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新生大鼠延髓面神经后核内侧区呼吸节律起步神经元的确认及分类

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生理学报 2009年第1期61卷 79-84页

作者：何国军吴中海南方医科大学生理学教研室广州510515 解放军第四五四医院神经科南京210002

本研究旨在为延髓面神经后核内侧区(medial region of nucleus retrofacialis,mNRF)是基本节律性呼吸发生部位的学说提供直接的实验依据。仿Suzue方法制作新生大鼠含有舌下神经根及mNRF的离体延髓脑片标本,以吸附电极记录舌下神经根呼... 详细信息

本研究旨在为延髓面神经后核内侧区(medial region of nucleus retrofacialis,mNRF)是基本节律性呼吸发生部位的学说提供直接的实验依据。仿Suzue方法制作新生大鼠含有舌下神经根及mNRF的离体延髓脑片标本,以吸附电极记录舌下神经根呼吸节律性放电活动(respiratory rhythmic discharge activity,RRDA)作为呼吸活动的指标,采用全细胞膜片钳记录模式在mNRF同步记录呼吸神经元电活动。观察呼吸非起步神经元、起步神经元的电生理学特征及后者对Cd2+敏感性。在mNRF,呼吸起步神经元放电具有自发性、节律性及电压依赖性发放反应的特征,给予去极化/超极化电流时会产生异位发放。起步、非起步呼吸神经元的各种电学特性(膜电容、输入电阻、内向漏电流)之间无显著性差异。在Sprague-Dawley新生大鼠,呼吸中枢以Cd2+非敏感性呼吸起步神经元为主。本研究进一步表明,mNRF是基本节律性呼吸发生的部位。

关键词：呼吸中枢延髓面神经后核内侧区呼吸节律

GlyT1、GDNF在面神经后核内侧区的表达

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中华神经医学杂志 2012年第12期11卷 1197-1199页

作者：李国才魏巍郑奇辉吴中海龙文飞肖建斌招伟贤广州中医药大学第二附属医院麻醉科广州510120 兰州大学第二医院麻醉科兰州730030 南方医科大学生理学教研室广州510515

目的观察胶质细胞相关受体甘氨酸转运体1（GlyTl）及胶质细胞源性神经营养因子（GDNF）在延髓面神经后核内侧区（mNRF）的表达情况。方法新生SD大鼠（O～3d）10只，雌雄不拘，按随机数字表法分成对照组、实验组（n=5）。取实验组大鼠离... 详细信息

目的观察胶质细胞相关受体甘氨酸转运体1（GlyTl）及胶质细胞源性神经营养因子（GDNF）在延髓面神经后核内侧区（mNRF）的表达情况。方法新生SD大鼠（O～3d）10只，雌雄不拘，按随机数字表法分成对照组、实验组（n=5）。取实验组大鼠离体延髓-脊髓标本制作mNRF“岛”，对照组大鼠取三叉神经核周围脑组织。荧光定量RT-PCR测定GlyTl、GDNF在mNRF“岛”和三叉神经核周围脑组织的表达。结果实验组mNRF“岛”区Gly、GDNF基因的表达量均高于对照组三叉神经核周围脑组织中的基因表达量，差异有统计学意义（t=5．112，P=0．000；t=3．532，P=-0．003）。结论GlyTl、GDNF在mNRF存在高表达，但这两种物质在节律性呼吸发生及调控过程中的作用及与神经元间的具体联系尚有待进一步研究。

关键词：胶质细胞面神经后核内侧区呼吸

大鼠面神经后核内侧区传入 /传出纤维投射(英文)

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中国神经科学杂志 2002年第1期18卷 396-399页

作者：王宁黔吴中海第一军医大学生理学教研室广东广州510515

实验在 2 0只成年SD大鼠上进行。面神经后核内侧区 (mNRF)内微量注射辣根过氧化物酶 (HRP ,0 .5～ 1.0 μl,30 % ,13例。对照组 2例 ) /麦芽凝集素辣根过氧化物酶 (WGA HRP ,0 .0 2～ 0 .0 6 μl,5 % ,5例 ) ,逆行 /顺行追踪mNRF的传入... 详细信息

