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聚苯乙烯微球吸附脂肪酶催化油酸环氧化的研究

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离子交换与吸附 2013年第3期29卷 200-210页

作者：樊亚超张松平马光辉周炜清苏志国张羽飞中国科学院过程工程研究所生化工程国家重点实验室中国科学院大学

南极假丝酵母脂肪酶B(Candida antarctica Lipase B,CALB)在H2O2的存在下可以有效地催化不饱和脂肪酸上双键的环氧化反应,制备出具有广泛用途的环氧植物油和环氧脂肪酸,但反应体系中的H2O2和反应生成的过氧酸对酶有严重的失活作用,需通... 详细信息

南极假丝酵母脂肪酶B(Candida antarctica Lipase B,CALB)在H2O2的存在下可以有效地催化不饱和脂肪酸上双键的环氧化反应,制备出具有广泛用途的环氧植物油和环氧脂肪酸,但反应体系中的H2O2和反应生成的过氧酸对酶有严重的失活作用,需通过固定化提高酶稳定性。本文选用具有不同亲疏水性和孔径的聚苯乙烯微球,通过吸附法固定化CALB,并构建了非水相和油/水两相体系作为CALB催化油酸环氧化反应的介质。结果表明,固定化CALB在非水相体系中具有较高的活力,而在油/水两相体系中重复使用性能较好;CALB在疏水性介孔聚苯乙烯微球PST30上具有最高的酶负载量(100.7mg/g),在疏水性超大孔聚苯乙烯微球PST上表现出最高的催化活力和重复使用稳定性,其在非水相和两相反应体系中的催化活力分别是Novozym 435的1.8倍和7.3倍,重复使用次数与Novozym 435相当,在油/水两相体系中重复使用至第2次还出现独特的活力升高现象。

关键词：聚苯乙烯微球脂肪酶环氧化非水相体系油/水两相体系

非水毛细管电泳/紫外检测法测定肉桂中的肉桂酸和肉桂醛

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分析测试学报 2007年第2期26卷 274-276页

作者：李利军黄文艺冯军程昊孔红星吴健玲广西工学院生物与化学工程系广西柳州545006 广西大学化学与化学工程学院广西南宁530005

建立了用非水相体系高效毛细管电泳/紫外检测法同时测定肉桂酸和肉桂醛的新方法,考察了运行电压、非水相介质和电解质等因素的影响.在25℃下,以乙腈和碳酸丙烯酯（体积比3∶2）的混合液为缓冲体系的溶剂,缓冲体系中含25 mmol/L十六烷基... 详细信息

建立了用非水相体系高效毛细管电泳/紫外检测法同时测定肉桂酸和肉桂醛的新方法,考察了运行电压、非水相介质和电解质等因素的影响.在25℃下,以乙腈和碳酸丙烯酯（体积比3∶2）的混合液为缓冲体系的溶剂,缓冲体系中含25 mmol/L十六烷基三甲基溴化铵,0.375%（ψ）乙酸,以碳酸丙烯酯为样品溶剂,重力进样30 s,运行电压20 kV,毛细管总长45 cm,有效长度30 cm,ψ5 μm,检测波长310 nm.肉桂酸线性范围为4～100 mg/L,r=0.999 4,检出限为0.80 mg/L,RSD为1.07%.肉桂醛的线性范围10～240 mg/L,r=0.999 6,检出限为2.30 mg/L,RSD为2.19%.应用于肉桂中的肉桂醛和肉桂酸的测定,结果满意.

