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运用交流阻抗技术直接监测DNA杂交

华东师范大学学报（自然科学版） 2006年第4期 39-48页

作者：徐颖杨琳叶晓燕何品刚方禹之华东师范大学化学系上海200062

介绍了基于交流阻抗技术构建非标记型脱氧核糖核酸(DNA)杂交传感器的方法．以24个碱基长度的寡聚DNA作为实验对象,将5′端巯基化的单链寡聚DNA(SH-ssDNA)探针与巯基乙酸(RSH)同时自组装到金电极表面,形成杂交识别层,利用交流阻抗技术测... 详细信息

介绍了基于交流阻抗技术构建非标记型脱氧核糖核酸(DNA)杂交传感器的方法．以24个碱基长度的寡聚DNA作为实验对象,将5′端巯基化的单链寡聚DNA(SH-ssDNA)探针与巯基乙酸(RSH)同时自组装到金电极表面,形成杂交识别层,利用交流阻抗技术测量出杂交前后金电极表面电子传递电阻R_(et)的增量作为杂交信号．实验中对DNA探针的自组装时间、杂交温度、杂交时间和阻抗测量液等实验条件进行了观察和优化；通过选择自组装液中SH-ssDNA探针和RSH的浓度,减少DNA在金电极表面的非特异性吸附,同时保证金电极表面自组装的SH-ssDNA探针有合适的疏密度,提高了杂交效率．在各优化条件下,无需扩增杂交信号,此非标记型DNA杂交传感器的检测下限为3．0×10^(-14)mol/L；和完全互补序列相比,一个和三个碱基错配序列分别产生55．6％和1．3％的杂交信号．

关键词： DNA杂交传感器交流阻抗非标记法

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G蛋白偶联受体配体结合分析技术

药物分析杂志 2015年第1期35卷 1-7页

作者：张君金亚叶燕锐谭文华南理工大学生物科学与工程学院创新医药中心广州510006 华南理工大学生物科学与工程学院广东省发酵与酶工程重点实验室广州510006

G蛋白偶联受体(G-protein-coupled receptors,GPCRs)是迄今发现的最大的多药物靶点的受体超家族,其激动剂或拮抗剂常被用于治疗各种疾病,在药物研发中扮演重要角色。测定配体与受体亲和力的结合实验是药物评价、研发和作用机理研究中不... 详细信息

G蛋白偶联受体(G-protein-coupled receptors,GPCRs)是迄今发现的最大的多药物靶点的受体超家族,其激动剂或拮抗剂常被用于治疗各种疾病,在药物研发中扮演重要角色。测定配体与受体亲和力的结合实验是药物评价、研发和作用机理研究中不可缺少的部分。用于研究GPCRs与其配体结合的分析技术,可以按照标记方式的异同分为三类:同位素标记法、非同位素标记法和非标记法。非同位素标记法多采用荧光配体标记,利用竞争法或荧光共振能量转移直接获知结合情况;非标记法中利用各种生物传感器,通过检测配体结合受体后胞内分子运动引起的电信号或光信号的变化来表征结合情况。此外,质谱也已被用于受体-配体平衡解离常数的测定,显示了其在非标记结合分析及受体功能研究中的潜力。本文归纳了目前用于GPCRs结合分析的主要技术,对其原理及优缺点进行了综述,并对受体-配体结合分析中新方法的应用进行了展望。

关键词： G蛋白偶联受体受体-配体结合分析多药物靶点同位素标记法非标记法生物传感器质谱

基于T碱基错配非标记荧光法检测Hg2+的新方法

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宝鸡文理学院学报（自然科学版） 2020年第2期40卷 25-31页

作者：陆文涛王蓉侯少龙张红鸽宝鸡文理学院化学化工学院陕西宝鸡721013

目的建立一种高选择性的、非标记、操作简单的检测Hg2+的荧光分析方法。方法利用紫外可见吸收光谱法,在260 nm波长下测吸光度,对DNA进行定量分析,准确测定实验所用DNA片段的浓度;利用荧光光谱法,在激发波长为445 nm,扫描范围为455~650 n... 详细信息

目的建立一种高选择性的、非标记、操作简单的检测Hg2+的荧光分析方法。方法利用紫外可见吸收光谱法,在260 nm波长下测吸光度,对DNA进行定量分析,准确测定实验所用DNA片段的浓度;利用荧光光谱法,在激发波长为445 nm,扫描范围为455~650 nm下,检测单碱基T/T错配的双链DNA探针加入核黄素和Hg2+前后,核黄素的荧光信号的变化。结果单碱基错配的双链DNA能有效检测10~200 nM Hg2+。该体系的荧光比率(F/F0)与Hg2+浓度具有良好的线性关系,其线性方程为F/F0=0.0009C(nmol/L)+0.0049,相关系数r2=0.9930,检出限为3.3 nM(S/N=3)。相对标准偏差(RSD)小于1.37%;样品回收率为100.8%~103.3%。结论该方法可用于环境水样中Hg2+的测定。

关键词：非标记法 T/T碱基错配荧光分析法 Hg2+

基于表面增强拉曼光谱的致病菌检测方法研究进展

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激光与光电子学进展 2022年第18期59卷 25-32页

作者：邱训伏秋月王鹏李绍新李英广东医科大学医学技术学院广东东莞523808 广东医科大学生物医学工程学院广东东莞523808

近年来,细菌感染性疾病不断发生,抗生素的频繁使用使得耐药细菌的数量显著增多,耐药现象愈发严峻。迫切需要一种高效、准确的检测技术来对致病菌作出判断。不同种属细菌其分子组成和结构不同,表面增强拉曼光谱(SERS)主要由于其能反映细... 详细信息

近年来,细菌感染性疾病不断发生,抗生素的频繁使用使得耐药细菌的数量显著增多,耐药现象愈发严峻。迫切需要一种高效、准确的检测技术来对致病菌作出判断。不同种属细菌其分子组成和结构不同,表面增强拉曼光谱(SERS)主要由于其能反映细菌特有的光谱指纹而被用于区分和反映细胞状态。SERS对致病菌的检测受到多个因素的影响,本文从三个方面回顾了SERS对致病菌的检测并做一简要综述:首先,从基底的设计方面,总结了不同结构和大小的SERS基底对致病菌的检测;其次,回顾了致病菌的共培养、原位还原和静电结合的非标记检测方式以及标记检测包括外标记和内标记方法对致病菌的SERS检测;最后,结合致病菌拉曼光谱分析方法即传统的多变量统计分析方法和先进的机器学习算法对致病菌加以鉴定并对SERS用于致病菌检测进行了总结和展望。

关键词：光谱学表面增强拉曼光谱致病菌标记法非标记法