检索结果-南通市图书馆

作者：罗军超苏州大学

学位级别：硕士

目的:通过微溶胶电纺技术将生物材料负载免疫分子,营造一个促进急性脊髓损伤(SCI)修复的局部微环境,该环境既能控制SCI继发炎症,同时又有桥连损伤神经的生物材料,协同促进SCI修复。方法:1.用微溶胶静电纺丝技术制备负载CD80mAb的左旋聚... 详细信息

目的:通过微溶胶电纺技术将生物材料负载免疫分子,营造一个促进急性脊髓损伤(SCI)修复的局部微环境,该环境既能控制SCI继发炎症,同时又有桥连损伤神经的生物材料,协同促进SCI修复。方法:1.用微溶胶静电纺丝技术制备负载CD80mAb的左旋聚乳酸(PLLA)静电纺丝纤维支架后:(1)比较PLLA,PLLA-IgG,PLLA-CD80mAb三组支架的理化性能及生物相容性:使用透射电镜(TEM)检测纤维支架的内部结构,使用扫描电子显微镜(SEM)检测纤维支架的形貌特征,使用力学拉伸测试纤维支架的应变力。(2)检测CD80mAb在PLLA支架的负载情况,以及释放效率。(3)CCK-8法比较PLLA,PLLA-IgG,PLLA-CD80mAb纤维支架浸出液对细胞增殖的影响,检测纤维的生物相容性。2.建立SD大鼠胸椎第9节段(T9)右侧脊髓半横断损伤模型:34只健康雄性6周龄SD大鼠G根据手术情况随机分为4组:1,假手术组(n=7);2,SCI组(n=10);3,PLLA移植组(n=7);4,PLLA-CD80mAb移植组(n=10)后:(1)在术后8周内统计大鼠死亡率,每周进行一次BBB评分评价神经功能恢复情况。(2)术后8周行组织学检查及免疫组化:抗胶质纤维酸性蛋白(anti-GFAP)、抗神经丝蛋白200(anti-NF-200)、抗诱导型一氧化氮合酶(anti-i NOS)、抗白介素1β(anti-IL-1β)、抗白介素6(anti-IL-6)等检查。结果:(1)PLLA,PLLA-IgG,PLLA-CD80mAb之间的形貌基本一致,直径变化不明显,透射电镜示负载抗体后有明显的核壳结构,力学拉伸实验证明负载抗体前后,不改变纤维支架的力学性能。(2)通过荧光染色技术,验证PLLA成功的负载CD80mAb,释放曲线表明PLLA-CD80mAb可以有效的缓慢释放CD80mAb。(3)CCK-8法显示PLLA,PLLA-IgG,PLLA-CD80mAb各组之间增殖无统计学差异,显示良好的生物相容性。(4)4只老鼠因不完全半横断而被淘汰(SCI组2,PLLA组1只,PLLA-CD80mAb组1只),最后留30只老鼠。左下肢术后PLLA-CD80mAb组第2和3周的评分明显高于SCI组,右下肢术后PLLA-CD80mAb组BBB评分略高于PLLA-IgG组,明显高于SCI组,PLLA-CD80mAb组的生存率高于PLLA-IgG组,远高于SCI组。(5)免疫组化显示:PLLA-CD80mAb组的GFAP表达要明显少于SCI组和PLLA-IgG组,而其NF-200表达则明显高于SCI组。PLLA-IgG组的NF-200表达要高于SCI组。同时SCI组的IL-1β,IL-6,i NOS的表达均明显高于PLLA-CD80mAb组,PLLA-IgG组的IL-1β,IL-6,i NOS的表达也高于PLLA-CD80mAb组。结论:通过微溶胶法实现静电纺丝纤维负载CD80mAb的方法,获得具有生物学活性的免疫调节功能支架,并可通过抑制炎症因子,调节脊髓损伤后的局部炎症环境,协同纤维支架的物理桥梁作用共同促进脊髓损伤的恢复。

关键词：静电纺丝支架 CD80单克隆抗体脊髓损伤神经再生炎症反应

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聚己内酯/聚三亚甲基碳酸酯静电纺丝支架材料的制备与组织相容性研究

