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生物工程学报 1990年第2期6卷 162-166页

作者：朱棣刘延清金奇刘汉明中国预防医学科学院流行病学微生物学研究所中国预防医学科学院病毒学研究所

霍乱弧菌是引起霍乱的病源菌。霍乱弧菌产生的分泌性毒素CT是致病的主要物质之一。CT是多聚蛋白体,由A、B两个亚单位组成,A亚单位是毒性部分。

关键词：霍乱霍乱肠毒素基因克隆 A2-B亚单位核苷酸

霍乱肠毒素A和B亚单位对人和小鼠NK细胞杀伤靶细胞的影响

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现代免疫学 1991年第4期23卷 204-205,203页

作者：陈哲生孙明杰首都医学院微生物学免疫学教研室北京100054

大量研究资料证实,自然杀伤细胞(NK细胞)具有非特异地杀伤肿瘤细胞的作用;并有较广的抗瘤谱,能杀伤同系、同种或异种的肿瘤细胞,对淋巴瘤和白血病的瘤细胞杀伤能力最强。但对实体瘤的瘤细胞作用较差,甚至无杀伤作用。NK细胞杀伤靶细胞... 详细信息

大量研究资料证实,自然杀伤细胞(NK细胞)具有非特异地杀伤肿瘤细胞的作用;并有较广的抗瘤谱,能杀伤同系、同种或异种的肿瘤细胞,对淋巴瘤和白血病的瘤细胞杀伤能力最强。但对实体瘤的瘤细胞作用较差,甚至无杀伤作用。NK细胞杀伤靶细胞是先与靶细胞接触、融合,然后释放细胞溶素(cytolysin),也称穿孔素(PFP)或NK毒性因子(NKCF),发挥杀伤作用。

关键词：霍乱肠毒素亚单位靶细胞瘤细胞杀伤作用实体瘤自然杀伤细胞杀伤能力抑制作用穿孔素

霍乱肠毒素基因分子佐剂DNA疫苗构建的实验研究

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霍乱肠毒素基因分子佐剂DNA疫苗构建的实验研究

作者：张莉四川大学

学位级别：硕士

霍乱是世界七大流行病之一，为我国甲类法定传染病，它是由霍乱弧菌引起的一种烈性肠道传染病，具有发病急、传播快、波及面广的特点，危害极其严重。自1817年以来，已发生过7次世界大流行。霍乱肠毒素(Cholera enterotoxin，CT)是引起... 详细信息

霍乱是世界七大流行病之一，为我国甲类法定传染病，它是由霍乱弧菌引起的一种烈性肠道传染病，具有发病急、传播快、波及面广的特点，危害极其严重。自1817年以来，已发生过7次世界大流行。霍乱肠毒素(Cholera enterotoxin，CT)是引起霍乱的主要致病因子，由一个A亚单位(CTA)和5个相同的B亚单位(CTB)组成。它是一种很强的免疫原和粘膜免疫佐剂，可用于研制粘膜疫苗。由于CT佐剂活性的作用机制一直没被真正阐明，在某种程度上妨碍了对它的应用。目前，对CT亚单位蛋白CTB及其编码基因ctxB作为粘膜佐剂的研究较多，对其亚单位蛋白CTA和CT全毒素作为佐剂的研究较少，将ctxA基因、ctxB基因和ctxA、ctxB的融合基因ctxAB作为佐剂分子，同时比较三者在动物体内的佐剂活性研究还尚未见报道。本研究选择霍乱弧菌肠毒素(ctx)基因为研究对象，首次利用重叠PCR将ctxA基因和ctxB基因融合为ctxAB融合基因，同时构建了ctxA、ctxB和ctxAB三种分子佐剂DAN疫苗，为探讨ctxAB融合基因与ctxA基因、ctxB基因的佐剂活性及其作为佐剂分子的应用价值奠定了基础。首先，从GenBank上获取霍乱弧菌569B的肠毒素基因序列，利用

关键词：霍乱肠毒素分子佐剂DNA疫苗 ctxA基因 ctxB基因 ctxAB融合基因

编码霍乱肠毒素B亚单位基因植物表达载体的构建

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第一军医大学学报 2002年第8期22卷 736-738页

