检索结果-南通市图书馆

中国食品学报 2023年第11期23卷 56-65页

作者：吕欣然温馨王扬蕊白凤翎崔方超檀茜倩励建荣郭晓华渤海大学食品科学与工程学院生鲜农产品贮藏加工及安全控制技术国家地方联合工程研究中心辽宁省高等学校生鲜食品产业技术研究院辽宁锦州121013 大连工业大学海洋食品精深加工关键技术省部共建协同创新中心辽宁大连116034 山东美佳集团有限公司山东日照276800

以紫色杆菌CV026为指示菌株,验证面包乳杆菌zhg2-1群体感应淬灭活性,检测其对荧光假单胞菌生物膜、致腐因子表型以及相关基因表达水平的影响,探究面包乳杆菌zhg2-1对荧光假单胞菌群体感应的淬灭机制。结果表明:菌株zhg2-1无细胞上清液... 详细信息

以紫色杆菌CV026为指示菌株,验证面包乳杆菌zhg2-1群体感应淬灭活性,检测其对荧光假单胞菌生物膜、致腐因子表型以及相关基因表达水平的影响,探究面包乳杆菌zhg2-1对荧光假单胞菌群体感应的淬灭机制。结果表明:菌株zhg2-1无细胞上清液对荧光假单胞菌AHLs的降解活性为100%。在亚抑制质量浓度(1.0,2.0,3.0 mg/mL)下,菌株zhg2-1粗提物对荧光假单胞菌生物膜的抑制率和清除率分别为在9.66%~31.32%和28.62%~62.82%范围,对胞外多糖、蛋白酶、脂肪酶、生物胺等致腐因子抑制率在7.23%~100%范围,并呈质量浓度依赖性。扫描电镜结果表明亚抑制质量浓度的菌株zhg2-1粗提物处理使其生物膜量显著减少,细菌菌落处于分散状态。qRT-PCR结果显示,菌株zhg2-1粗提物对荧光假单胞菌群体感应基因rhlI和rhlR分别下调0.93和0.99,aprX、algA、orm、flgA、ldcA等生物膜和致腐基因的表达水平也被显著抑制,说明面包乳杆菌zhg2-1通过干扰荧光假单胞菌群体感应基因的表达,影响其生物膜和腐败因子的产生。本研究结果为开发水产品新型生物防腐剂提供理论依据。

关键词：面包乳杆菌zhg2-1 群体感应淬灭荧光假单胞菌致腐能力

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

面包乳杆菌zhg 2-1对铜绿假单胞菌群体感应淬灭作用研究

面包乳杆菌ZHG 2-1对铜绿假单胞菌群体感应淬灭作用研究

引用

作者：崔天琦渤海大学

学位级别：硕士

水产品是人类赖以生存的重要食物来源之一。随着水产养殖业的迅猛发展,微生物引起水产养殖病害日益突出,铜绿假单胞菌是一种重要的食源性病原菌以及水产品常见的腐败菌,除了健康后果之外,由铜绿假单胞菌引起的食物腐败可能给消费者和生... 详细信息