实验在 2 0只成年SD大鼠上进行。面神经后核内侧区 (mNRF)内微量注射辣根过氧化物酶 (HRP ,0 .5～ 1.0 μl,30 % ,13例。对照组 2例 ) /麦芽凝集素辣根过氧化物酶 (WGA HRP ,0 .0 2～ 0 .0 6 μl,5 % ,5例 ) ,逆行 /顺行追踪mNRF的传入和传出纤维联系。发现 :HRP标记神经元胞体主要位于延髓孤束核 (NTS)、疑核 (AMB)、巨细胞网状核 (Gi)、中缝核群 (raphenuclei)、脑桥臂旁核 (PB)、K F核、脊髓中间带 (intermediatezone)、延髓及脑桥网状结构 ;WGA HRP标记神经纤维主要存在于孤束核、疑核、脊髓中间带、延髓网状结构。结果提示 :mNRF神经元与脑干后部一些核团之间具有比较广泛的纤维联系。

关键词：面神经后核内侧区基本呼吸节律辣根过氧化物酶麦芽凝集素辣根过氧化物酶大鼠传入纤维/传出纤维投射

大鼠面神经后核内侧区与脑干呼吸相关区纤维联系及甘氨酸对基本呼...

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作者：王宁黔第一军医大学

学位级别：硕士

目的 1)应用HRP／WGA-HRP逆行/顺行束路追踪技术，对面神经后核内侧区(the medial area of retro facialis nucleus，mNRF)与脑干呼吸相关区域的纤维投射联系进行研究，探讨基本呼吸节律发生及调控的解剖学基础;2)应用新生大鼠离体延髓... 详细信息

目的 1)应用HRP／WGA-HRP逆行/顺行束路追踪技术，对面神经后核内侧区(the medial area of retro facialis nucleus，mNRF)与脑干呼吸相关区域的纤维投射联系进行研究，探讨基本呼吸节律发生及调控的解剖学基础;2)应用新生大鼠离体延髓脑片标本，同步记录舌下神经根和mNRF的呼吸神经元单位的放电活动，进一步明确mNRF在基本呼吸节律发生中的作用：观察甘氨酸(Glycine，Gly)类受体相应的激动剂和拮抗剂对吸气神经元放电活动的影响，进一步探讨其在基本呼吸节律发生和调控中的作用。方法 1)选用成年SD大鼠，体重200-250g，雌雄不拘。参照图谱，将HRP／WGA-HRP微量注射入mNRF，动物存活48小时后，灌注固定，取脑，冰冻切片，DAB／TMB方法成色，参照图谱光镜观察阳性胞体或纤维的所在区域。2)选用新生SD大鼠(0-3d)，雌雄不拘。参照并改良Suzue的方法制作离体延髓脑片标本，记录舌下神经放电作为呼吸活动的指标，并在延髓腹外侧mNRF区同步记录呼吸神经元单位的放电活动。并通过灌流液给药，观察不同药物对吸气神经元放电活动的影响。结果 1)发现HRP标记神经元胞体主要位于双侧延髓孤束核(NTS)、疑核(AMB)、巨细胞网状核(Gi)、旁巨细胞网状背核(DpGi)、中间网状核(IRt)、外侧网状核(LRt)、中缝核群(raphe muclei)、桥脑臂旁核(PB)、K-F核、脊髓中间区(spinal intermediate zone)、脊髓后角、延髓及桥脑网状结构;2)WGA-HRP标记神经纤维主要存在于双侧孤束核、疑核、脊髓中间区、延髓网状结构;3)在面神经后核内侧区内可记录到多种类型的呼吸神经元放电活动;4)正常对照MKS液灌流时，mNRF区吸气神经元放电的峰频率为28.80±2.77次／s，以Glycine受体抑制剂士的宁(STR)灌流5分钟后，峰频率上升到38.60±4.33次／s 0＜0．01X后以Glycine受体激动剂甘氨酸（Glycine，Gly）灌流5分钟后，峰频率下降至251513．42次儿o＜0刀5人最后以MKS液洗脱，峰频率回升到 31．7616．80次／s。结论以上1L2）结果提示，在成年SD大鼠标本上：mNRF与脑干不同呼吸相关区域之间具有广泛的纤维投射联系。在基本呼吸节律发生及维持过程中，脑干呼吸相关区域与mNRF可能通过这些神经结构的相互作用对基本呼吸节律进行调控。结果3）提示，在新生SD大鼠延髓脑片标本上mw区内存在各类型的呼吸神经元。通过结果4）可以看出：激活或抑制甘氨酸受体可以明显改变mN’RF 区吸气神经元的放电活动，调节放电的峰频率。提示：甘氨酸受体介导了面神经后核内侧区吸气神经元的抑制性突触输入，并可能在基本呼吸节律的发生中发挥重要抑制作用。