作者：彭志强俞守义余迪求贺竹梅第一军医大学流行病学教研室广东广州510515 中山大学生物工程研究中心广东广州510275

目的构建含霍乱肠毒素B亚单位(CTB)基因的植物双元表达载体。方法采用高保真PCR方法调出CTB基因,定向克隆到中间载体pRTL2,经测序证实核酸序列正确后,再亚克隆到含植物双元表达载体pBI121上;采用电击法,将含CTB的植物表达载体转入根癌... 详细信息

目的构建含霍乱肠毒素B亚单位(CTB)基因的植物双元表达载体。方法采用高保真PCR方法调出CTB基因,定向克隆到中间载体pRTL2,经测序证实核酸序列正确后,再亚克隆到含植物双元表达载体pBI121上;采用电击法,将含CTB的植物表达载体转入根癌农杆菌中,并进行酶切证实。结果PCR扩增的CTB片断亚克隆到中间载体,得到pRCTB和pRCTBK,测序证实CTB核酸序列正确;再与根癌农杆菌双元载体pBI121连接,获得含CTB基因的植物双元表达载体pBI-CTB和pBI-CTBK,转入根癌农杆菌的载体,酶切证实正确。结论采用正确技术路线,构建了含CTB基因的植物表达载体,为下一步的转基因植物表达研究打下了坚实的基础。

关键词：霍乱肠毒素亚克隆多聚酶链式反应植物表达载体

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霍乱肠毒素分离方法的改进

赣南医学院学报 1990年第1期10卷 1-5页

作者：童竞亚刘琥琥严宜明赣南医学院免疫学研究室

用作者改进的液体培养基在5%CO_2环境中培养霍乱弧菌(Inaba 569B),每ml培养滤液可获得霍乱肠毒素(CT)1.215～2.012μg。在分离提纯CT时,先用DEAE-Sephadex A_(50)除去大部分色素及杂蛋白,再用Sephacryl S_(-200)分纯,效果好,重复性强;... 详细信息

用作者改进的液体培养基在5%CO_2环境中培养霍乱弧菌(Inaba 569B),每ml培养滤液可获得霍乱肠毒素(CT)1.215～2.012μg。在分离提纯CT时,先用DEAE-Sephadex A_(50)除去大部分色素及杂蛋白,再用Sephacryl S_(-200)分纯,效果好,重复性强;其第Ⅰ组分即为CT,肠襻试验阳性,双向琼脂扩散试验及HPLC检测结果均与上海CT一致。分子量为86000。

关键词：霍乱肠毒素分离增养基

霍乱肠毒素A2亚单位15肽（10—24）的合成及其有关生物活性初步测定

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微生物学报 1985年第2期 146-152页

作者：袁佩娜 A.Dodin G.LeThuillier 卫生部药品生物制品检定所法国巴斯德研究院霍乱弧菌实验室

本文根据Merrifield固相方法,人工合成了霍乱肠毒素A2亚单位第10—24位氨基酸序列。合成中采用树脂-氯甲烷为载体,双环己基碳化二亚胺（D.C.C.I）作为连结剂。最终合成产物经过高压液相氨基酸分析证实:含有A2亚单位第10—24位十五个氨... 详细信息

本文根据Merrifield固相方法,人工合成了霍乱肠毒素A2亚单位第10—24位氨基酸序列。合成中采用树脂-氯甲烷为载体,双环己基碳化二亚胺（D.C.C.I）作为连结剂。最终合成产物经过高压液相氨基酸分析证实:含有A2亚单位第10—24位十五个氨基酸组成成分,经初步活性测定证实有抗原性;能激发家兔产生特异性抗体,在琼脂双扩散试验中能产生抗原抗体特异性沉淀反应。它不具有改变血管通透性的毒性活力,小鼠皮肤反应阴性。肠袢结扎试验显示:不引起肠液贮留;当与B亚单位结合后,在肠内可抑制霍乱毒素的作用。

