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CAMK1及SPHK1在胰腺癌组织中的表达及与临床病理特征和预后的关系

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中华胰腺病杂志 2022年第5期22卷 377-380页

作者：李梅桂黄国定刘海剑曾业平陈其珠海南西部中心医院肿瘤内科儋州571799

回顾性分析105例行手术切除且经病理确诊的胰腺癌患者的临床资料,探讨胰腺癌组织CAMK1、SPHK1的表达与临床病理特征及预后的关系。结果显示,胰腺癌组织CAMK1、SPHK1均呈高表达,其高表达组的临床分期,远处转移及脉管浸润与低表达组比较,... 详细信息

回顾性分析105例行手术切除且经病理确诊的胰腺癌患者的临床资料,探讨胰腺癌组织CAMK1、SPHK1的表达与临床病理特征及预后的关系。结果显示,胰腺癌组织CAMK1、SPHK1均呈高表达,其高表达组的临床分期,远处转移及脉管浸润与低表达组比较,差异均有统计学意义,且高表达与患者的总生存期短有关,是影响胰腺癌患者预后的生物学指标。

关键词：胰腺癌钙/钙调素依赖性蛋白激酶1 鞘氨醇激酶1 预后

1-磷酸鞘氨醇代谢与急性缺血性脑血管病的研究进展

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中风与神经疾病杂志 2021年第3期38卷 274-276页

作者：刘璞(综述) 高飞(审校) 西安医学院第一附属医院陕西西安710000

脑卒中(Stroke)是全球第二大死亡原因和第三大致残原因[1],严重危害人类生命健康和生活质量。其中,急性缺血性脑卒中(Acute ischemic stroke,AIS)亦称急性脑梗死(Acute cerebral infarction,ACI),是最常见的卒中类型,占我国脑卒中的69.6... 详细信息

脑卒中(Stroke)是全球第二大死亡原因和第三大致残原因[1],严重危害人类生命健康和生活质量。其中,急性缺血性脑卒中(Acute ischemic stroke,AIS)亦称急性脑梗死(Acute cerebral infarction,ACI),是最常见的卒中类型,占我国脑卒中的69.6%~70.8%[2]。AIS是指局部脑组织由于急性血液循环障碍,出现缺血、缺氧、坏死,引发局灶性或弥漫性神经功能缺损的疾病,其脑组织损伤的病理生理学过程较为复杂,包括能量衰竭、兴奋性毒性、氧化应激和神经炎症等一系列细胞和分子事件,而神经炎症的特征又包括中枢神经系统免疫细胞的浸润、神经胶质细胞(如小胶质细胞和星形胶质细胞)的激活以及多种神经毒性分子(包括促炎细胞因子)的产生,所有这些都会进一步引起中枢神经系统内皮功能障碍、血脑屏障破坏、神经细胞凋亡,从而造成神经功能缺损[3]。

关键词： 1-磷酸鞘氨醇鞘氨醇激酶1 鞘氨醇激酶2 缺血再灌注损伤

SPK1通过调节Bcl-2/Bax途径干扰LLC细胞凋亡

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中国病理生理杂志 2019年第5期35卷 950-954,960页

作者：吕冰洁赵洁郝东王晓芝王涛李洪波杨阳滨州医学院附属医院呼吸与重症医学科山东滨州256603 滨州医学院附属医院老年医学科山东滨州256603

目的:研究鞘氨醇激酶1(SPK1)是否通过调节Bcl-2/Bax途径干扰小鼠Lewis肺癌(LLC)细胞的凋亡。方法:通过构建SPK1基因小干扰RNA(siRNA)真核表达载体,将siRNA转染至LLC细胞,在荧光显微镜下观察LLC细胞转染的情况。采用流式细胞术检测转染后... 详细信息

目的:研究鞘氨醇激酶1(SPK1)是否通过调节Bcl-2/Bax途径干扰小鼠Lewis肺癌(LLC)细胞的凋亡。方法:通过构建SPK1基因小干扰RNA(siRNA)真核表达载体,将siRNA转染至LLC细胞,在荧光显微镜下观察LLC细胞转染的情况。采用流式细胞术检测转染后LLC细胞的凋亡率,Western blot法检测转染后LLC细胞中SPK1、Bcl-2和Bax蛋白表达水平,ELISA法检测Bax和Bcl-2的蛋白表达。结果:转染后的LLC细胞在荧光显微镜下发出绿色荧光。siRNA-SPK1组细胞凋亡明显高于siRNA-SPK1-Neg组(P1)。Western blot结果显示, siRNA-SPK1组中Bax蛋白表达明显较siRNA-SPK1-Neg组高,Bcl-2蛋白表达较siRNA-SPK1-Neg组低。ELISA结果显示siRNA-SPK1组中Bax表达水平显著高于siRNA-SPK1-Neg组(P1), siRNA-SPK1组中Bcl-2表达水平显著低于siRNA-SPK1-Neg组(P1)。结论:SPK1在LLC细胞中的表达与细胞凋亡率有关。SPK1可能是通过Bcl-2/Bax途径干扰LLC细胞凋亡。