关键词：延髓面神经后核内侧区基本呼吸节律辣根过氧化物酶麦角辣根过氧化物酶新生大鼠离体延髓脑片呼吸神经元峰频率

机械损毁面神经后核内侧区对呼吸及呼吸时相的影响

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昆明医学院学报 2002年第4期23卷 28-31,42页

作者：何敏魏书均韩毅朱智勇徐世莲昆明医学院生理教研室昆明650031

为观察面神经后核内侧区对呼吸及呼吸时相的影响 ,并了解其作用机制 ,分别暴露家兔延髓腹面侧和背面侧 ,切断双侧迷走神经 ,记录一侧膈神经放电作为呼吸指标 ,观察机械损毁面神经后核内侧区(mNRF)对呼吸的影响 .结果 :(1)动物在自主呼吸... 详细信息

为观察面神经后核内侧区对呼吸及呼吸时相的影响 ,并了解其作用机制 ,分别暴露家兔延髓腹面侧和背面侧 ,切断双侧迷走神经 ,记录一侧膈神经放电作为呼吸指标 ,观察机械损毁面神经后核内侧区(mNRF)对呼吸的影响 .结果 :(1)动物在自主呼吸时 (n =8) ,轻触压延髓腹侧表面舌下神经根部 ,家兔呼吸立即停止 ;(2 )自主呼吸下 ,从延髓腹面侧机械损毁双侧mNRF ,家兔 (n =6 )自主呼吸和膈神经放电在 2min内同时停止 ,并不可恢复 ;(3)从延髓背面侧机械损毁双侧mNRF ,家兔 (n =2 2 )自主呼吸仍存在 ,但呼吸频率显著变慢 ,TI 和TE 延长 ,但以TE 的延长极为显著 .对上述各损毁点做组织学检查 ,其均在mNRF内 .结果提示 :mNRF与呼吸节律的发生有密切关系。

关键词：面神经后核内侧区延髓呼吸呼吸节律发生器

腺苷A1受体在离体延髓脑片上对节律性呼吸的调制(英文)

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生理学报 2005年第1期57卷 91-96页

作者：王剑莉吴中海王宁黔南方医科大学生理学教研室广州510515

实验旨在探讨腺苷A1受体在对基本呼吸节律调制中的可能作用。制作新生大鼠离体延髓脑片标本,主要包含面神经后核内侧区(themedialregionofthenucleusretrofacialis,mNRF),并保留完整的舌下神经根。以改良Kreb's液灌流脑片,记录mNRF吸气... 详细信息