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山西医科大学学报 2018年第3期49卷 251-257页

作者：张国权王宇周栋郑俊金迅江涛中国人民武装警察部队后勤学院临床医学系天津300309 兰州大学第二附属医院血管外科

目的制备聚己内酯/聚三亚甲基碳酸酯(PCL/PTMC)静电纺丝支架材料,并研究其理化特征和组织相容性。方法采用静电纺丝技术制备PCL和不同配比的PCL/PTMC支架材料(3∶1,1∶1,1∶3,w/w);采用扫描电镜、傅里叶红外光谱、热重分析、差热分析及... 详细信息

目的制备聚己内酯/聚三亚甲基碳酸酯(PCL/PTMC)静电纺丝支架材料,并研究其理化特征和组织相容性。方法采用静电纺丝技术制备PCL和不同配比的PCL/PTMC支架材料(3∶1,1∶1,1∶3,w/w);采用扫描电镜、傅里叶红外光谱、热重分析、差热分析及单轴拉伸试验检测已制备支架材料的形态特征、化学组成、热稳定性及力学性能;小鼠皮下组织植入各组实验材料,观察异物反应、材料降解及细胞在材料内生长情况。结果扫描电镜观察显示,PCL/PTMC(3∶1)、PCL/PTMC(1∶1)与PCL支架材料具有相似的纤维多孔性结构,PCL/PTMC(1∶3)支架材料发生纤维融合,失去纤维多孔性结构。傅里叶红外光谱显示,PCL/PTMC支架材料中PCL与PTMC分子间作用较弱,特征峰无明显改变。热重和差热分析显示,PCL/PTMC支架材料的热稳定性介于PCL和PTMC之间,随着PTMC含量的增加而降低。单轴拉伸试验显示,PTMC含量与材料的形态特征是影响PCL/PTMC支架材料力学性能的主要因素。小鼠皮下组织埋置实验显示,PCL、PCL/PTMC(3∶1)、PCL/PTMC(1∶1)材料植入2月后,宿主细胞侵蚀厚度分别为(23.85±3.71)%,(26.83±3.71)%和(29.15±2.33)%(P静电纺丝支架材料的理化性质随材料中PTMC含量的增加发生规律性变化,纤维多孔性PCL/PTMC支架材料具有良好的组织相容性。

关键词：聚己内酯聚三亚甲基碳酸酯静电纺丝支架人工血管

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负载CD40单克隆抗体静电纺丝生物支架的制备及其生物学作用

负载CD40单克隆抗体静电纺丝生物支架的制备及其生物学作用

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作者：刘星志苏州大学

学位级别：硕士

目的:静电纺丝纤维支架表面接枝CD40抗体(CD40mAb),一方面通过释放抗体直接诱导肿瘤细胞的凋亡,同时释放抗体诱导树突状细胞(DC)的活化,激发特异性免疫应答,释放细胞因子和活化杀伤性T细胞(CTL),间接实现抑制肿瘤细胞生长的功能;另一方... 详细信息