关键词：霍乱肠毒素 A亚单位、B亚单位氨基酸序列抗原性

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工程菌产霍乱肠毒素B亚单位的纯化

生物化学杂志 1990年第1期6卷 27-31页

作者：熊凌霜马清钧张艳红军事医学科学院生物工程研究所

本实验室使霍乱肠毒素(CT)B亚单位基因在大肠杆菌中获得表达,并能分泌到胞外。将该菌株培养物上清经过超滤浓缩后,用偶联上霍乱毒素IgG的CNBr-Sepharose 4B进行亲和层析,得到表达产物霍乱毒素B亚单位纯蛋白。经PA-GE、HPLC及琼脂免疫扩... 详细信息

本实验室使霍乱肠毒素(CT)B亚单位基因在大肠杆菌中获得表达,并能分泌到胞外。将该菌株培养物上清经过超滤浓缩后,用偶联上霍乱毒素IgG的CNBr-Sepharose 4B进行亲和层析,得到表达产物霍乱毒素B亚单位纯蛋白。经PA-GE、HPLC及琼脂免疫扩散等方法鉴定证明该蛋白与天然霍乱肠毒素B亚单位完全相同。

关键词：霍乱肠毒素蛋白纯化亲和层析

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霍乱肠毒素研究进展

国外医学.生物制品分册 1983年第2期 68-70页

作者： Craig JP

美国纽约州立大学Down State医学中心微生物学和免疫学系John ***教授和日本大阪大学微生物疾病研究所细菌和血清学系竹田美文副教授于1982年6月应邀来我国讲学。现将他们在卫生部上海生物制品研究所所作的学术报告内容整理报道如下。

关键词：霍乱肠毒素小鼠小家鼠逗点弧菌弧菌属霍乱弧菌霍乱菌素霍乱毒素疫苗菌苗

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霍乱肠毒素的提取与纯化

微生物学通报 1985年第2期 94-96页

作者：杨正时卫生部药品生物制品检定所

霍乱是由于霍乱弧菌分泌一种类似酶样的肠毒素作用于小肠上皮而引起的局部细胞代谢紊乱的急性肠遗传染病。霍乱肠毒素的概念是自Koch氏发现霍乱弧菌一百年来的一个重大进展。近年国内一些单位已开展提取工作,所化人力物力甚大,经常一无... 详细信息

霍乱是由于霍乱弧菌分泌一种类似酶样的肠毒素作用于小肠上皮而引起的局部细胞代谢紊乱的急性肠遗传染病。霍乱肠毒素的概念是自Koch氏发现霍乱弧菌一百年来的一个重大进展。近年国内一些单位已开展提取工作,所化人力物力甚大,经常一无所获,或产毒很低,在毒素的鉴定与纯化上均存在一定的困难。本文介绍国外霍乱肠毒素的提取与纯化的研究进展。一、肠毒素的发现和早期研究

关键词：霍乱原缓冲液 NH 层析霍乱弧菌色层分析逗点弧菌弧菌属霍乱肠毒素杀弧菌抗体

霍乱肠毒素抗血清中和大肠杆菌热敏肠毒素的试验

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中国预防兽医学报 1983年第3期 17-18页

作者：林植富徐伟民张中秋樊玉珍北京市畜牧兽医研究所

前言肠致病性大肠杆菌可产生热敏肠毒素(LT)和耐热肠毒素(ST)。LT的分子结构、免疫学及生物学的性状与霍乱肠毒素极为相似。Evans等报导,肠致病性大肠杆菌尚可产生一种血管渗透因子(简称PF),它和LT一样不耐热,但给兔皮肤注射后,能引起... 详细信息

前言肠致病性大肠杆菌可产生热敏肠毒素(LT)和耐热肠毒素(ST)。LT的分子结构、免疫学及生物学的性状与霍乱肠毒素极为相似。Evans等报导,肠致病性大肠杆菌尚可产生一种血管渗透因子(简称PF),它和LT一样不耐热,但给兔皮肤注射后,能引起毛细血管通透性增强,导致注射部位

关键词：霍乱肠毒素热敏肠毒素致病性稀释度抗血清大肠杆菌大肠埃希氏菌埃希氏杆菌属