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应用MPV及LP(a)构建冠心病CABG术后静脉桥血管再狭窄预测模型及应用

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中国老年学杂志 2024年第22期 5397-5400页

作者：刘影王琛张茹霞崔花花潘三葱晋城市人民医院

目的分析平均血小板体积(MPV)及脂蛋白(LP)(a)对冠心病冠状动脉旁路移植手术(CABG)后静脉桥血管再狭窄的危险因素及其对CABG术后静脉桥血管再狭窄的应用价值。方法回顾性分析行CABG术后5年再发可疑心肌缺血事件而入院治疗的患者100例... 详细信息

目的分析平均血小板体积(MPV)及脂蛋白(LP)(a)对冠心病冠状动脉旁路移植手术(CABG)后静脉桥血管再狭窄的危险因素及其对CABG术后静脉桥血管再狭窄的应用价值。方法回顾性分析行CABG术后5年再发可疑心肌缺血事件而入院治疗的患者100例。根据冠状动脉造影结果分为静脉桥血管通畅(SVG)组67例和静脉桥血管狭窄(SVGD)组33例，结果两组性别、年龄、体质量指数(BMI)、高血压、糖尿病、脑血管疾病、吸烟史差异无统计学意义(P>0.05)。两组中性粒细胞比例、淋巴细胞比例、红细胞计数、血红蛋白、血小板计数、血小板分度宽度差异无统计学意义(P>0.05),SVG组MPV和白细胞计数明显大于SVGD组(P0.05),SVG组LP(a)明显大于SVGD组(P静脉桥血管再狭窄的危险因素(P静脉桥血管再狭窄的敏感性分别为0.671、0.820,特异性分别为0.606、0.636,准确性分别为0.650、0.760,而两者联合预测CABG术后静脉桥血管再狭窄的敏感性为0.865,特异性为0.575,准确性为0.770。结论 LP(a)、MPV是CABG术后静脉桥血管再狭窄的危险因素，两者联合预测CABG术后静脉桥血管再狭窄的敏感性和准确性较高。

关键词：平均血小板体积(MPV) 脂蛋白(LP)(a) 冠心病冠状动脉旁路移植手术(CABG) 静脉桥血管再狭窄

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活化转录因子3在再狭窄静脉桥血管中的表达

中国医药 2018年第5期13卷 773-776页

作者：周宁张魁乔博康郑居兵李扬赵洋华琨曹剑刘冬董然首都医科大学附属北京安贞医院心脏外科 100029

目的探讨再狭窄静脉桥血管与正常大隐静脉中活化转录因子3(ATF3)的表达以及机械牵张刺激对内皮细胞ATF3表达的影响。方法选择2017年7月首都医科大学附属北京安贞医院因静脉桥血管再狭窄需行二次冠状动脉旁路移植术(CABG)的患者及因冠状... 详细信息

目的探讨再狭窄静脉桥血管与正常大隐静脉中活化转录因子3(ATF3)的表达以及机械牵张刺激对内皮细胞ATF3表达的影响。方法选择2017年7月首都医科大学附属北京安贞医院因静脉桥血管再狭窄需行二次冠状动脉旁路移植术(CABG)的患者及因冠状动脉粥样硬化性心脏病需行CABG患者各1例,CABG术中收集狭窄的静脉桥血管及患者自身正常的大隐静脉,每例样本分为3份,分别用于制成石蜡切片、制成冰冻切片、提取RNA。应用免疫组织化学法检测再狭窄静脉桥血管与正常大隐静脉血管ATF3的表达,应用实时荧光定量聚合酶链反应、蛋白质印迹法检测正常人脐静脉内皮细胞(HUVEC)及机械牵张刺激HUVEC中ATF3的表达。结果经免疫组织化学观察发现,ATF3在再狭窄静脉桥血管比正常人大隐静脉桥血管表达增高,且在内皮层表达明显增高。实时荧光定量聚合酶链反应检测经机械牵张刺激的HUVEC中ATF3表达高于正常HUVEC[(95±4)比(66±6)],差异有统计学意义(P=0.002)。经免疫印迹法检测经机械牵张刺激HUVEC中ATF3表达高于正常HUVEC[(0.43±0.03)比(0.15±0.02)],差异有统计学意义(P静脉桥血管再狭窄内皮功能失调过程中发挥重要作用。