关键词：肉桂肉桂酸肉桂醛非水相体系毛细管电泳紫外检测

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华根霉脂肪酶催化合成乙酸香茅酯的研究

食品工业科技 2010年第2期31卷 307-310页

作者：王楠王栋徐岩周艺博江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室江苏无锡214122

研究了华根霉菌丝结合脂肪酶(RCL)非水相直接酯化合成乙酸香茅酯的反应条件。在醇酸比为1.2∶1,反应温度40℃时得到较高的转化率。但由于底物乙酸较强的抑制性,使得高底物浓度下RCL催化能力受限。通过采用分批流加的方法使在底物浓度0.2... 详细信息

研究了华根霉菌丝结合脂肪酶(RCL)非水相直接酯化合成乙酸香茅酯的反应条件。在醇酸比为1.2∶1,反应温度40℃时得到较高的转化率。但由于底物乙酸较强的抑制性,使得高底物浓度下RCL催化能力受限。通过采用分批流加的方法使在底物浓度0.2mol/L时转化率提高至94%。与10种商品化脂肪酶进行了比较,发现在相同条件下RCL表现出较高的转化效率。产物乙酸香茅酯的色泽好,气味纯正。

关键词：华根霉菌丝结合脂肪酶乙酸香茅酯非水相体系

非水体系毛细管电泳-紫外检测法测定苯甲酸和苯甲醛

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分析试验室 2006年第7期25卷 56-59页

作者：李利军黄文艺程昊孔红星吴健玲广西工学院生物与化学工程系柳州545006 广西大学化学与化学工程学院南宁530005

建立了用非水相体系高效毛细管电泳-紫外检测法同时测定苯甲酸和苯甲醛的新方法，考察了运行电压、非水相介质和电解质等因素的影响，在25℃下，以V（乙腈）：V（碳酸丙烯酯）=1：1的混合液为溶剂，缓冲体系中含15mmol／L十六烷基三甲... 详细信息

建立了用非水相体系高效毛细管电泳-紫外检测法同时测定苯甲酸和苯甲醛的新方法，考察了运行电压、非水相介质和电解质等因素的影响，在25℃下，以V（乙腈）：V（碳酸丙烯酯）=1：1的混合液为溶剂，缓冲体系中含15mmol／L十六烷基三甲基溴化铵体积分数1％乙酸，重力进样30S，运行电压20kV，毛细管总长45cm有效长度30cm，φ75μm，检测波长285nm。苯甲酸线性范围为5～40μg／mL，线性方程为：Y=13．473ρ＋13．336，相关系数r=0．9985，检出限为0．92μg／mL，RSD为3．8％。苯甲醛的线性范围75～1125μg／mL线性方程为：Y=5．2449ρ＋564．01，相关系数r=0．9997，检出限为15．60μg／mL，RSD为3．5％。已用于经空气氧化后的苯甲醛中苯甲酸和苯甲醛的测定。

关键词：苯甲酸苯甲醛非水相体系毛细管电泳紫外检测

产正丁醇脱氢酶微生物的筛选及其酶学性质的初步研究

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食品研究与开发 2021年第2期42卷 197-204页

作者：郝媛王东特日格乐杨德志郭昊翔陈忠军孙子羽满都拉内蒙古农业大学食品科学与工程学院内蒙古呼和浩特010018 内蒙古农业大学内蒙古农牧渔业生物实验研究中心内蒙古呼和浩特010018 内蒙古自治区国际蒙医医院创新蒙医药工程研究中心内蒙古呼和浩特010020

为研究酒类混合发酵过程中正丁醇的产生规律及建立调控正丁醇含量的方法,以酒曲和酒醅为样品,利用LB培养基分离菌株,吸光值法和气相色谱法测定菌株对正丁醇催化的减少量,从中筛选能够在乙醇存在条件下催化正丁醇的微生物,并对该微生物... 详细信息

为研究酒类混合发酵过程中正丁醇的产生规律及建立调控正丁醇含量的方法,以酒曲和酒醅为样品,利用LB培养基分离菌株,吸光值法和气相色谱法测定菌株对正丁醇催化的减少量,从中筛选能够在乙醇存在条件下催化正丁醇的微生物,并对该微生物所产酶的性质进行初步研究。结果显示,所筛得编号为DQ-54的细菌属肠杆菌属(Enterobacter sp.),其产生的酶(Ec-54ADH)能够在含有5.00%乙醇溶液中转化正丁醇为正丁醛,且随着乙醇浓度的增加(0%~25%),Ec-54ADH对正丁醇的特异性改变,催化能力显著降低(p0.05)。另外,在乙醇存在条件下(3.00%),当pH值为7.0和温度为40℃时,Ec-54ADH具有最高催化正丁醇活性,添加金属离子(Fe2+、Mg2+、Mn2+、Zn2+和Cu2+)能够抑制Ec-54ADH对正丁醇催化活力。

