H2AX的修饰在调节各种细胞应符DNA双链断裂中起着中心作用。Giunta等的实验为rH2AX作为DNA双链断裂的标志提供了证据。

关键词：食管癌细胞系电离辐射 DNA双链断裂基因组不稳定相关疾病 H2AX 稳定性损伤

CHD1L在食管鳞癌中的表达及临床意义和CHD1L在食管癌细胞系中的表达

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CHD1L在食管鳞癌中的表达及临床意义和CHD1L在食管癌细胞系中的表...

作者：李芳芳郑州大学

学位级别：硕士

背景与目的食管癌是人类最常见的六大恶性肿瘤之一,是中国恶性肿瘤致死率排名第四,世界恶性肿瘤死亡率第四的肿瘤。它的分布表现为明显的区域性特征,在我国主要集中在太行山区一带,发病率由高到低呈同心圆向外分布。其中,河南安阳林州... 详细信息

背景与目的食管癌是人类最常见的六大恶性肿瘤之一,是中国恶性肿瘤致死率排名第四,世界恶性肿瘤死亡率第四的肿瘤。它的分布表现为明显的区域性特征,在我国主要集中在太行山区一带,发病率由高到低呈同心圆向外分布。其中,河南安阳林州市和其毗邻的辉县是我国乃至是世界上发病率最高的两个地区,且以食管鳞状细胞癌为主。由于食管癌的发病率高,预后极差,其病因学研究引起了世界尤其是中国学者的广泛关注。食管癌的发生与其他肿瘤一样,也是一个多基因多步骤的过程。在细胞发生癌变的过程中,细胞周期中的多种调节因子对细胞的癌变具有作用。其中癌基因的激活和抑癌基因的失活是细胞癌变的分子基础。正常情况下,细胞原癌基因在维持细胞信号转导和增殖过程中起着重要作用。当原癌基因被激活转变为癌基因时,通过高表达或表达功能异常的蛋白产物致癌。目前发现与食管癌相关的癌基因主要有：Ras,C-myc, EGFR, c-Jun, MDM2, MTA1, hFRI, c-fos, CyclinD, C-erbB2, int-2等。CHD1L(Chromodomain helicase/ATPase DNA binding protein1-like gene)是香港大学关新元教授用染色体显微切割技术结合比较基因组杂交技术,首次从人体肝癌细胞的染色体1q21区分离并克隆的一个新基因。该基因又被称为ALC1(Amplified in liver cancer1,基因库登记号AF537213),基因全长2980bp,编码89kDa分子蛋白。研究发现CHD1L在肝癌常常呈现高表达,且通过对转染了该基因的细胞相关功能实验及其分子机制的研究,进一步证实了CHD1L可能作为一个新的肝癌候选基因出现。但是,CHD1L基因与食管癌的发生发展关系的相关报道尚未发现。关于CHD1L在肝癌方面的研究表明CHD1L主要通过下调p53及其下游效应基因p21、上调Cdk2以及CyclinE等基因表达,促进DNA合成及G1/S周期转换,从而调控细胞的增殖和凋亡过程,导致肿瘤的发生。本实验研究采用半定量PCR (RT-PCR)和荧光实时定量PCR(q-PCR)在1mRNA水平检测CHD1L在食管鳞状细胞癌的表达情况;采用免疫组化的方法检测CHD1L在食管鳞癌中蛋白水平的表达情况,从而进一步深刻探讨该基因的临床意义。并且通过半定量PCR和荧光实时定量PCR检测该基因在食管癌细胞系中的表达,筛选出表达较低的食管癌细胞系KYSE30和KYSE510,以及显著高表达的食管癌细胞系KYSE180和HKESC1,G418和puromycin分别筛选以上细胞株的最佳药物浓度,为下一步筛选稳定克隆和功能和分子机制研究奠定基础。材料与方法1.选取河南省林州市人民医院2010年7月至2010年10月期间50例食管癌手术标本及其相应的癌旁食管正常粘膜组织(食管正常粘膜组织距离病灶>5cm),以及来源于该院2002年2月至2008年12月期间的289例食管癌石蜡包埋标本。所有手术标本HE切片病理学检测均证实为食管鳞癌。以上所有病例手术前均未经过放疗、化疗和免疫治疗。2.采用半定量PCR及荧光实时定量PCR方法检测50例食管鳞癌组织及其相应的癌旁食管正常粘膜组织中CHD1LmRNA的表达情况。3.采用免疫组织化学法检测289例食管鳞癌组织及其相应的癌旁食管正常粘膜组织中CHD1L蛋白的表达情况。4.采用SPSS16.0统计软件包,统计方法采用独立Student's检验、Chi-square检验,检验水准为α=0.05。Kaplan-Meier分析CHD1L表达与食管癌患者的生存关系。5.采用半定量PCR及荧光实时定量PCR方法检测7株食管癌细胞系中CHD1L的表达,筛选出表达最高的两株细胞株及表达最低的两株细胞株。6.G418筛选表达低的KYSE30及KYSE510两株食管癌细胞系的最佳药物浓度;puromycin筛选表达高的食管癌细胞系KYSE180和HKESC1的最佳药物浓度。结果1.50例食管鳞状细胞癌组织及其相应的癌旁食管正常粘膜组织中,31例食管鳞癌组织CHD1L的表达高于相应的癌旁正常组织62.0%(31/50);5例食管鳞癌组织CHD1L的表达低于相应的癌旁正常组织10%(5/50)。PCR结果显示：CHD1L在mRNA水平的表达在食管鳞癌组织及其相应的癌旁食管正常粘膜组织间的差异具有统计学意义(p食管鳞状细胞癌组织中,102例染色阳性(41.6%),143例染色阴性(58.4%);在245例食管鳞状细胞癌相应的癌旁食管正常粘膜组织中,52例染色阳性(21.2%),193例染色阴性(78

