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外源诱导尾叶桉非培养内生细菌的激活

林业科学 2023年第9期59卷 66-74页

作者：王亚聪王迪田红雨王照玉史晓梦冉隆贤河北农业大学林学院保定071000 河北省林木种质资源与森林保护重点实验室保定071000

【目的】探究桉树非培养内生细菌的激活,为应用内生细菌防治桉树青枯病提供参考。【方法】选用恶臭假单胞杆菌WCS358r、荧光假单胞杆菌WCS374r及其嗜铁素缺失突变体JM218和Mut2,荧光假单胞杆菌WCS417r及其脂多糖缺失突变体WCS417OA-(B4... 详细信息

【目的】探究桉树非培养内生细菌的激活,为应用内生细菌防治桉树青枯病提供参考。【方法】选用恶臭假单胞杆菌WCS358r、荧光假单胞杆菌WCS374r及其嗜铁素缺失突变体JM218和Mut2,荧光假单胞杆菌WCS417r及其脂多糖缺失突变体WCS417OA-(B4)作为外源激活菌株,在限菌系统中采用尾叶桉无菌实生苗与外源菌共培养方法,外源菌作为激活因子对桉树非培养内生细菌进行激活,使植物体内非培养内生细菌恢复可培养状态,并依次利用抗利福平检测、革兰氏染色反应和分子鉴定方法对分离到的内生细菌进行鉴定。【结果】3种外源菌WCS358r、WCS374r和WCS417r分别与同源同代桉树苗共培养后,WCS358r和WCS417r处理的桉树苗中均获得被激活的细菌。WCS358r可定殖于桉树体内,且在不同部位激活出2株解淀粉芽孢杆菌;WCS417r可在桉树根、茎和叶内定殖,且在根和茎内的定殖量显著高于叶片,但不能激活桉树体内的非培养内生细菌。不同种子桉树苗经WCS358r激活后,分离到的菌株种类存在差异,分别激活出链霉菌、苏云金杆菌、解淀粉芽孢杆菌和其他芽孢杆菌,且WCS358r在根、茎内的定殖量表现为根>茎,在叶部未发现WCS358r定殖。外源菌浓度低于10^(7)CFU·mL^(−1)时不能激活桉树苗体内的非培养内生细菌;浓度达到10^(9)CFU·mL^(−1)时,桉树苗体内能够分离到被激活的解淀粉芽孢杆菌和芽孢杆菌。3种外源菌的突变体JM218、Mut2和WCS417OA-(B4)均不能定殖于桉树体内,也不能激活桉树体内的非培养内生细菌。【结论】桉树非培养内生细菌的激活受外源菌种类、浓度以及桉树苗种子的影响,外源菌的定殖情况受细菌种类影响较大,外源菌的嗜铁素和脂多糖突变体菌株分别失去野生型菌株原有的激活和定殖能力,嗜铁素是恶臭假单胞杆菌WCS358r激活桉树非培养内生细菌的关键因子,脂多糖是影响荧光假单胞杆菌WCS417r定殖的关键因子。

关键词：青枯病尾叶桉激活非培养内生细菌

青枯病胁迫下印度梨形孢诱导‘云烟87’抗性的初步探索

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分子植物育种 2023年

作者：罗富方王潇笛韦朝贵刘胜传许本波孙文秀贵州省烟草公司黔西南州公司长江大学生命科学学院

为弄清印度梨形孢(Piriformospora indica)诱导烤烟(Nicotiana tabacum)对青枯病的抗性机理，以‘云烟87’为试验材料，研究了在青枯病菌胁迫下烟叶中超氧化物岐化酶(superoxide dismutase， SOD)、过氧化物酶(peroxidase， POD)、多酚... 详细信息

为弄清印度梨形孢(Piriformospora indica)诱导烤烟(Nicotiana tabacum)对青枯病的抗性机理，以‘云烟87’为试验材料，研究了在青枯病菌胁迫下烟叶中超氧化物岐化酶(superoxide dismutase， SOD)、过氧化物酶(peroxidase， POD)、多酚氧化酶(polyphenol oxidase， PPO)、苯丙氨酸解氨酶(phenylalanin ammonialyase， PAL)活性、丙二醛(malondialdehyde， MDA)含量的变化以及病程相关蛋白基因PR-1B和PR2表达量的变化。结果表明，印度梨形孢能够促进‘云烟87’地上和地下部分生长，且青枯病胁迫下萎蔫症状不明显。在青枯病胁迫72 h内，接种印度梨形孢‘云烟87’叶片中SOD、POD、PPO和PAL活性均高于对照烟株，随时间延长两者呈现先升高后降低的趋势。而接种印度梨形孢‘云烟87’叶片中MDA含量低于对照烟株，两者表现出先降低后升高再降低的变化趋势。随着处理时间的延长，‘云烟87’叶片中病程相关蛋白基因PR-1B和PR2都呈现先上调后下调的变化趋势，但接种印度梨形孢的‘云烟87’叶片中两个基因表达量均高于对照烟株。研究结果表明印度梨形孢可以诱导‘云烟87’对青枯病的抗性。