目的:静电纺丝纤维支架表面接枝CD40抗体(CD40mAb),一方面通过释放抗体直接诱导肿瘤细胞的凋亡,同时释放抗体诱导树突状细胞(DC)的活化,激发特异性免疫应答,释放细胞因子和活化杀伤性T细胞(CTL),间接实现抑制肿瘤细胞生长的功能;另一方面释放抗体后的支架,为组织再生提供固相载体,诱导新生组织再生。最终实现生物支架的免疫调节抑制肿瘤生长和促进新生组织再生的双重功能。方法:用静电纺丝技术制备左旋聚乳酸(PLLA)静电纺丝纤维支架,经过多巴胺(PDA)的接枝作用将小鼠抗人CD40mAb负载到PLLA支架表面后:(1)比较PLLA,PLLA-PDA,PLLA-PDA-IgG,PLLA-PDA-CD40mAb四组支架的理化性能:使用XPS检测纤维支架的化学组成,使用扫描电子显微镜(SEM)检测纤维支架的形貌特征,使用WCA检测纤维支架的亲水性能,使用力学拉伸测试纤维支架的应变和应力。(2)检测CD40mAb在PLLA-PDA支架的接枝状态,以及吸收和释放效率。(3)比较PLLA,PLLA-PDA,PLLA-PDA-IgG,PLLA-PDA-CD40mAb纤维支架浸出液对肿瘤细胞的杀伤作用:将各组材料浸出液与乳腺癌细胞MDA-MB-231共培养,CCK-8法检测MDA-MB-231细胞的增殖效率;用实时定量PCR(qRT-PCR)检测MDA-MB-231细胞凋亡相关基因的表达;流式细胞术检测MDA-MB-231细胞早期凋亡比例,使用SEM观察接种在各组静电纺丝支架上的MDA-MB-231细胞的形态,用活死细胞染色法观察MDA-MB-231细胞在各组静电纺丝支架上的生长情况。(4)采用流式细胞术检测各组静电纺丝支架浸出液对树突状细胞(DC)的诱导成熟能力,使用光学显微镜观察DC的形态。(5)比较PLLA-PDA,PLLA-PDA-IgG,PLLA-PDA-CD40mAb浸出液对小鼠成骨前体细胞MC3T3-E1的影响,使用SEM观察接种在各组静电纺丝支架上的细胞的形态,用活死染色法观察细胞在各组静电纺丝支架上的生长情况,使用CCK-8检测MC3T3-E1细胞在材料浸出液中的增殖。结果:(1)PLLA,PLLA-PDA,PLLA-PDA-IgG,PLLA-PDA-CD40mAb之间的形貌基本一致,直径变化不明显,XPS数据显示PDA成功接枝,WCA证明了未接枝PDA之前PLLA纤维支架疏水,接枝PDA后变成亲水,有利于细胞粘附。力学拉伸实验证明接枝PDA前后,不改变纤维支架的力学性能。(2)通过荧光染色技术,验证PLLA-PDA成功的接枝CD40mAb,吸收曲线显示CD40mAb可以在24小时左右完全接枝到纤维支架上,释放曲线表明PLLA-PDA-CD40mAb可以有效的缓慢释放CD40mAb。(3)CCK-8法证明接枝后释放的CD40mAb可以有效的抑制肿瘤细胞的生长,并且随着释放时间的增加,抑制作用越来越大;流式细胞术结果显示,未接枝CD40mAb的纤维支架没有诱导肿瘤细胞凋亡的作用,而PLLA-PDA-CD40mAb可以诱导细胞凋亡;qRT-PCR数据显示PLLA-PDA-CD40mAb使细胞中Bax mRNA明显上调,Bax/Bcl-2显著增加。SEM显示PLLA-PDA-CD40mAb组细胞明显变圆,细胞状态较差,活死细胞染色中,PLLA-PDA-CD40mAb组红色较多,显示出细胞死亡率高,诱导细胞凋亡的效果最明显。(4)流式细胞术实验表明,与外周血单个核细胞(PBMCs)未诱导组相比,GM-CSF和IL-4组中细胞CD11c,HLA-DR表达率高,表明DC细胞被诱导成熟,CD40mAb组CD11c,HLA-DR表达率高,证明CD40mAb具有诱导DC细胞成熟的能力。同时,与PLLA-PDA,PLLA-PDA-IgG组浸出液相比,PLLA-PDA-CD40mAb组浸出液中细胞HLA-DR表达明显增高,证明PLLA-PDA-CD40mAb组释放的CD40mAb可以诱导细胞成熟。(5)SEM结果显示,各组材料上MC3T3-E1细胞铺展较好,CCK-8显示MC3T3-E1细胞良好生长,活死细胞染色未见明显的红色部分。提示释放完CD40mAb的纤维支架仍然具有促进正常组织再生的潜能。结论:成功制备具有免疫调节抑制肿瘤生长和促进成骨前体细胞增殖的双重功能的生物支架。

关键词：静电纺丝支架 CD40单克隆抗体免疫治疗组织工程再生

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生物活性静电纺丝纳米纤维支架在乳房脂肪组织工程中的研究与应用进展

