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鞘氨醇菌属与环境致癌物对肺上皮细胞MUC16表达的影响与机制探讨

鞘氨醇菌属与环境致癌物对肺上皮细胞MUC16表达的影响与机制探讨

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作者：宁明杰昆明医科大学

学位级别：硕士

【目的】探讨肺部微环境中:鞘氨醇菌与环境致癌物对肺癌及正常肺上皮细胞MUC16与LINC00842基因表达的影响及规律。【方法】1.在Cosmic、NCI-GDC、Starbase、Cbioportal等数据库中,对84例肺癌样本中LINC00842和MUC16生物信息关联分析;LIN... 详细信息

【目的】探讨肺部微环境中:鞘氨醇菌与环境致癌物对肺癌及正常肺上皮细胞MUC16与LINC00842基因表达的影响及规律。【方法】1.在Cosmic、NCI-GDC、Starbase、Cbioportal等数据库中,对84例肺癌样本中LINC00842和MUC16生物信息关联分析;LINC00842和MUC16肺癌组织q-PCR验证分析及亚群特征分析。2.建立肺上皮细胞-鞘氨醇菌-环境致癌物共培养体系:肺腺癌细胞系H1734和正常肺支气管上皮细胞BEAS-2B,分别接种多噬香鞘氨醇菌、土地鞘氨醇盒菌后培养24h、48h、72h、96h;选出72h为最佳培养时间,分别加入二甲苯、甲醛、苯并[a]芘、蒽、溴乙锭、香烟滤嘴萃取物、Ni SO等环境致癌物;用q RT-PCR检测共培养体系中肺上皮细胞目标基因MUC16、LINC00842,以及其他肺癌高频突变基因EGFR、KRAS、TP53、TERT、MMP9的表达。【结果】1.生物信息关联分析及肺癌组织q-PCR验证分析1.1生物信息关联分析MUC16在Cosmic数据库中肺癌患者的癌组织中突变率排第八,在NCI-GDC数据库中男性肺癌中位于第二,女性肺癌中排位第三,且与LINC00842呈现正相关趋势。1.2肺癌组织q-PCR验证分析LINC00842和MUC16在肺癌组织中均高表达,且二者在癌及癌旁中都呈正相关趋势。MUC16更倾向于在肺腺癌、女性和年轻患者组过表达;LINC00842则在较为广泛的肺癌患者中均过表达,在男性、III-IV期患者和高龄患者中表达更高。2.细胞-鞘氨醇菌-环境致癌物共培养模型中细胞关键基因表达的变化2.1肺腺癌细胞-鞘氨醇菌-环境致癌物共培养体系肺腺癌细胞H1734基因整体波动明显,MUC16和LINC00842表达上升明显;在甲醛、Bap、蒽、EB、香烟组,鞘氨醇菌单独或合作均可表现出回降细胞癌基因EGFR、KRAS、TERT、MMP9、MUC16的能力,微生态效应主要表现为“偏低则回升、偏高则回降”的平衡式调节。2.2正常肺上皮细胞-鞘氨醇菌-环境致癌物共培养体系BEAS-2B细胞基因整体波动都不大,MUC16和LINC00842呈缓慢上升趋势;在环境致癌物(甲醛、Bap、蒽、EB、香烟)暴露下,BEAS-2B细胞的癌基因EGFR、KRAS、TERT、MMP9、TP53等基因上调不明显。【结论】1.LINC00842和MUC16在肺癌组织中高表达;在肺癌和癌旁组织中MUC16和LINC00842均呈明显正相关趋势,LINC00842可能参与调控MUC16表达。2.在与鞘氨醇菌、环境致癌物共培养环境中,正常肺上皮细胞BEAS-2B较肺腺癌细胞H1734有较好的稳定性和耐受性;鞘氨醇菌对肺上皮细胞有一定保护作用,可能通过上调LINC00842与MUC16表达发挥作用。

关键词：肺部微生态鞘氨醇菌环境致癌物 MUC16 LINC00842

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