实验旨在探讨腺苷A1受体在对基本呼吸节律调制中的可能作用。制作新生大鼠离体延髓脑片标本,主要包含面神经后核内侧区(themedialregionofthenucleusretrofacialis,mNRF),并保留完整的舌下神经根。以改良Kreb's液灌流脑片,记录mNRF吸气神经元的电活动,并同步记录舌下神经根呼吸节律性放电(respiratoryrhythmicaldischargeactivity,RRDA)。在灌流液中先分别单独给予腺苷A1受体的特异性拮抗剂8-环戊-1,3-二丙基黄嘌呤(8-cyclopentyl-1,3-dipropylxanthine,DPCPX)和特异性激动剂R-苯异丙基-腺苷(R-phenylisopropyl-adenosine,R-PIA);再分别先后给予R-PIA和R-PIA+DPCPX,观察RRDA和吸气神经元电活动的变化。结果显示,给予腺苷A1受体拮抗剂DPCPX后,呼气时程和呼吸周期明显缩短,吸气神经元中期放电的频率和峰频率显著增大;给予腺苷A1受体激动剂R-PIA后,吸气时程、积分幅度和吸气神经元中期放电的频率和峰频率均显著降低,呼吸周期明显延长,且R-PIA的呼吸抑制作用可部分地被DPCPX逆转。实验结果提示,腺苷A1受体可能通过介导吸气神经元的抑制性突触输入参与节律性呼吸的调制。

关键词：腺苷A1受体面神经后核内侧区呼吸节律吸气神经元放电频率

多沙普仑对新生大鼠延髓脑片呼吸节律性放电的调节作用

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南方医科大学学报 2010年第2期30卷 245-248页

作者：李国才焦勇钢吴中海方芳程静南方医科大学生理学教研室广东广州510515

目的观察多沙普仑对新生大鼠延髓脑片呼吸节律性放电(RRDA)的调节作用。方法制作主要包含延髓面神经后核内侧区(mNRF)的大鼠离体脑片标本,并保留舌下神经根的完整。将36只新生SD大鼠随机分为Ⅰ～Ⅵ组(n=6)。Ⅰ组为对照组;Ⅱ～Ⅳ组为多... 详细信息

目的观察多沙普仑对新生大鼠延髓脑片呼吸节律性放电(RRDA)的调节作用。方法制作主要包含延髓面神经后核内侧区(mNRF)的大鼠离体脑片标本,并保留舌下神经根的完整。将36只新生SD大鼠随机分为Ⅰ～Ⅵ组(n=6)。Ⅰ组为对照组;Ⅱ～Ⅳ组为多沙普仑组(浓度分别为2、5、10μmol/L),Ⅴ组给予丙泊酚(20μmol/L),Ⅵ组给予丙泊酚(20μmol/L)+多沙普仑(5μmol/L),观察给药后l、3、5、l0、l5、30min时舌下神经根呼吸节律性放电的变化,并分析吸气时程(TI)、呼气时程(TE)、呼吸周期(RC)、放电积分幅度(IA)的改变。结果Ⅱ组在给药前后脑片RRDA并无明显改变;Ⅲ、Ⅳ组在给药后1min开始,吸气时程明显延长,放电积分幅度增加;呼气时程于第5min时开始缩短(P0.05)。结论5μmol/L多沙普仑可直接兴奋延髓脑片的RRDA,且可完全拮抗丙泊酚对脑片RRDA的抑制作用,此作用主要通过兴奋吸气中枢实现。

关键词：多沙普仑面神经后核内侧区呼吸节律性放电延髓

切割延髓、酸碱度及温度对新生大鼠离体延髓——脊髓标本呼吸节律性放电的影响

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中国应用生理学杂志 2001年第1期17卷 25-28页

作者：胡德辉吴中海高扬第一军医大学生理教研室广州510515

目的和方法 :在新生大鼠离体延髓———脊髓标本上 ,用吸附电极记录膈神经根颈4 、颈5腹根 (C4v,C5v)和舌下神经根 (Ⅻ )节律性放电活动 (rhythmicaldischargeactivity ,RDA) ,并观察其在对延髓微切割、改变灌流液 pH值及温度后RDA的... 详细信息