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解放军医学院学报 2024年第3期45卷 320-325页

作者：张丽萍朱荔穆德露武广敏王建东内蒙古医科大学内蒙古呼和浩特010110 解放军总医院第一医学中心普通外科医学部北京100853

乳房重建手术是乳腺癌综合治疗中常用的方法。随着外科技术和材料学的进步,术后仿真乳房重建已成为可实现的目标。为解决当前手术存在的问题,乳腺整形外科医师积极研究组织工程技术。乳房脂肪组织工程是一种新兴技术,基于自体脂肪移植... 详细信息

乳房重建手术是乳腺癌综合治疗中常用的方法。随着外科技术和材料学的进步,术后仿真乳房重建已成为可实现的目标。为解决当前手术存在的问题,乳腺整形外科医师积极研究组织工程技术。乳房脂肪组织工程是一种新兴技术,基于自体脂肪移植、生物学和组织工程领域的经验,为尚未满足的乳房重建临床需求提供了潜在的解决方案。脂肪组织工程可以制备具有仿生结构的软组织,为乳房重建提供了新的可能性。通过将稳定增殖、低免疫原性的种子细胞植入支架,脂肪组织工程可以构建具有生物活性的支架,实现脂肪组织的再生和修复。其中,采用静电纺丝技术制备的纳米纤维支架具有优异的细胞外基质结构和力学性能,不仅提供了脂肪组织生长的空间,还通过调节细胞表型与启动细胞外基质之间的相互作用,为细胞分化和增殖提供诱导平台。因此,静电纺丝纳米纤维支架被认为是乳房脂肪组织工程有前景的应用材料之一。本文综述了乳房脂肪组织工程中生物活性静电纺丝纳米纤维支架的研究进展,旨在更好地了解乳房重建手术的发展趋势,并为未来的临床应用提供指导和借鉴。

关键词：脂肪间充质干细胞静电纺丝支架组织工程修复和再生乳房重建

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白藜芦醇在创面修复中的作用

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生物技术 2024年第1期34卷 120-125,133页

作者：肖亚倩李有恒王军湖北工业大学工业发酵省部共建协同创新中心湖北武汉430068 湖北工业大学生物工程与食品学院湖北武汉430068

白藜芦醇(Resveratrol)是一种天然多酚类化合物,具有抗氧化、抗炎、促血管生成和细胞保护作用,是一种既能促进创面修复,又能防止慢性创面发展的可行治疗方法。该文介绍了白藜芦醇通过水凝胶、静电纺丝支架以及细菌纤维素聚合物等作用模... 详细信息

白藜芦醇(Resveratrol)是一种天然多酚类化合物,具有抗氧化、抗炎、促血管生成和细胞保护作用,是一种既能促进创面修复,又能防止慢性创面发展的可行治疗方法。该文介绍了白藜芦醇通过水凝胶、静电纺丝支架以及细菌纤维素聚合物等作用模式在各种细胞中发挥的抗氧化、抗炎、抗菌和抗衰老的特性,其诱导的分子途径,及与创面修复最相关的因素。对白藜芦醇在创面修复中存在问题及未来研究方向进行了展望。

关键词：白藜芦醇创面修复抗氧化抗炎抗菌抗衰老水凝胶静电纺丝支架细菌纤维素聚合物

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三维仿生粘附性纤维支架促进肌腱修复的基础研究

三维仿生粘附性纤维支架促进肌腱修复的基础研究

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作者：赵健平广西医科大学

学位级别：硕士

目的和意义:目的:通过静电纺丝技术和脱细胞化的方法,构造具有高通透性、良好生物相容性的仿生三维活性支架,不仅拥有优异的粘附能力,更能指导肌腱干细胞成腱分化从而发挥促进肌腱修复的功能。意义:肌腱组织是骨与肌肉组织联系的关键,... 详细信息