关键词： ‘云烟87’ 印度梨形孢青枯病抗性机理

青枯病易感和钝感桑树品种根际土壤真菌群落结构比较

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广西植物 2022年第12期42卷 2099-2108页

作者：肖健黄小丹杨尚东屈达才广西大学农学院植物科学国家级实验教学示范中心南宁530004

为研究青枯病易感和钝感桑树品种植株根际土壤真菌群落组成,该研究以ITS1F和ITS2R为引物,基于高通量测序技术对桑树青枯病易感品种(台湾长果桑,SM)和桑树青枯病钝感品种(桂桑12号,IM)植株根际土壤真菌群落结构进行分析。结果表明:(1)两... 详细信息

为研究青枯病易感和钝感桑树品种植株根际土壤真菌群落组成,该研究以ITS1F和ITS2R为引物,基于高通量测序技术对桑树青枯病易感品种(台湾长果桑,SM)和桑树青枯病钝感品种(桂桑12号,IM)植株根际土壤真菌群落结构进行分析。结果表明:(1)两个品种间指示真菌丰富度的ACE、Chao1指数及表征多样性的Shannon指数无显著差异,门分类水平,被孢霉门(Mortierellomycota)和球囊菌门(Glomeromycota)是青枯病钝感桑树品种植株根际土壤中特有的优势真菌门;而属分类水平,Apiotrichum、地丝菌属(Geotrichum)、足放线病菌属(Scedosporium)和腐质霉属(Humicola)等是青枯病易感桑树品种植株根际土壤中富集的特有优势真菌属。(2)青枯病易感桑树品种植株根际土壤中,缺失了被孢霉门、球囊菌门真菌,以及被孢霉属(Mortierella)、镰刀菌属(Fusarium)、曲霉菌属(Aspergillus)和毛壳菌属(Chaetomium)等具有生防功能的优势真菌门属,可能是其易感青枯病的重要原因。(3)根据真菌群落对同类环境资源的利用途径进行功能预测发现,青枯病易感桑树品种根际土壤中,富集了相对较多的病理营养型和腐生营养型真菌;而青枯病钝感桑树品种根际土壤中,富集了相对丰富的共生营养型真菌。(4)特有真菌数量更为丰富的土壤真菌OTU分类水平,可能是青枯病钝感桑树品种田间表现出更强抗性的重要原因。可见,在青枯病钝感桑树品种植株根际土壤中,富集的被孢霉属、镰刀菌属、曲霉菌属和毛壳菌属等优势特异真菌属,具有作为拮抗桑树青枯病备选菌属的潜力。

关键词：青枯病桑树根际土壤真菌群落结构高通量测序

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抗辣椒青枯病的糖类筛选及抗性机制研究

南方农业学报 2024年

作者：高于岚高连宝傅慧珍汪志伟成善汉朱国鹏于文进海南大学三亚南繁研究院海南大学热带农林学院/海南省热带园艺作物品质调控重点实验室广西大学农学院

【目的】筛选对辣椒青枯病具有抗性的糖，并初步探究其抗性机理，以期为辣椒青枯病的防治提供一种经济有效、绿色的方法和思路。【方法】以蔗糖、麦芽糖、L-阿拉伯糖、D-乳糖、D-棉子糖、D-果糖、D-半乳糖、D-葡萄糖、D-核糖和D-木糖为... 详细信息

