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荧光磁性纳米粒子标记的小鼠胚胎干细胞靶向识别体内胃癌细胞

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科学通报 2013年第7期58卷 593-600页

作者：阮静宋华李超陈俊崔大祥上海交通大学微纳科学技术研究院纳米生物工程研究室上海200240

胃癌的早期诊断和治疗是提高胃癌患者预后的关键,纳米技术和干细胞是继手术、化疗和放疗之外新兴的肿瘤治疗新技术.制备了氨基化修饰的荧光磁性纳米粒子(FMNPs),无滋养层培养了小鼠胚胎干细胞(mESCs),体外实验评价了mESCs的条件培养基... 详细信息

胃癌的早期诊断和治疗是提高胃癌患者预后的关键,纳米技术和干细胞是继手术、化疗和放疗之外新兴的肿瘤治疗新技术.制备了氨基化修饰的荧光磁性纳米粒子(FMNPs),无滋养层培养了小鼠胚胎干细胞(mESCs),体外实验评价了mESCs的条件培养基对胃癌细胞的影响,并利用FMNPs标记mESCs制备了干细胞纳米探针(FMNPs-mESCs),通过尾静脉注射进入荷瘤小鼠的体内,利用小动物活体成像系统考察了FMNPs-mESCs靶向识别体内胃癌细胞的能力.结果显示,制备的FMNPs具有良好的荧光性能和磁响应性能,在50μg/mL的浓度范围内对mESCs具有良好的生物活性,mESCs的条件培养基对胃癌细胞具有显著的抑制增殖的作用,FMNPs标记的mESCs具有良好的荧光性能,在注射进入荷瘤小鼠体内6h后可以通过活体成像结果和离体器官的荧光成像结果观察到肿瘤组织有显著的荧光信号.研究表明,FMNPs-mESCs具有特异靶向识别体内胃癌细胞的能力,为利用胚胎干细胞治疗胃癌提出新的研究方向.

关键词：荧光磁性纳米粒子小鼠胚胎干细胞靶向识别胃癌荧光成像

基于靶向识别多目标物核酸探针的电化学多元分析方法研究

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基于靶向识别多目标物核酸探针的电化学多元分析方法研究

作者：沈志鹏宁波大学

学位级别：硕士

本文基于靶向识别多目标物核酸探针的电化学多元分析方法构建了一系列新型电化学传感器,并将其用于多元分析检测各类目标物。包括:抗生素(卡那霉素和氨苄西林)、微小RNA(micro RNA-21和micro RNA-155)、食源性致病菌(副溶血弧菌、鼠伤... 详细信息