目的和意义:目的:通过静电纺丝技术和脱细胞化的方法,构造具有高通透性、良好生物相容性的仿生三维活性支架,不仅拥有优异的粘附能力,更能指导肌腱干细胞成腱分化从而发挥促进肌腱修复的功能。意义:肌腱组织是骨与肌肉组织联系的关键,不仅负责传递来源于肌肉组织的力到骨骼,在关节维稳和驱动方面同样发挥着不可替代的作用。肌腱受损后的临床治疗手段较为有限,开发一种能够用于促进肌腱断裂后愈合的生物仿生支架拥有广阔的应用前景。本研究在已有文献研究的基础上,构造了一种能够拥有促进肌腱干细胞成腱分化的生物活性支架,从而为进一步的临床应用提供一种新思路。本研究旨在通过生物模拟的方法促进肌腱组织的愈合。方法:（1）采用静电纺丝技术,通过高速收集滚筒获得取向一致的纳米纤维膜。在纤维膜仍然残留有部分应力时,将其置于37℃水溶液中以获取卷曲纤维膜。通过浸泡于Na BH水溶液并结合负压抽吸获得蓬松三维立体支架。（2）使用来源于猪的跟腱组织,经过脱细胞化处理获得肌腱脱细胞外基质。检测残留DNA,羟脯氨酸,糖胺聚糖含量以及HE染色证明脱细胞化效果。（3）使用胃蛋白酶消化细胞外基质获得预水凝胶;在发泡处理前化学改性支架,而后把其浸泡于预水凝胶获得镀膜支架。验证化学改性与生物镀膜对支架材料与肌腱组织之间的粘附性影响。（4）提取大鼠跟腱来源的肌腱干细胞,将肌腱干细胞接种于三维支架表面验证其生物相容性以及细胞迁移能力,通过置于诱导分化培养基中检测支架诱导肌腱干细胞成腱分化的潜力。结果:（1）PLLA/PEO纤维直径0.601±0.221μm,经过卷曲化处理后获得直径为0.682±0.199μm,波长为13.228±4.878μm,振幅为2.930±1.178μm的波浪形纤维。通过真空负压抽吸和硼氢化钠的发泡作用,PLLA/PEO组能够三维膨胀。移除PEO最佳时间是24小时,扫描电镜证实发泡前后卷曲纤维存在,力学性能存在非线性响应。（2）猪跟腱组织处理前DNA含量为199.57 ng/mg,处理后DNA含量为16.52 ng/mg。HE染色示蓝染核仁明显减少。处理前GAG含量为216.56ng/mg（GAG含量比ECM质量）,处理后GAG含量为139.59 ng/mg。处理前羟脯氨酸含量为1332.81 ng/mg（胶原含量比ECM质量）,处理后胶原蛋白含量为1177.81 ng/mg。（3）获得浓度为20 mg/m L的肌腱ECM预水凝胶。Na OH使用的浓度为0.1M Na OH。使用FITC标记肌腱ECM粉末并验证。共聚焦显微镜证实30分钟处理可以获得最佳的ECM镀膜效果。化学改性后支架能够更好的粘附于肌腱组织表面。（4）无菌条件提取出3-7天大鼠的肌腱干细胞,通过免疫荧光染色技术证实所获得的细胞类型属于肌腱干细胞。生物镀膜的三维卷曲纤维支架具有优异的生物相容性,能够促进细胞增殖并分化为肌腱细胞,对比二维纤维支架组能够显著提高成腱分化相关基因的表达水平。结论:（1）通过高速滚筒收集、卷曲化处理、负压状态下气体发泡及表面化学改性成功获得模拟天然肌腱卷曲状微观结构,多孔及粘附性的三维纤维支架。（2）通过优化脱细胞化手段及胃蛋白酶处理,成功获得脱细胞化完全的猪肌腱脱细胞外基质预凝胶。（3）经表面化学改性的三维纤维支架能够成功的镀上一层脱细胞外基质预水凝胶,而且能够维持优异的组织粘附能力。（4）成功获得了大鼠来源的肌腱干细胞并完成验证。三维仿生纤维支架具备良好的生物相容性,能够促进肌腱干细胞迁移和成腱分化。

关键词：肌腱修复静电纺丝支架细胞外基质肌腱干细胞

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