【目的】筛选对辣椒青枯病具有抗性的糖，并初步探究其抗性机理，以期为辣椒青枯病的防治提供一种经济有效、绿色的方法和思路。【方法】以蔗糖、麦芽糖、L-阿拉伯糖、D-乳糖、D-棉子糖、D-果糖、D-半乳糖、D-葡萄糖、D-核糖和D-木糖为研究对象，采用青枯菌对糖的同化作用和苗期抗性评价方法筛选出对辣椒青枯病防治效果最佳的糖。进一步通过抗菌活性、致病性和趋化性试验研究抗性最佳的糖与青枯菌的相互作用；以及在糖处理下接种青枯菌后的第2、4、6和8 d，测定辣椒茎部过氧化物酶（POD）、苯丙氨酸解氨酶（PAL）和多酚氧化酶（PPO）的活性。【结果】青枯菌RS03对L-阿拉伯糖、D-乳糖和D-棉子糖的同化程度低；幼苗抗性试验表明L-阿拉伯糖和D-棉子糖显著降低辣椒的发病率；盆栽试验获得L-阿拉伯糖显著降低了辣椒青枯病的发病程度，防治效果达90.67%。糖与菌的互作结果表明L-阿拉伯糖对青枯菌无抑菌作用和无致病性影响，且青枯菌对L-阿拉伯糖无趋化性作用。进一步的酶活性检测表明，L-阿拉伯糖处理能够提高辣椒茎部POD、PAL和PPO活性：POD和PPO活性均随时间呈缓慢增长趋势，在接菌8 d后达峰值，分别为571.11和125.33 U/g，分别增加101.68%和138.89%；而PAL活性则先升高后降低再升高，活性最高为24.13 U/g，显著增加238.44%。【结论】L-阿拉伯糖抗辣椒青枯病最佳，L-阿拉伯糖处理可能通过提高辣椒防御相关酶活性进而提高了对青枯病的抗性，L-阿拉伯糖可作为一种环保、经济有效的抗病试剂防治辣椒青枯病。

关键词：糖辣椒青枯病筛选防御酶活

青枯病发生的土壤影响因素及防治措施研究进展

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江苏农业科学 2023年第9期51卷 25-33页

作者：李海鹏曹启民黄月华孙晓东孙楚涵海南大学生态与环境学院海南海口570228 海南省农业科学院农业环境与土壤研究所海南海口571100 海南省农林环境过程与生态调控重点实验室海南海口570228 海南省农业科学院蔬菜研究所海南海口571100

青枯雷尔氏菌(Ralstonia solanacearum)侵染植物所引起的青枯病是对全球农作生产活动危害最为严重的土传病害之一,青枯病对农作物危害极大,影响深远;青枯雷尔氏菌在土壤中存活时间长,可以在植物根系中定殖,通过阻断植物维管系统水分运... 详细信息

青枯雷尔氏菌(Ralstonia solanacearum)侵染植物所引起的青枯病是对全球农作生产活动危害最为严重的土传病害之一,青枯病对农作物危害极大,影响深远;青枯雷尔氏菌在土壤中存活时间长,可以在植物根系中定殖,通过阻断植物维管系统水分运输致使植株枯萎,其对世界农业造成的威胁无法忽视。国内外对青枯雷尔氏菌及青枯病的研究重点集中在土壤对青枯病发生的影响以及青枯病的防控措施,本文将青枯病发生受土壤影响的因素进行系统的梳理,土壤矿质营养物质、理化特性、根系分泌物、微生物多样性及酶活性是对青枯雷尔氏菌侵染植物(作物)有重大影响的关键因素;本文同时也结合土壤影响青枯病发生的因素阐述了国内外对青枯病的防控措施,主要包括农业防治、化学防治与生物防治;在可持续农业发展进程中,可再生的生物炭被广泛用于土壤改良材料,笔者对近年国内外生物炭防治青枯病的相关研究进行整理,大量研究表明,生物炭能够对青枯病起到较理想的防控效果。目前,土壤对青枯病的防御还需要营养元素、植物激素、微生物菌剂等外源干扰,但时至今日青枯病仍长期威胁着农业生产活动。笔者展望了未来土壤与青枯雷尔氏菌互作、青枯病的研究与发展方向,也为科学防控植物(作物)青枯病并建立相关理论体系与策略方针提供一定参考。

关键词：青枯雷尔氏菌青枯病影响因素防控措施生物炭

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厌氧消毒对植烟土壤特性及烤烟产质量的影响

广东农业科学 2023年第8期50卷 75-84页

作者：陈桢卢志伟黄瑞寅贺广生王维广东省烟草专卖局(公司) 广东广州510610 贵州中烟工业有限责任公司贵州贵阳550004 广东中烟原料供应中心广东广州511356 华南农业大学农学院广东广州510642

【目的】使用有效无污染的土壤厌氧消毒技术,探究配施不同有机物料对烟田土壤特性、烤烟主要土传病害及其产质量的影响。【方法】采用大田试验,在广东大埔和南雄2个种植烟区,以不添加有机物料为对照(CK),设置米糠(MK)、木屑(MX)、米糠... 详细信息

