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中国生物制品学杂志 2016年第5期29卷 458-462,468页

作者：贾岚傅婷陶薇何卓晶洪艳浙江省医学科学院生物工程研究所浙江杭州310013

目的研究霍乱病毒b亚单位(cholera toxin subunit b,CTb)作为基因佐剂对单纯疱疹病毒2型(herpes simplex virus type 2,HSV-2)DNA疫苗pg D免疫效果的影响。方法将CTb片段克隆至真核表达质粒pc DNA3Kan(p Kan)中,构建基因佐剂pc DNA3Kan-CTb(p CTb)。将bALb/c小鼠随机分为p CTb无疫苗组、pg D/p CTb佐剂组、pg D/p Kan空载体组及PbS对照组,经后腿肌肉多点注射,共免疫3次,每次间隔2周。于末次免疫2周后,经小鼠眼球采血,分离血清,ELISA法检测HSV-2特异性Ig G水平及Ig G1、Ig G2a亚型抗体滴度;制备小鼠脾细胞,MTS法检测小鼠脾脏T细胞增殖能力;将病毒稀释后经腹腔接种小鼠,于免疫2周后,进行HSV-2致死剂量攻毒试验。结果p CTb经双酶切及测序鉴定证明构建正确;pg D/p CTb佐剂组小鼠血清中HSV-2特异性Ig G水平明显高于其他3组(Pb佐剂组小鼠脾细胞在HSV-2刺激下诱导的特异性T细胞增殖反应明显强于PbS对照组及pg D/p Kan空载体组(Pb佐剂组小鼠存活率高达100%。结论 p CTb作为基因佐剂能够显著提高pg D诱导小鼠产生抗原特异性Ig G抗体水平,增强HSV-2特异性T细胞增殖反应,并介导以细胞免疫为主的Th1/Th2混合型免疫反应。

关键词：霍乱病毒b亚单位单纯疱疹病毒2型(HSV-2) DNA疫苗基因佐剂

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