关键词：静脉桥血管再狭窄内皮功能失调活化转录因子3 机械牵张

活化转录因子3基因Cas9编辑慢病毒载体的构建及鉴定

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心肺血管病杂志 2019年第7期38卷 799-804页

作者：周绍酉周宁张魁李扬赵洋宋邦荣郑居兵刘涛帅董然首都医科大学附属北京安贞医院-北京市心肺血管疾病研究所心脏外科

目的:构建靶向活化转录因子3(ATF3)在CRISPR/Cas9技术编辑的慢病毒载体。方法:针对ATF3基因设计并合成三条对应的向导(gRNA)序列和一条无意义序列,向导RNA序列与双酶切U6-EF1a-Cas9-FLAG-P2A-EGFP载体链接,DNA测序鉴定重组载体。荧光/... 详细信息

目的:构建靶向活化转录因子3(ATF3)在CRISPR/Cas9技术编辑的慢病毒载体。方法:针对ATF3基因设计并合成三条对应的向导(gRNA)序列和一条无意义序列,向导RNA序列与双酶切U6-EF1a-Cas9-FLAG-P2A-EGFP载体链接,DNA测序鉴定重组载体。荧光/绝对定量法测定慢病毒浓度。共转染人微血管静脉内皮细胞(HMEC)后,实时定量荧光PCR检测ATF3mRNA表达,验证HMEC细胞中是否含有ATF3基因及其是否有突变。对照病毒和三个靶点慢病毒分别感染Cas9蛋白稳定株,感染后混合克隆进行抽提基因组DNA,将得到PCR产物进行错配酶法进行酶切,对于筛靶中阳性的PCR产物一组序列与野生型对比。Westernblot检测ATF3蛋白表达,验证转染效果。定量PCR检测ATF3mRNA的改变。结果:测序表明ATF3在Cas9编辑下慢病毒载体构建成功。HMEC倒置荧光显微镜荧光视野和明视野进行对比,感染可达到80%转染率,GFP持续稳定表达。Westernblot结果显示,ATF3蛋白表达有明显下调(P静脉桥血管再狭窄中早期内皮功能失调作用机制及基因治疗提供了实验依据。

关键词：冠状动脉旁路移植术静脉桥血管再狭窄活化转录因子3 Cas9基因编辑技术

靶向Egr-1基因RNA干扰慢病毒载体的构建及鉴定

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中华实用诊断与治疗杂志 2013年第12期27卷 1185-1188页

作者：张魁曹剑董然北京市心肺血管疾病研究所首都医科大学附属北京安贞医院心外科北京100029

目的构建靶向人早期生长反应因子(early growth response-1,Egr-1)基因RNA干扰(RNA interference,RNAi)慢病毒载体。方法针对Egr-1基因设计并合成1条Egr-1过表达序列和4条干扰序列,过表达序列与双酶切Ubi-MCS-3FLAG载体连接,干扰序列与... 详细信息

目的构建靶向人早期生长反应因子(early growth response-1,Egr-1)基因RNA干扰(RNA interference,RNAi)慢病毒载体。方法针对Egr-1基因设计并合成1条Egr-1过表达序列和4条干扰序列,过表达序列与双酶切Ubi-MCS-3FLAG载体连接,干扰序列与双酶切hU6-MCS-CMV-EGFP连接,DNA测序鉴定重组载体。共转染人脐静脉血管内皮细胞后(OE-RNAi-1,OE-RNAi-2,OE-RNAi-3,OE-RNAi-4)Western blot检测Egr-1蛋白表达,筛选有效干扰靶点,实时定量荧光PCR检测Egr-1mRNA,验证干扰效果。结果测序表明Egr-1过表达及RNAi慢病毒载体构建成功;Western blot结果显示,OE-RNAi-4组Egr-1蛋白表达抑制率最高(P静脉桥血管再狭窄中早期内皮功能失调作用机制及基因治疗提供了实验依据。

关键词：冠状动脉旁路移植术静脉桥血管再狭窄早期生长反应因子-1 RNA干扰