水产品是人类赖以生存的重要食物来源之一。随着水产养殖业的迅猛发展,微生物引起水产养殖病害日益突出,铜绿假单胞菌是一种重要的食源性病原菌以及水产品常见的腐败菌,除了健康后果之外,由铜绿假单胞菌引起的食物腐败可能给消费者和生产者带来巨大的经济损失。铜绿假单胞菌的致病作用与群体感应(quorum sensing,QS)密切相关。因此,从干扰细菌QS角度出发,寻找群体感应淬灭剂来干预细菌QS所参与或调控的生理活动,是控制微生物致病性的一条新途径。乳酸菌是一种安全有效的生物防腐剂,其作为群体感应淬灭(quorum quenching,QQ)菌的研究在国内外还十分鲜见。本文从自然环境中筛选具有N-酰基高丝氨酸内酯类(N-acylated homoserine lactones,AHLs)降解活性的乳酸菌,并对其进行生理生化反应和16S r DNA测序鉴定。利用气相色谱-质谱(GC-MS)分析活性乳酸菌对几种革兰氏阴性菌常见的AHLs信号分子的降解作用。此外研究zhg 2-1粗提物(CE)处理对QS调控的胞外多糖、绿脓菌素、几丁质酶等毒力因子以及细菌运动的影响;定量实时聚合酶链反应(q RT-PCR)分析了zhg 2-1 CE处理后对QS相关基因las I/R,rhl I/R表达的影响,流式细胞仪分析了zhg 2-1 CE对铜绿假单胞菌感染后小鼠巨噬细胞毒力的影响。最后,通过96孔板法结合扫描电子显微镜(SEM)分析zhg 2-1粗提物、阿奇霉素以及二者组合使用时对铜绿假单胞菌生物膜形成的抑制作用和预先形成的生物膜的清除作用。主要结果如下:1.应用96孔板法、琼脂扩散法从传统发酵食品、鱼类肠道及植物根部等生态环境分离的156株乳酸菌中筛选对铜绿假单胞菌群体感应AHLs信号分子具有较强降解活性的菌株。结果表明来源于阜新彰武酸黄瓜的菌株zhg 2-1,降解活性最强接近100%,经生理生化反应和16S r DNA测序鉴定菌株zhg2-1为面包乳杆菌(Lactobacillus crustorum)。GC-MS分析结果表明,菌株zhg 2-1 CE可以显著降解铜绿假单胞菌中两种常见的信号分子C-HSL和3-oxo-C-HSL,此外,对革兰氏阴性菌常见的几种AHLs信号分子如:C-HSL、C-HSL、C-HSL以及C-HSL均具有较强的降解作用,对长链信号分子的降解活性强于短链信号分子。菌株zhg 2-1 CE对铜绿假单胞菌的最小抑制浓度(MIC)为4.0 mg/m L,三个亚抑制浓度(sub-MIC)即1.0、2.0和3.0 mg/m L的zhg 2-1 CE不影响铜绿假单胞菌的生长,并且对紫色杆菌产生的紫色菌素具有降解作用。2.评估菌株zhg 2-1 CE在sub-MIC对铜绿假单胞菌的群体感应毒力因子以及运动性的影响。结果表明:质量浓度1.0、2.0和3.0 mg/m L的zhg 2-1 CE对铜绿假单胞菌蛋白酶,几丁质酶,绿脓菌素,鼠李糖脂,海藻酸盐和胞外多糖的抑制率分别为28.37%-70.26%,29.63%-63.34%,42.16%-71.84%,25.36%-59.47%,24.25%-59.47,39.83%-79.54%。q RT-PCR反应分析表明,3.0mg/m L的zhg 2-1 CE处理后,调控群体感应的基因las I/R和rhl I/R的表达下调,下调接近70%,其中rhl I的下调最为显著,接近80%。zhg 2-1 CE对鞭毛介导的群集运动以及菌毛介导的泳动运动具有较强的抑制作用。以上所有效果均显示出剂量依赖性。此外,流式细胞仪分析结果表明,3.0 mg/m L菌株zhg 2-1 CE可降低铜绿假单胞菌对小鼠巨噬细胞Ana-1细胞的毒力作用。3.通过96孔板法测定单独使用zhg 2-1粗提物、阿奇霉素以及二者组合使用时对铜绿假单胞菌生物膜形成的抑制作用和预先形成的生物膜的清除作用。结果表明,阿奇霉素单独使用时,作用效果并不显著,zhg 2-1单独使用具有一定的生物膜抑制作用,但是当二者组合使用时,zhg 2-1粗提物可以显著提高阿奇霉素对生物膜的敏感性,sub-MIC处理的抑制率为58.4-90.3%。SEM图片结果表明,zhg 2-1粗提物与阿奇霉素的组合可破坏生物膜的结构,并且减少预先形成的成熟生物膜的厚度,经过葡聚糖酶处理过的生物膜的细胞存活率进一步证实了上述结果。此外,zhg 2-1粗提物与阿奇霉素单独使用以及组合使用时,对浮游细胞的存活没有影响。表明zhg 2-1可以作为有潜力的抗生物膜制剂以及抗生素促进剂。

关键词：面包乳杆菌zhg2-1 铜绿假单胞菌群体感应淬灭毒力因子生物膜

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

欢迎您,

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

欢迎您,

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：