关键词：鞘氨醇激酶1 Bcl-2/Bax通路非小细胞肺癌细胞凋亡

SPHK1在甲状腺乳头状癌中的表达及其对IHH4细胞侵袭和迁移的影响

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江苏医药 2022年第1期48卷 1-5页

作者：钱晨宏蒋烈浩许世莹胡逸群王佳峰谭卓刘雪峰葛明华蚌埠医学院研究生院安徽233030 浙江省人民医院头颈外科浙江中医药大学第二临床医学院牡丹江市肿瘤医院头颈乳腺三科

目的探讨鞘氨醇激酶1(SPHK1)在甲状腺乳头状癌(PTC)中的表达及对IHH4细胞侵袭和迁移的影响。方法采用免疫组化检测110例PTC组织及癌旁组织中SPHK1的表达,分析SPHK1表达与其临床指标的关系。采用小干扰RNA-SPHK1转染PTC细胞系IHH4,Transw... 详细信息

目的探讨鞘氨醇激酶1(SPHK1)在甲状腺乳头状癌(PTC)中的表达及对IHH4细胞侵袭和迁移的影响。方法采用免疫组化检测110例PTC组织及癌旁组织中SPHK1的表达,分析SPHK1表达与其临床指标的关系。采用小干扰RNA-SPHK1转染PTC细胞系IHH4,Transwell实验和细胞划痕实验分析其对IHH4细胞侵袭及迁移的影响。采用Western blot法检测MMP-2和MMP-9蛋白表达情况。结果 SPHK1在PTC组织中的阳性表达率高于癌旁组织[47.27%(52/110)vs.11.82%(13/110)](P1表达与包膜侵犯和淋巴结转移密切相关(P1)。干扰SPHK1后,侵袭和迁移细胞数目减少(P1在PTC组织中高表达,与IHH4细胞的侵袭和迁移密切相关,可能是通过MMPs信号通路发挥作用。

关键词：甲状腺乳头状癌鞘氨醇激酶1 侵袭迁移

SphK1和FAK对人结肠癌HCT116细胞上皮间质转化的影响

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中国病理生理杂志 2016年第3期32卷 439-444页

作者：诸葛春凤刘诗权谭林覃蒙斌梁梦紫黄杰安广西医科大学第一附属医院消化内科广西南宁530021

目的:研究鞘氨醇激酶1(sphingosine kinase l,Sph K1)和黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)对人结肠癌HCT116细胞上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响。方法:将人结肠癌HCT116细胞分成3组:采用Sph K1抑制剂N,N-二甲基鞘胺醇(N,N-dimethylsphingosine,DMS)、FAK抑制剂PF573228和相同体积的培养基分别处理细胞。MTT法检测细胞活力,Western blot方法检测Sph K1、FAK、E-cadherin、N-cadherin、vimentin和基质金属蛋白酶2(MMP2)蛋白的表达,real-time PCR检测Sph K1、鞘氨醇1-磷酸(S1P)、FAK、E-cadherin和vimentin mRNA的表达,并应用细胞划痕实验检测肿瘤细胞的迁移能力。结果:PF573228和DMS均明显抑制人结肠癌HCT116细胞的活力,并呈时间剂量依赖性。DMS抑制Sph K1的表达,同时下调FAK、N-cadherin、vimentin和MMP2蛋白的表达,而上调E-cadherin蛋白表达上调。PF573228明显抑制FAK的表达,同时抑制Sph K1、N-cadherin、vimentin和MMP2的表达,上调E-cadherin蛋白的表达(P<0.01)。划痕实验显示PF573228和DMS显著抑制HCT116细胞的迁移能力(P<0.01)。与对照组比较,PF573228组和DMS组FAK、Sph K1、S1P以及vimentin mRNA的表达明显下调,而E-cadherin mRNA的表达则明显上调(P<0.05)。结论:Sph K1和FAK信号通路可能在结肠癌HTC116细胞上皮间质转化过程中发挥重要作用。