关键词：高级醇醇脱氢酶正丁醇酒精饮料非水相体系

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非水毛细管电泳法测定芬布芬含量的研究

分析科学学报 2007年第5期23卷 551-554页

作者：李利军吴峰敏冯军喻来波吴健玲广西工学院生物与化学工程系广西柳州545006 广西大学化学化工学院

本文建立了非水体系高效毛细管电泳法测定芬布芬的新方法。考察了运行电压、非水介质和电解质等因素的影响。选择15mmol／L NaAc-25mmol／L十六烷基三甲基溴化铵（CTAB）为电泳介质，甲醇为溶剂，紫外检测波长281nm，分离电压-25kV，13... 详细信息

本文建立了非水体系高效毛细管电泳法测定芬布芬的新方法。考察了运行电压、非水介质和电解质等因素的影响。选择15mmol／L NaAc-25mmol／L十六烷基三甲基溴化铵（CTAB）为电泳介质，甲醇为溶剂，紫外检测波长281nm，分离电压-25kV，13min内可以实现芬布芬的分离检测。在优化条件下，药物中辅料不干扰芬布芬的测定，加标回收率为98．2％～103．1％。方法简便、快速，可用于芬布芬片中芬布芬含量的测定。

关键词：毛细管电泳芬布芬非水相体系

非水体系毛细管电泳-紫外检测法测定对乙酰氨基苯酚的研究

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分析科学学报 2005年第6期21卷 658-660页

作者：李利军黄文艺程昊孔红星吴健玲广西工学院生物与化学工程系广西柳州545006 广西大学化学与化学工程学院广西南宁530005

本文报道了用非水相体系高效毛细管电泳-紫外检测法测定对乙酰氨基苯酚的新方法;考察了运行电压、非水相介质和电解质等因素的影响.在25℃下,以50mmol/L NaOH的乙醇溶液为电泳缓冲介质,30 mmol/L乙酸钠的乙醇溶液为样品溶剂;选择重力进... 详细信息

本文报道了用非水相体系高效毛细管电泳-紫外检测法测定对乙酰氨基苯酚的新方法;考察了运行电压、非水相介质和电解质等因素的影响.在25℃下,以50mmol/L NaOH的乙醇溶液为电泳缓冲介质,30 mmol/L乙酸钠的乙醇溶液为样品溶剂;选择重力进样30 s,运行电压一25 kV,及检测波长250 nm.测定对乙酰氨基苯酚的线性范围为5.2～52 μg/mL;检出限为2.88μg/mL;RSD为2.34%.本法应用于维C银翘片中对乙酰氨基苯酚的测定,结果满意.

关键词：对乙酰氨基苯酚维C银翘片非水相体系毛细管电泳紫外检测

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过氧化物酶催化芳烃化合物硝化反应研究

过氧化物酶催化芳烃化合物硝化反应研究

作者：孔明明北京理工大学

学位级别：硕士

硝基芳烃化合物是重要的有机合成中间体,经典的化学硝化合成法即硝硫混酸硝化法对环境造成极大的危害。随着绿色化学的发展,环境友好的酶催化技术被越来越多地应用于化学合成过程中。然而进行有机物的生物转化或催化存在着一大难点即底... 详细信息