目的和方法 :在新生大鼠离体延髓———脊髓标本上 ,用吸附电极记录膈神经根颈4 、颈5腹根 (C4v,C5v)和舌下神经根 (Ⅻ )节律性放电活动 (rhythmicaldischargeactivity ,RDA) ,并观察其在对延髓微切割、改变灌流液 pH值及温度后RDA的变化。结果 :①新生鼠离体延髓一脊髓标本在正常灌流条件下 ,可存活 6～ 8h ,持续 4h可稳定记录到C4v、C5v和Ⅻ的RDA ,且两者完全同步 ,为呼吸节律性放电 (respiratoryRDA ,RRDA) ;②从延髓头端向尾端切割 (每次 10 0 μm) ,切至闩前 5 0 0 μm水平时 ,RRDA不变 ,进一步切割 ,至闩水平 ,RRDA消失 ;③从尾端向头端切割 ,切至舌下神经根下缘水平 ,RRDA不变 ,进一步向头端切割 ,RRDA逐渐消失 ;④从延髓背侧向腹侧水平切割 ,切割至背→腹一半水平时 ,RRDA不变 ,进一步向腹侧切割 ,RRDA逐渐消失 ;⑤灌流液的 pH值从 7.35降至 6 .85 ,RRDA逐渐增强 ,而从 6 .85降至 4.5时 ,逐渐减弱至消失。pH值从 7.45上升到 7.85 ,呼吸频率逐渐减漫 ,放电幅度增强 ;⑥温度由 2 7℃上升到 37℃ ,RRDA逐渐增强 ;由 38℃上升到 41℃ ,RRDA逐渐减弱 ;温度由 2 7℃降 2 3℃ ,RRDA逐渐减弱。温度为 42℃或 2 2℃时 ,RRDA消失。结论 :面神经后核内侧区可能是呼吸节律起源的部位。

关键词：面神经后核内侧区呼吸节律放电新生大鼠舌下神经根膈神经根延髓酸碱度温度

5-HT2A受体在尼可刹米增强新生大鼠延髓脑片呼吸放电中的作用

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生理学报 2008年第2期60卷 216-220页

作者：千智斌吴中海南方医科大学生理学教研室

本文旨在探讨中枢呼吸兴奋剂尼可刹米对新生大鼠基本节律性呼吸的产生和调节的影响及5-HT2A受体在其中的作用。制作新生大鼠离体延髓脑片标本,含面神经后核内侧区（the medial region of the nucleus retrofacialis,mNRF）并保留舌下神... 详细信息

本文旨在探讨中枢呼吸兴奋剂尼可刹米对新生大鼠基本节律性呼吸的产生和调节的影响及5-HT2A受体在其中的作用。制作新生大鼠离体延髓脑片标本,含面神经后核内侧区（the medial region of the nucleus retrofacialis,mNRF）并保留舌下神经根,灌流改良Kreb＇s液（modified Kreb＇s solution,MKS）,记录舌下神经根呼吸相关节律性放电活动（respiratory-re-lated rhythmic discharge activity,RRDA）,观察不同浓度尼可刹米、5-HT2A受体特异激动剂2,5-二甲氧基-4-碘苯基丙烷[1-（2,5-dimethoxy-4-iodophenyl）-2-aminopropane,DOI]、5-HT2A受体特异拮抗剂酮舍林（ketanserine）以及联合使用尼可刹米和酮舍林对舌下神经根RRDA的影响。结果显示,尼可刹米在0.5-7μg/mL时对延髓脑片RRDA有兴奋作用,在5μg/mL时对吸气时程（inspiratory time,TI）、放电积分幅度（integral amplitude,IA）、呼吸周期（respiratory cycle,RC）等呼吸指标综合效果最显著。DOI明显延长TI、增强IA、缩短RC,对RRDA有兴奋作用。酮舍林明显缩短TI、减弱IA、延长RC,对RRDA有抑制作用。联合使用DOI和酮舍林对RRDA无明显作用。酮舍林可完全阻断尼可刹米对RC的作用,部分阻断尼可刹米对IA的作用,对尼可刹米引起的TI变化无明显影响。结果提示,尼可刹米增强新生大鼠离体延髓脑片舌下神经根RRDA,5-HT2A受体可能是尼可刹米作用途径之一。

关键词：面神经后核内侧区尼可刹米 5-HT2A受体延髓脑片