关键词：鞘氨醇激酶1 黏着斑激酶上皮间质转化人结肠癌细胞

SPHK1在舌鳞癌中的表达及其表达下调对Tca8113细胞迁移能力的影响

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实用口腔医学杂志 2012年第6期28卷 735-739页

作者：岳增文曹选平王树斌张克郑州大学第四附属医院 450052

目的:研究鞘氨醇激酶1(SPHK1)在舌鳞癌组织中的表达及其表达下调对Tca8113细胞迁移的影响。方法:采用免疫组织化学检测45例舌鳞癌组织、36例癌旁异常增生组织和45例正常舌上皮组织中SPHK1蛋白的表达。利用脂质体2000将SPHK1 siRNA和对照... 详细信息

目的:研究鞘氨醇激酶1(SPHK1)在舌鳞癌组织中的表达及其表达下调对Tca8113细胞迁移的影响。方法:采用免疫组织化学检测45例舌鳞癌组织、36例癌旁异常增生组织和45例正常舌上皮组织中SPHK1蛋白的表达。利用脂质体2000将SPHK1 siRNA和对照siRNA分别转染Tca8113细胞,Western blotting检测细胞中SPHK1蛋白的表达;分别采用CCK-8和Boyden小室检测细胞增殖和细胞迁移能力的变化;用Western blotting检测细胞迁移相关蛋白MMP-2和MMP-9表达的变化。结果:舌鳞癌组织中SPHK1蛋白的表达显著高于癌旁异常增生组织和正常舌上皮组织(χ2=55.608,P=0.000)。SPHK1 siR-NA能显著下调Tca8113细胞中SPHK1蛋白的表达,其表达下调能明显抑制舌鳞癌细胞的增殖和降低细胞的迁移能力。SPHK1表达的下调能明显降低舌鳞癌细胞中MMP-2和MMP-9蛋白的表达。结论:SPHK1的过表达可能在舌鳞癌的发生发展过程中发挥重要作用,其表达下调介导的舌鳞癌细胞迁移能力的降低可能与MMP-2和MMP-9的下调密切相关。

关键词：舌鳞状细胞癌鞘氨醇激酶1 小干扰RNA 细胞增殖细胞迁移

RNA干扰下调SPHK1基因表达抑制胃癌细胞增殖

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中山大学学报（医学科学版） 2013年第3期34卷 321-325页

作者：张娈景夏金堂张珑涓简卫华赖越元陈连周黄晓卉李雯中山大学附属第一医院普通外科实验室广东广州510080 广州医学院附属广州市第一人民医院肝胆外科广东广州510180

【目的】应用RNA干扰方法下调鞘氨醇激酶1(SPHK1)基因表达,研究SPHK1对胃癌细胞SGC-7901、MGC-803细胞增殖的影响及其可能的作用机制。【方法】免疫组织化学法检测5对胃癌及癌旁组织的SPHK1蛋白表达量;构建质粒、制备逆转录病毒并感染... 详细信息

【目的】应用RNA干扰方法下调鞘氨醇激酶1(SPHK1)基因表达,研究SPHK1对胃癌细胞SGC-7901、MGC-803细胞增殖的影响及其可能的作用机制。【方法】免疫组织化学法检测5对胃癌及癌旁组织的SPHK1蛋白表达量;构建质粒、制备逆转录病毒并感染胃癌细胞株SGC-7901、MGC-803,筛选并鉴定SPHK1-RNAi和对照载体(RNAi-Vector)稳定表达细胞株;MTT法检测胃癌细胞的增殖变化;Western blot法检测SPHK1、p21、p27、Akt、p-Akt、Rb、p-Rb蛋白的表达水平。【结果】SPHK1蛋白在胃癌组织中过表达;与对照组比较,两株SPHK1-RNAi稳定表达的胃癌细胞SGC-7901、MGC-803中SPHK1表达显著下调,抑制率分别为81.2%、65.1%;SPHK1-RNAi胃癌细胞增殖能力较对照组显著减弱;SPHK1-RNAi胃癌细胞的磷酸化Akt及磷酸化Rb蛋白表达明显降低,而p21、p27的蛋白表达水平明显上调。【结论】下调SPHK1基因表达能抑制胃癌细胞的增殖,其机制可能与细胞内Akt信号被减弱,细胞周期抑制蛋白p21、p27的表达上调有关。