本文基于靶向识别多目标物核酸探针的电化学多元分析方法构建了一系列新型电化学传感器,并将其用于多元分析检测各类目标物。包括:抗生素(卡那霉素和氨苄西林)、微小RNA(micro RNA-21和micro RNA-155)、食源性致病菌(副溶血弧菌、鼠伤寒沙门氏菌)等。卡那霉素和氨苄西林检测方法的构建是基于金属编码的脱铁铁蛋白探针和双搅拌棒辅助的靶标循环用于信号放大的策略,以实现电化学灵敏分析。micro RNA-21和micro RNA-155的同时检测方法的构建是基于使用搅拌棒辅助磁性DNA纳米球编码的探针的使用,以实现高度灵敏地同时检测血清中的micro RNA。副溶血弧菌、鼠伤寒沙门氏菌的同时检测方法的构建是基于磁性功能化支链DNA杂交自组装和双搅拌电极DNA walker策略。相对于单检测来说,我们构建的多目标物同时检测策略,提高了检测灵敏度和准确度,同时提高分析检测效率,减小假阳性信号出现的概率,因此具有更加广泛的应用前景。基于此,本课题构建了一系列基于靶向识别多目标物核酸探针用于电化学多元分析方法研究。为了检测方法的灵敏度得到进一步提高,我们相应地引入了一系列的信号放大技术。该方法满足了电学多元分析检测中,高特异性、高灵敏度的同时检测,同时为多元分析检测提供了新的思路。本研究主要从以下三个方面展开:1.构建基于金属编码的脱铁铁蛋白探针和双搅拌棒辅助的靶标循环用于信号放大的多路复用电化学适体传感器本章工作主要通过使用金属离子编码的载铁蛋白探针和双搅拌棒辅助的靶标回收利用信号放大技术,设计了以卡那霉素(KANA)和氨苄青霉素(AMP)为代表分析物的用于多重抗生素检测的多重电化学适体传感器。通过载铁蛋白加载Cd和Pb离子并分别标记双链DNA(对应于具有互补DNA序列的KANA和AMP杂交体的适体)来制备编码的探针。在存在KANA和AMP的情况下,靶标可以与条形探针反复发生反应,然后将许多Apo-Mencoded信号标签替换为上清液。通过单次方波伏安法检测了来自标签的Cd和Pb的峰值电流,对应于KANA和AMP的浓度。结果,可以同时检测到0.05 p M至50 n M范围内的KANA和AMP,检测限分别为18 f M KANA和15 f M AMP(S/N=3)。检验该方法以检测样品中的KANA和AMP残基具有一致的ELISA结果,例如牛奶和鱼肉。由于Apo-M编码的探针具有高信号物质的负载能力,因此该测定具有高度灵敏性,选择性,成本效益和易于操作的特点。此外,还制作了无酶,可克服基质干扰的双搅拌棒辅助靶回收技术,用于信号放大。因此,该检测方法显示出潜在的优势,可以灵敏地筛查食品中的残留抗生素。2.使用搅拌棒辅助磁性DNA纳米球编码的探针高度灵敏地同时检测血清中的micro RNA本章工作通过合成了三3D磁性DNA纳米球,并将其固定在金搅拌棒上,作为mi RNA捕获和信号放大的编码探针。电化学标签标记的DNA通过超支化杂交链反应(HHCR)固定在镀金的磁性纳米球上。随后,将磁性DNA纳米球固定在金搅拌棒上,作为编码探针。通过替换磁性DNA纳米球编码的探针,将靶标mi RNA捕获在搅拌棒的表面,并且对探针进行了磁性富集,以实现高灵敏度和选择性的电化学检测。金搅拌棒辅助的3D磁性DNA纳米球编码探针具有双重功能:作为纳米载体,可增加HHCR产物的负载量,它们也是通过磁富集有效电化学信号放大的平台。该方法已成功应用于5f M至2 n M的宽线性范围内的mi RNA21和mi RNA155的检测,检测限分别为1.5 f M和1.8 f M。该方法的初步应用表明,它在检测血清样品中的mi RNA方面具有巨大的潜力。3.基于磁性功能化支链DNA杂交自组装和双搅拌棒策略用于细菌的电化学同时检测本章工作建立了一种基于磁性功能化支链DNA杂化自组装和双搅拌棒策略的分析方法,用于同时电化学检测和区分弧菌,沙门氏菌和副溶血弧菌。在这项工作中,我们合成了三维磁性DNA纳米球,并将其固定在金片上,作为弧菌捕获和信号放大的编码探针。电化学标记的DNA通过功能化支链杂交自组装(FBCHS)固定在镀金的磁性纳米球上。然后,将磁性DNA纳米球固定在金板上作为编码探针。弧菌结合并从金片A表面的四面体释放磁性DNA纳米信号探针,然后在修饰的Exo-I酶的作用下,在金片B表面释放目标弧菌,以进行下一个循环反应。经过一段时间的反应后,探针的磁性能变强,从而获得更高的灵敏度和选择性的电化学检测。DAN四面体结构的捕获探针具有较好的空间取向性,能提高目标物的捕获效率。金片上的Exo-I酶可循环使用和棒上酶的高密度富集提高了酶的利用效率。将信号标签通过磁性富集到电极上,磁性分离富集信号分子,可去除背景干扰。新型的基于DNA Walker的目标物循环信号放大体系,可实现相分

关键词：电化学多元分析核酸探针多目标物靶向识别

功能化外泌体重编程免疫细胞与肿瘤细胞之间的靶向识别作用

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功能化外泌体重编程免疫细胞与肿瘤细胞之间的靶向识别作用

作者：项建华东理工大学

学位级别：硕士

外泌体是几乎所有细胞都会分泌、直径约为30～150 nm,具有脂质双分子层结构的盘状囊泡,广泛分布于各种体液中,作为细胞间物质运输和信息通讯的重要媒介,直接影响了细胞的各种生理状态,并参与了多种疾病的发生发展。作为一种非侵入、具... 详细信息