硝基芳烃化合物是重要的有机合成中间体,经典的化学硝化合成法即硝硫混酸硝化法对环境造成极大的危害。随着绿色化学的发展,环境友好的酶催化技术被越来越多地应用于化学合成过程中。然而进行有机物的生物转化或催化存在着一大难点即底物的溶解度问题。底物浓度过低影响酶催化效率,而高浓度底物又可能抑制酶的活性,甚至使酶蛋白变性失活。本论文为解决上述问题,开展了非水相体系进行过氧化物酶催化硝化反应的研究,解决了有机物底物不溶解于水及易产生副产物等问题,确立了生物酶催化硝化反应的有机溶剂-缓冲液双液相体系。针对该体系首先初步开展了反应条件对辣根过氧化物酶(HRP)催化苯酚硝化反应影响的研究,确定了酶催化反应的最适温度25°C、pH7;并且发现当H2O2加入量与苯酚相同时产物量最高,过量加入H2O2会抑制酶活;NaNO2加入量至少为苯酚10倍以上时,硝化产物量最高,此时无明显底物苯酚聚合现象,同时双液相体系的应用也在很大程度上避免了大量底物加入对反应的抑制作用。双液相酶催化苯酚硝化反应在1个小时以后就几乎终止的原因是酶失活和H2O2消耗,试验中一次性加入12mM的苯酚到反应体系中,通过每隔1h补加与首次等量的过氧化物酶和H2O2的方式连续反应15h后,邻硝基苯酚和对硝基苯酚的总产量可达到70%以上。在上述建立的双液相酶催化硝化反应体系的基础上,对HRP催化芳烃化合物硝化的底物广谱性开展了研究。通过对芳香族化合物的结构特征进行分析发现,当苯环含有取代基-NH2或-OH时,该芳烃化合物则易于被HRP催化硝化。进一步对HRP催化硝化得到的硝化产物鉴定分析发现,苯环上取代基的邻位和对位是最易于被硝基取代的位置,这与通过密度泛函计算方法得到的苯环上各碳原子所带的净电量分布特点相似,因此生物酶催化硝化类似于化学硝化反应的选择性。为了进一步了解过氧化物酶催化硝化反应的机制,本论文还对HRP催化苯酚硝化反应动力学进行了研究。依据过氧化物酶催化硝化反应机制,建立了双底物乒乓机制动力学模型。通过考察底物浓度与硝化反应速率的关系,发现存在H2O2抑制现象,而无底物抑制的反应过程依旧符合双底物乒乓动力学机制,由此计算得到动力学参数Km H2O2=1.09 mM,Km PhOH=9.45 mM,Vmax=0.196 mM·min-1,进而得到动力学方程。最后将实验值和模型计算值进行拟合发现,模型值与试验结果吻合较好,其拟合度R2=0.98732。

关键词：辣根过氧化物酶芳烃化合物硝化反应非水相体系动力学

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离子液体修饰碳复合材料固定化脱氢酶

生物加工过程 2023年第3期21卷 255-262页

作者：刘凯泷张骞江亮王世珍厦门大学化学化工学院福建厦门361005

为了探究离子液体修饰的氧化石墨烯聚乙烯亚胺(GO PEI)材料对苯丙氨酸脱氢酶固定化的影响,首先采用不同咪唑基离子液体对游离苯丙氨酸脱氢酶进行修饰,其次利用咪唑基离子液体[BMIM]Cl修饰GO PEI,分别考察GO、GO PEI和GO PEI[BMIM]Cl固... 详细信息

为了探究离子液体修饰的氧化石墨烯聚乙烯亚胺(GO PEI)材料对苯丙氨酸脱氢酶固定化的影响,首先采用不同咪唑基离子液体对游离苯丙氨酸脱氢酶进行修饰,其次利用咪唑基离子液体[BMIM]Cl修饰GO PEI,分别考察GO、GO PEI和GO PEI[BMIM]Cl固定化苯丙氨酸脱氢酶的性能,然后利用扫描电镜(SEM)以及红外光探究酶固定化的机制。结果表明:咪唑基离子液体中[BMIM]Cl对酶有激活作用,其相对酶活为110.0%;GO PEI PheDH[BMIM]Cl固定化酶的酶活可达93.5%,高于GO PheDH和GO PEI PheDH固定化酶,且温度耐受性和pH耐受性均比游离酶有所提高;GO PEI PheDH[BMIM]Cl固定化酶经过6次重复利用,仍可保持82.7%的酶活,而对照的GO PEI固定化酶的酶活为69.7%。离子液体修饰的碳复合材料具有良好的生物相容性和导电性,在非水相酶催化和生物电催化领域具有广阔的应用前景。

关键词：生物催化酶复合材料离子液体非水相体系