关键词：食管鳞状细胞癌 CHD1L 食管癌细胞系 Nur77 Cdc42

食管癌细胞系中MT-3基因CpG岛甲基化的意义

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实用癌症杂志 2005年第2期20卷 123-125,137页

作者：田子强刘俊峰李勇李保庆王福顺曹富民河北医科大学第四医院胸外科 050011

目的研究食管癌细胞系中MT-3基因CpG岛甲基化与其mRNA表达的关系。方法选取4种食管癌细胞系OE21,OE19,OE33和TE7,经重亚硫酸钠处理后,采用限制性酶切图谱分析(COBRA)和逆转录聚合酶链反应(RTPCR)技术,在DNA甲基转移酶抑制剂5氮2’脱氧胞... 详细信息

目的研究食管癌细胞系中MT-3基因CpG岛甲基化与其mRNA表达的关系。方法选取4种食管癌细胞系OE21,OE19,OE33和TE7,经重亚硫酸钠处理后,采用限制性酶切图谱分析(COBRA)和逆转录聚合酶链反应(RTPCR)技术,在DNA甲基转移酶抑制剂5氮2’脱氧胞苷(5azaCdR)处理前后,对其MT-3基因CpG岛的甲基化情况及mRNA的表达情况进行对比研究。结果4种食管癌细胞系的MT-3基因均存在不同程度的CpG岛超甲基化。经5azaCdR处理后,超甲基化状态解除,mRNA的表达水平也较处理前明显提高(P=0.002)。结论食管癌细胞系中MT-3基因CpG岛的超甲基化可抑制其mRNA表达。当其超甲基化解除后,MT3基因的mRNA表达水平也会相应升高。

关键词：食管癌细胞系 CpG岛甲基化 3基因 mRNA表达逆转录聚合酶链反应 5-aza-CdR 甲基转移酶抑制剂酶切图谱分析甲基化状态亚硫酸钠脱氧胞苷对比研究表达情况不同程度限制性 DNA 解除水平

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塞来昔布抑制食管癌细胞系ECa109增殖

基础医学与临床 2019年第1期39卷 88-89页

作者：蔺茹君李思源肖智伟赵丽颖赵梦瑶赵晓伟李军石河子大学医学院第一附属医院内分泌代谢科石河子大学医学院新疆军区69296部队

食管癌是我国最常见的恶性肿瘤,其发生和发展过程极为复杂,其机制仍不明确。目前COX-2与MMP-14在乳腺癌等发病中有少量研究,但对食管癌发病的影响尚未见报道。本研究在食管癌发病中,COX-2与MMP-14的可能作用机制,旨在为食管癌靶向药物... 详细信息

食管癌是我国最常见的恶性肿瘤,其发生和发展过程极为复杂,其机制仍不明确。目前COX-2与MMP-14在乳腺癌等发病中有少量研究,但对食管癌发病的影响尚未见报道。本研究在食管癌发病中,COX-2与MMP-14的可能作用机制,旨在为食管癌靶向药物的应用提供新依据。

关键词：食管癌细胞系 ECa109 塞来昔布 MMP-14 COX-2 增殖恶性肿瘤靶向药物

番茄红素干预食管癌细胞系(Eca9706)及表皮生长因子表达的研究

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安徽医药 2005年第1期9卷 19-20页

作者：陈晓张亚楼张月明牙生买买提阿孜古丽温浩新疆医科大学病理学教研室新疆乌鲁木齐820054 新疆包虫病研究所新疆医科大学营养学教研室新疆乌鲁木齐820054 新疆医科大学外科教研室新疆乌鲁木齐820054

目的　研究番茄红体外对食管癌细胞素 (Eca970 6 )的作用及可能机制。方法　番茄红素 10 -3 、10 -4、10 -5、10 -6、10 -7mol·L-15个浓度组干预食管细胞 2 4h ,观察细胞存活量及蛋白含量 ,并用免疫组织化学的方法观察干预前后表皮生... 详细信息