关键词：鞘氨醇激酶1 胃癌细胞细胞增殖 Akt

Sphk1抑制剂PF543对宫颈癌SiHa细胞凋亡和增殖的影响及其机制

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武汉大学学报（医学版） 2021年第6期42卷 918-923页

作者：吴旺陈红牟芬徐雅馨刘梦薇武汉大学中南医院妇产科湖北武汉430071

目的:研究鞘氨醇激酶1(Sphk1)抑制剂PF543对宫颈癌SiHa细胞凋亡和增殖的影响。方法:体外培养SiHa细胞,并分为SiHa、SiHa+20μmol/L PF543和SiHa+40μmol/L PF543三组,分别采用流式细胞实验检测细胞凋亡和细胞周期情况,CCK-8实验和Edu实... 详细信息

目的:研究鞘氨醇激酶1(Sphk1)抑制剂PF543对宫颈癌SiHa细胞凋亡和增殖的影响。方法:体外培养SiHa细胞,并分为SiHa、SiHa+20μmol/L PF543和SiHa+40μmol/L PF543三组,分别采用流式细胞实验检测细胞凋亡和细胞周期情况,CCK-8实验和Edu实验检测细胞增殖能力,RT-PCR和Western Blot实验检测各组Sphk1、Caspase3、Bax、Bcl-2、Ki67和Cyclin D1的表达情况。结果:与SiHa组相比,20和40μmol/L PF543组均可增加Bax和cleaved-Caspase3表达,抑制Sphk1、Bcl-2、Cyclin D1和Ki67的表达,具有剂量依赖性(P1期细胞占比逐渐增加,S期占比逐渐减少(P1后促进SiHa细胞凋亡、阻滞细胞于G1期和抑制细胞增殖。这可能与增加促凋亡基因cleaved-Caspase3和Bax表达,抑制抗凋亡基因Bcl-2和促增殖基因Ki67、Cyclin D1表达有关。

关键词：宫颈癌鞘氨醇激酶1 PF543 增殖凋亡

SPK1基因转染的UCMSC移植对EAE小鼠的治疗作用

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郑州大学学报（医学版） 2017年第2期52卷 117-122页

作者：许春阳薛鹏花琳琳李金凤刘新珊张达矜徐志秀王姗姗尹红蕾张辉张玉镇王运良段海峰郑州大学第二附属医院神经内科郑州450014 中国人民解放军第148医院神经内科山东淄博255300 首都医科大学三博脑科医院神经内科北京100093 海军总医院海战伤研究所北京100037 军事医学科学院放射与辐射医学研究所北京100850

目的:观察鞘氨醇激酶1(SPK1)基因转染的脐带间充质干细胞(UCMSC)移植对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠的疗效。方法:将C57BL/6小鼠分为对照组(12只)、EAE组、UCMSC组和UCMSC-SPK1组;后3组进行免疫诱导以制备EAE模型,每组11只。以第... 详细信息

目的:观察鞘氨醇激酶1(SPK1)基因转染的脐带间充质干细胞(UCMSC)移植对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠的疗效。方法:将C57BL/6小鼠分为对照组(12只)、EAE组、UCMSC组和UCMSC-SPK1组;后3组进行免疫诱导以制备EAE模型,每组11只。以第一次注射抗原当日为第0天,UCMSC组和UCMSC-SPK1组小鼠分别在免疫后第14、21、28天通过尾静脉注射UCMSC和UCMSC-SPK1,对照组和EAE组注射同等体积的生理盐水。每日采用双盲法进行小鼠神经功能缺损评分;第33天,ELISA法检测外周血IFN-γ、TNF-α、IL-17和L-4水平,分别采用HE和Fast-blue(LFB)染色观察并进行脊髓炎性细胞浸润评分、脱髓鞘评分,免疫组化法检测脊髓GFAP和MBP的表达,流式细胞术检测脾脏中调节性T细胞和NK细胞比例。结果:与EAE组比较,UCMSC-SPK1组和UCMSC组小鼠神经功能缺损评分、脊髓炎性细胞浸润评分和脱髓鞘评分降低,脾脏调节性T细胞比例升高、NK细胞比例降低;UCMSC-SPK1组变化更为显著(P<0.05);UCMSC-SPK1组脊髓GFAP表达较EAE组下降,MBP表达增强(P<0.05),外周血IFN-γ、TNF-α、IL-17水平降低,IL-4水平升高(P<0.05)。结论:UCMSC-SPK1移植能较UCMSC更为显著地修复EAE小鼠神经功能损伤。

关键词：多发性硬化脐带间充质干细胞鞘氨醇激酶1 实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