【目的】使用有效无污染的土壤厌氧消毒技术,探究配施不同有机物料对烟田土壤特性、烤烟主要土传病害及其产质量的影响。【方法】采用大田试验,在广东大埔和南雄2个种植烟区,以不添加有机物料为对照(CK),设置米糠(MK)、木屑(MX)、米糠与木屑等量混合(KX)3个处理组进行土壤厌氧消毒(ASD)处理,分析不同处理间烟田土壤特性、烤烟主要病害及其经济性状。【结果】添加有机物料的ASD处理较CK能显著提高2个产区的土壤pH值、土壤酶活性和养分含量,降低土壤EC值。大埔产区土壤有机质、全氮、速效氮、速效磷、速效钾含量,较CK分别提升29.0%~40.6%、7.0%~24.2%、18.0%~24.4%、25.9%~43.0%、37.5%~81.7%,烤烟青枯病和黑胫病的发病率比CK减少5.8~17.3和7.5~15.8个百分点,病情指数较CK分别下降34.7%~69.0%和30.4%~68.9%;南雄产区土壤有机质、全氮、速效氮、速效磷、速效钾含量,较CK分别提升0.1%~35.2%、55.8%~89.4%、19.7%~30.0%、22.2%~27.5%、34.0%~76.3%,烤烟青枯病和黑胫病的发病率比CK减少5.6~12.6和11.7~18.0个百分点,病情指数较CK分别下降16.1%~63.7%和43.4%~64.3%。大埔、南雄2产区烤烟平均产值较CK至少增加1949.25元/hm^(2),中上等烟比例比CK分别增加1.2~4.2、0.7~2.9个百分点。冗余分析发现,大埔烤烟青枯病、黑胫病发病率受蔗糖酶活性影响较大,南雄烤烟青枯病、黑胫病发病率受脲酶影响较大。【结论】在烟草连作频繁、土传病害发生严重地块添加MK(施用量10 t/hm^(2))进行ASD处理,可有效改良烟田土壤特性,提高烤烟产质量。

关键词：烤烟土壤厌氧消毒技术土壤质量青枯病黑胫病

不同调酸处理对土壤细菌群落结构及雪茄烟株青枯病发生的影响

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烟草科技 2023年第7期56卷 25-31页

作者：左梅向必坤沈始权王瑞谭绍安谭军湖北省烟草公司恩施州公司湖北省445000 福建中烟工业有限责任公司厦门市361021

为探索改善连作烟田土壤酸化现象的最佳措施,降低烟草青枯病发病率,选择常年种植雪茄烟、土壤酸化现象严重且青枯病频发的烟田为试验地,分析增施石灰、油菜还田及增施石灰+油菜还田3种调酸处理对土壤化学性状、细菌群落结构及雪茄烟株... 详细信息

为探索改善连作烟田土壤酸化现象的最佳措施,降低烟草青枯病发病率,选择常年种植雪茄烟、土壤酸化现象严重且青枯病频发的烟田为试验地,分析增施石灰、油菜还田及增施石灰+油菜还田3种调酸处理对土壤化学性状、细菌群落结构及雪茄烟株青枯病发生的影响。研究结果表明,增施石灰处理能显著提升土壤pH,改善土壤酸化现象,而油菜还田处理可显著增加土壤速效钾含量。相比对照,增施石灰处理土壤的碱解氮、速效钾、有机质含量分别增加17.04%、17.65%、21.74%,油菜还田处理分别增加1.42%、27.38%、23.73%,增施石灰+油菜还田处理分别增加26.79%、47.66%、49.10%。16S rDNA扩增子测序结果表明,对酸化植烟土壤增施石灰能显著增加细菌群落的整体相对丰度。其中,有益菌属芽单胞菌属(Gemmatimonas)的相对丰度相比对照提高124.84%。此外,增施石灰+油菜还田处理能显著提高可降解环境有害物质的细菌—鞘氨醇单胞菌属(Sphingomonas)的相对丰度,降低致病菌青枯雷尔氏菌属(Ralstonia)的相对丰度。移栽后90 d时增施石灰、油菜还田及增施石灰+油菜还田处理相比对照青枯病发病率分别降低37.11%、15.45%、46.01%。

关键词：植烟土壤增施石灰油菜还田酸化细菌群落雪茄烟青枯病

茄子青枯病抗性相关的E3泛素连接酶基因的筛选及鉴定

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园艺学报 2023年第10期50卷 2271-2287页