外泌体是几乎所有细胞都会分泌、直径约为30～150 nm,具有脂质双分子层结构的盘状囊泡,广泛分布于各种体液中,作为细胞间物质运输和信息通讯的重要媒介,直接影响了细胞的各种生理状态,并参与了多种疾病的发生发展。作为一种非侵入、具有细胞特异性的治疗性纳米载体,外泌体能有效地将货物输送到靶细胞,减少对正常细胞的伤害,增强治疗效果。本论文利用基因工程技术和外源性外泌体分离后修饰技术对天然外泌体进行定制化改造,制备具有特定生物功能的外泌体,并应用于重编程肿瘤细胞与免疫细胞的靶向识别,增强免疫细胞识别肿瘤细胞的能力。针对免疫原性低和癌细胞脱靶等问题,通过内源性改造获得膜表面表达水泡性口炎病毒糖蛋白(VSVG)的融合外泌体,利用膜表面修饰技术得到重编程修饰肿瘤细胞的功能化外泌体,并对其生物功能进行验证,探究了其增强免疫识别方面的应用潜力。主要研究内容如下:1.融合外泌体的构建及膜融合效应。外泌体自身生物特性受其亲本细胞的影响,并对其靶细胞具有特定的特征和作用。在本项工作中,通过基因工程修饰技术对亲本细胞进行改造,使其表达具有特定生物功能的病毒性融合蛋白,并分泌获得膜表面负载VSVG的融合性外泌体(VSVG-Exos)。以小鼠乳腺癌细胞为研究对象,通过一系列实验探究了 VSVG-Exos与小鼠乳腺癌细胞的膜融合效应,证明VSVG蛋白能在酸性条件下调控VSVG-Exos与小鼠乳腺癌细胞的相互作用,促进VSVG-Exos与肿瘤细胞膜融合。2.功能化外泌体重编程肿瘤细胞与免疫细胞之间靶向识别。肿瘤细胞与免疫细胞之间的相互作用是癌症免疫治疗成功的关键,增强肿瘤细胞与免疫细胞的相互识别对有效清除肿瘤细胞,抑制癌症发展具有重要作用。本项工作以小鼠乳腺癌细胞和小鼠树突状细胞为研究对象。利用细胞瞬时转染手段和膜表面修饰技术对天然外泌体进行定制改造,获得膜表面展示VSVG和DC-SIGN核酸适配体的功能化外泌体。外泌体膜表面表达的VSVG蛋白能在酸性条件下促使功能化外泌体与肿瘤细胞膜融合,并将膜表面信息转移至肿瘤细胞表面。与此同时,在DC-SIGN核酸适配体的作用力下,促进免疫细胞与肿瘤细胞相互识别,从而实现增强细胞间精准识别和特异性靶向作用。

关键词：功能化外泌体靶向识别膜融合核酸适配体水泡性口炎病毒糖蛋白

靶向识别城市更新单元生态问题及修复策略研究

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靶向识别城市更新单元生态问题及修复策略研究

2020/2021中国城市规划年会暨2021中国城市规划学术季

作者：彭小凤谢家强曾小瑱崔红蕾深圳市城市规划设计研究院有限公司

目前我国城市发展已经进入到从旧城改造到城市更新的转型时期,城市更新已成为当前城市建设的重要内容。先前的城市开发建设模式导致了水环境污染、绿地系统破损、土壤环境污染、山体破损等生态问题,而通过城市更新过程开展生态修复工作... 详细信息

目前我国城市发展已经进入到从旧城改造到城市更新的转型时期,城市更新已成为当前城市建设的重要内容。先前的城市开发建设模式导致了水环境污染、绿地系统破损、土壤环境污染、山体破损等生态问题,而通过城市更新过程开展生态修复工作则是缓解城市生态环境问题,改善城市生态宜居环境的重要手段。本研究归纳分析了我国城市更新单元存在的主要生态环境问题,提出通过生态要素调查评估因子靶向识别更新单元生态环境问题的方法,旨在找出更新单元核心的生态修复问题。同时针对更新单元的土壤、水文、绿地、山体生态要素分别提出了相应的生态修复策略,并选取我国华南地区某典型的工业用地改居住用途的城市更新单元为例,详细介绍了更新单元土壤、水文、绿地、山体生态要素问题的分析识别以及提出相应的生态修复策略。

关键词：靶向识别城市更新生态问题修复策略

来源： cnki会议评论

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基于分子印迹技术的细胞靶向识别研究进展

贵州师范大学学报（自然科学版） 2019年第4期37卷 113-120页

作者：王双寿葛琼琼程婕黄伟安徽工业大学化学与化工学院

分子印迹技术(Molecular imprinting technology,MIT)是一项模拟抗体等靶向生物分子识别专一性的仿生分子识别技术,由于其预定性强、识别选择性好、成本低廉等优势而被广泛应用。细胞靶向识别是MIT近些年发展起来的一个重要研究方向,在... 详细信息

分子印迹技术(Molecular imprinting technology,MIT)是一项模拟抗体等靶向生物分子识别专一性的仿生分子识别技术,由于其预定性强、识别选择性好、成本低廉等优势而被广泛应用。细胞靶向识别是MIT近些年发展起来的一个重要研究方向,在分子生物学、医疗诊断等领域极具应用前景。本文从分子印迹材料的合成方法、识别原理及其应用等方面介绍了MIT在细胞靶向识别领域的研究进展,最后提出了MIT在细胞靶向识别方面尚存的若干问题并对其未来可能的发展方向进行了展望。