目的　研究番茄红体外对食管癌细胞素 (Eca970 6 )的作用及可能机制。方法　番茄红素 10 -3 、10 -4、10 -5、10 -6、10 -7mol·L-15个浓度组干预食管细胞 2 4h ,观察细胞存活量及蛋白含量 ,并用免疫组织化学的方法观察干预前后表皮生长因子 (EGFR)的表达情况。结果　番茄红素 10 -3 mol·L-1时 ,促进肿瘤细胞生长 ,10 -4、10 -5、10 -6mol·L-1有抑制肿瘤细胞生长作用 ,而且10 -4mol·L-1效果最好 ,10 -7mol·L-1对抑制瘤生长效果不明显 ,仅有轻度抑制作用 (P >0 0 5 )。而蛋白含量仅有 10 -6和 10 -7mol·L-1有轻度抑制作用但无统计学意义 (P >0 0 5 )。免疫组织化学结果显示 ,干预前有PGFR表达 ,干预后未见表达。结论　番茄红素对食管癌细胞系 (ECA970 6 )有抑制生长作用 ,呈剂量反应关系 ,此作用与抑制EGFR蛋白表达有关。

关键词：干预表达食管癌细胞系表皮生长因子轻度 EGFR 番茄红素生长效果蛋白含量浓度

2-甲氧雌二醇对食管癌细胞系的数目、形态、细胞周期以及诱导凋亡方面的作用

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天津医药 2010年第5期38卷 414-414页

作者：杨佳佳杨卓

2-甲氧雌二醇（2-ME）是体内雌二醇的正常代谢产物之一，大量研究表明2-ME在各种肿瘤和非肿瘤细胞中能够抑制细胞增殖并诱导凋亡，是一种细胞分裂拮抗剂和微管蛋白毒素。因此，这种内源性的雌二醇代谢物有可能是一种潜在的抗癌药物。由... 详细信息

2-甲氧雌二醇（2-ME）是体内雌二醇的正常代谢产物之一，大量研究表明2-ME在各种肿瘤和非肿瘤细胞中能够抑制细胞增殖并诱导凋亡，是一种细胞分裂拮抗剂和微管蛋白毒素。因此，这种内源性的雌二醇代谢物有可能是一种潜在的抗癌药物。由于2-ME的作用机制是多方面的，并且随细胞种类的不同而不同，因此本研究的目的是通过检测2-ME对细胞数目、形态、细胞周期以及凋亡诱导等方面的影响来探讨它对食管癌细胞系（WHC03）的作用机制。

关键词： 2-甲氧雌二醇食管癌细胞系诱导凋亡细胞周期细胞数目形态抑制细胞增殖 2-ME

氧化砷诱导食管癌细胞系细胞凋亡的光镜和电镜研究

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汕头大学医学院学报 1998年第S1期 23-23页

作者：沈忠英谭立军蔡维佳沈健陈彩云汤雪明上海第二医科大学汕头大学医学院肿瘤病理研究室

建立十二色荧光原位杂交技术鉴定食管癌KYSE450细胞系的核型

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世界华人消化杂志 2006年第8期14卷 747-751页

作者：吴玉鹏杨壹羚韩亚玲徐昕蔡岩杨光之王学英詹启敏吴旻王明荣沈阳农业大学生物科技学院辽宁省沈阳市110161 中国医学科学院中国协和医科大学肿瘤医院肿瘤研究所分子肿瘤学国家重点实验室北京100021

目的:应用12色荧光原位杂交技术(multicolor fluorescence in situ hybridization,M-FISH)鉴定食管癌细胞系KYSE450的染色体畸变．方法:采用DOP-PCR(degenerate oligonucleotide primer-polymerase chain reaction)法混合标记两组多色painting探针,先后两次杂交到相同的KYSE450染色体片,结合反相DAPI显带技术进行核型分析．结果:成功地建立了一种重复的12色荧光原位杂交技术,并鉴定出KYSE450中存在的畸变染色体．该细胞系共有54条染色体,只有13, 21和X号染色体是正常的,其余21条染色体均表现异常．1,2,3,5,6,8,9,14,15,16和17号染色体部分区带增益,4和18号染色体部分区带缺失．7,11,12和19号染色体同时存在区带增益和其它部分区带缺失．1,2,3,4,5,6,7,8,9, 11,12,14,15,16,17,18和19号染色体显示有易位．22号染色体丢失1条,未检测到10,20,Y 染色体成分．结论:12色荧光原位杂交可用于鉴定肿瘤中复杂的染色体异常．KYSE450存在较多与原发性食管鳞癌一致的染色体改变．

关键词：多色荧光原位杂交食管癌细胞系核型食管癌