作者：王亦栖颜爽爽余炳伟甘雨薇邱正坤朱张生陈长明曹必好华南农业大学园艺学院农业农村部华南地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室广东省蔬菜工程技术研究中心广州510642

茄子在生产中易受青枯病侵袭。为挖掘茄子青枯病抗性基因,前期以茄子高抗青枯病自交系和感病自交系为试材进行转录组分析,获得4个与调控青枯病抗性相关的E3泛素连接酶基因,分别命名为SmSP1、SmSPL2、SmDDA1a1和SmDDA1a2。序列分析发现,4... 详细信息

茄子在生产中易受青枯病侵袭。为挖掘茄子青枯病抗性基因,前期以茄子高抗青枯病自交系和感病自交系为试材进行转录组分析,获得4个与调控青枯病抗性相关的E3泛素连接酶基因,分别命名为SmSP1、SmSPL2、SmDDA1a1和SmDDA1a2。序列分析发现,4个E3连接酶的结构域在7个物种中较为保守,SmSP1及SmSPL2属RING型E3连接酶,SmDDA1a1和SmDDA1a2属CRLDDB型E3的底物受体。亚细胞定位表明,除SmDDA1a2定位于细胞核,SmSP1、SmSPL2和SmDDA1a1定位于细胞核及其他细胞部位。4个基因在茄子抗感材料的根、茎及叶中均有表达,叶中最高。青枯菌及外源激素可诱导4个基因的表达,且在抗性材料中的表达量高于感病材料。水杨酸可诱导SmSP1的表达,茉莉酸甲酯可诱导SmSPL2、SmDDA1a1和SmDDA1a2的表达,乙烯利可诱导4个基因的表达。VIGS基因沉默结果显示,在抗性材料中沉默SmSP1和SmDDA1a2后,导致植株青枯病抗性下降,沉默SmSPL2和SmDDA1a1后,对植株青枯菌抗性没有影响。以上结果表明,SmSP1和SmDDA1a2可能参与茄子青枯病抗性的调控。

关键词：茄子青枯病 E3泛素连接酶表达分析功能鉴定

强还原土壤灭菌对烟草种植前后土壤化学性质及微生物群落结构的影响

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烟草科技 2022年第4期55卷 9-19页

作者：滕凯张清壮彭镜先陈前锋田明慧巢进李鑫湖南省烟草公司湘西自治州公司湖南省湘西土家族苗族自治州吉首市416000 湖南省农业科学院长沙市410128 湖南省蔬菜研究所长沙市410128

强还原土壤灭菌(RSD)是一种环境友好型且能够有效缓解土壤连作障碍的技术。为了揭示RSD技术对植烟土壤品质及微生物群落结构的影响,在连作障碍严重的植烟土壤中加入有机物料豆渣,淹水覆膜后进行RSD处理,并比较植烟前后RSD处理土壤的理... 详细信息

强还原土壤灭菌(RSD)是一种环境友好型且能够有效缓解土壤连作障碍的技术。为了揭示RSD技术对植烟土壤品质及微生物群落结构的影响,在连作障碍严重的植烟土壤中加入有机物料豆渣,淹水覆膜后进行RSD处理,并比较植烟前后RSD处理土壤的理化性质和微生物群落的变化,同时评估RSD处理对烟草植株生长势和抗病效果的影响。结果表明,植烟前RSD处理能显著提高土壤pH、NH_(4)^(+)-N和有效磷含量(质量分数);植烟后RSD处理的土壤有效磷、速效钾和NH_(4)^(+)-N含量显著高于未处理土壤(CK1)和仅淹水覆膜处理土壤(CK2)。微生物群落分析结果显示,RSD处理可显著增加Flavisolibacter属、芽胞杆菌属(Bacillus)、粪球菌属(Coprococcus)、柄孢壳菌属(Podospora)及被孢霉属(Mortierella)的相对丰度,降低镰刀菌属(Fusarium)、丝核菌属(Rhizoctonia)和原隐球菌属(Saitozyma)的相对丰度,尤其能显著降低青枯病致病菌属(Ralstonia)的相对丰度。与CK1和CK2相比,RSD处理土壤烟株农艺性状(株高、有效叶片数和最大叶面积)得到一定程度的改善,烟草青枯病发病率分别降低59.00%和49.58%。因此,RSD处理土壤能显著改善土壤微生物群落结构,有利于土壤养分提高和烟株生长发育。

关键词：强还原土壤灭菌烟草青枯病群落结构