关键词：分子印迹细胞靶向识别癌症荧光成像

单糖印迹的荧光纳米粒子用于癌细胞靶向识别与成像

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单糖印迹的荧光纳米粒子用于癌细胞靶向识别与成像

中国化学会第十一届全国生物医药色谱及相关技术学术交流会

作者：王双寿尹丹阳刘震南京大学化学化工学院生命分析化学国家重点实验室

癌细胞的特异性识别是癌症靶向诊断的关键。现有癌细胞特异性识别方法的识别专一性高度依赖于抗体

关键词：分子印迹纳米粒子癌细胞靶向识别成像

来源： cnki会议评论

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利用纳米颗粒靶向识别肿瘤取得重要进展

新农村 2020年第1期 56-56页

最近,中国科学院武汉病毒研究所与中国科学院生物物理研究所联合团队研究发现,利用纳米颗粒靶向识别肿瘤是有效的,但其效果受靶向修饰模式影响明显。相关研究成果近日在线发表于国际知名多学科期刊《Small》。这一研究有助于理解和澄清... 详细信息

最近,中国科学院武汉病毒研究所与中国科学院生物物理研究所联合团队研究发现,利用纳米颗粒靶向识别肿瘤是有效的,但其效果受靶向修饰模式影响明显。相关研究成果近日在线发表于国际知名多学科期刊《Small》。这一研究有助于理解和澄清肿瘤纳米医学领域关于主动靶向功效的争议,同时凸显了精准功能化在构建生物纳米探针和器件方面的重要意义。

关键词：靶向识别纳米颗粒重要进展

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用纳米技术诊断与治疗恶性肿瘤的进展

中南工业大学学报 2002年第2期33卷 160-165页

作者：阮建明刘慰东黄可龙杨建昆文志斌吕红斌中南大学粉末冶金国家重点实验室湖南长沙410083 卫生部生物纳米技术重点实验室湖南长沙410078 中南大学化学化工学院湖南长沙410083 国防科技大学理学院湖南长沙410073 中南大学生理教研室湖南长沙410078 中南大学肿瘤研究所湖南长沙410078

利用纳米技术进行恶性肿瘤早期诊断和治疗是目前国际生物技术领域中最前沿的研究课题 ,迄今实验室细胞模型 (invitro)研究和临床前动物模型 (invivo)研究已取得了重大进展 .纳米生物技术将成为继放疗、化疗和手术治疗后治疗基因疾病的... 详细信息

利用纳米技术进行恶性肿瘤早期诊断和治疗是目前国际生物技术领域中最前沿的研究课题 ,迄今实验室细胞模型 (invitro)研究和临床前动物模型 (invivo)研究已取得了重大进展 .纳米生物技术将成为继放疗、化疗和手术治疗后治疗基因疾病的更有效的方法 .纳米生物技术涵盖纳米材料科学 ,构成纳米药物载体平台的纳米材料与药物或基因结合的组装技术以及随后与靶向物质结合的组装技术 .目前 ,实现了纳米生物传感器在肿瘤细胞上的表达 ,纳米基因药物能够抑制肿瘤细胞的增殖、诱导肿瘤细胞凋亡 ,但在临床治疗之前为了确保安全、有效 ,首先应该研制出针对癌细胞表面配位子特意性更强的靶向物质 ,以减少对正常组织的损害 ;此外 ,还需提高纳米材料药物的装载量和稳定性 ,并研制出适宜的纳米材料以及相应的制备技术 .

关键词：纳米生物技术恶性肿瘤诊断治疗药物组装靶向识别纳米材料

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磁纳米粒子介导的靶向剪切波弹性成像

应用声学 2021年第1期40卷 68-73页

作者：刘强陈铁梅林浩铭齐亭亭丁格陈冕陈昕陈思平医学超声关键技术国家地方联合工程实验室广东省生物医学信息检测和超声成像重点实验室深圳大学医学部生物医学工程学院深圳518055

组织力学特性与其生理病理变化过程密切相关。因此,对组织力学特性的分析有望为疾病诊断提供重要依据。超声弹性成像可以定量分析组织的剪切模量,但在检测的特异性和灵敏度等方面仍存在局限性。针对这一问题,该文发展一种磁纳米粒子介... 详细信息

组织力学特性与其生理病理变化过程密切相关。因此,对组织力学特性的分析有望为疾病诊断提供重要依据。超声弹性成像可以定量分析组织的剪切模量,但在检测的特异性和灵敏度等方面仍存在局限性。针对这一问题,该文发展一种磁纳米粒子介导的靶向剪切波弹性成像新方法。该方法是基于磁纳米粒子在脉冲磁场作用下产生磁致振动,从而导致周围组织的剪切波传播,通过超声探测粒子振动及剪切波传播即可获得磁纳米粒子的分布及周围组织的弹性信息。基于该方法,该文在仿体水平实现对直径约3 mm的磁纳米粒子标记区域的振动检测及其周围组织的弹性信息获取。该研究有望为疾病的精准诊断提供新的思路。

关键词：超声弹性成像磁纳米粒子靶向识别磁致振动