检索结果-南通市图书馆

雪峰虫草不同提取部位对诱导NB4和U937细胞凋亡的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中成药 2021年第8期43卷 2169-2173页

作者：蔡媛杜青谢芳一张水寒湖南省中医药研究院中药研究所湖南长沙410006

目的探讨雪峰虫草不同提取部位对诱导NB4和U937细胞凋亡的影响机制。方法将对数期2种细胞随机分为正常组、DMSO组、水提取物组、乙酸乙酯提取物组和醇提取物组,采用流式细胞仪检测雪峰虫草不同提取物诱导NB4、U937细胞凋亡作用,采用West... 详细信息

目的探讨雪峰虫草不同提取部位对诱导NB4和U937细胞凋亡的影响机制。方法将对数期2种细胞随机分为正常组、DMSO组、水提取物组、乙酸乙酯提取物组和醇提取物组,采用流式细胞仪检测雪峰虫草不同提取物诱导NB4、U937细胞凋亡作用,采用Western blot法检测NB4、U937细胞内Bcl⁃2、Cyt C、Bax、caspase⁃9蛋白表达。结果正常组与DMSO组无统计学差异(P>0.05),与DMSO组比较,水提取物组、乙酸乙酯提取物组和醇提取物组NB4、U937细胞凋亡增加(P雪峰虫草不同提取物皆能诱导NB4、U937细胞凋亡,且乙酸乙酯提取物效果最佳,其作用机制可能与线粒体凋亡途径中细胞内Bax/Bcl⁃2蛋白表达比例失调,胞质中Cyt C分泌增多,caspase⁃9蛋白表达增加有关。

关键词：雪峰虫草 NB4 U937 细胞凋亡

雪峰虫草对DC-CIK增殖及HepG-2细胞杀伤作用的实验研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国免疫学杂志 2015年第2期31卷 189-192页

作者：郑兵谢芳一蔡国辉朱如彩李柯高守泉谭电波郝晓勇秦裕辉湖南省中医药研究院中药研究所长沙410013 长沙厚益深泰医药科技有限公司长沙410013

目的:研究雪峰虫草对DC-CIK细胞增殖及肝癌Hep G-2细胞杀伤作用。方法:常规分离健康人外周血单个核细胞并诱导生成DC细胞和CIK细胞,将DC细胞与CIK细胞按1∶5共培养7 d后给药组加入不同浓度的雪峰虫草水提取物,第10天观察形态并计数各组D... 详细信息

目的:研究雪峰虫草对DC-CIK细胞增殖及肝癌Hep G-2细胞杀伤作用。方法:常规分离健康人外周血单个核细胞并诱导生成DC细胞和CIK细胞,将DC细胞与CIK细胞按1∶5共培养7 d后给药组加入不同浓度的雪峰虫草水提取物,第10天观察形态并计数各组DC-CIK细胞;收集培养第10天的DC-CIK细胞作为效应细胞,对数生长期Hep G-2肝癌细胞作为靶细胞,使Hep G-2∶DC-CIK靶效比为1∶5,cck-8法检测DC-CIK对Hep G-2的杀伤率。结果:雪峰虫草水提物组对DC-CIK有显著的促增长作用,其作用的最佳浓度为0.1 mg/ml。雪峰虫草诱导的DC-CIK细胞对肝癌Hep G-2细胞的杀伤作用优于常规方法培养的DC-CIK细胞;常规方法培养的DC-CIK细胞加雪峰虫草与常规方法培养的DC-CIK细胞对肝癌Hep G-2细胞的杀伤作用无显著性差异,雪峰虫草体外直接杀伤肝癌Hep G-2细胞的作用不明显。结论:雪峰虫草通过促进DC-CIK细胞增殖而增强其杀伤肝癌Hep G-2细胞的作用。

关键词：雪峰虫草树突细胞杀伤细胞 Hep G-2细胞

高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱分析雪峰虫草化学成分

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中草药 2015年第6期46卷 817-821页

作者：张水寒蔡萍陈林梁雪娟秦优朱如彩黄惠勇湖南省中医药研究院中药研究所湖南长沙410013 湖南省2011数字中医药协同创新中心湖南长沙410013

目的采用高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱法(HPLC-Q-TOF-MS/MS)对雪峰虫草醇提取物的主要化学成分进行分析鉴定。方法超声法制备雪峰虫草醇提取物,月旭AQ-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)反相HPLC梯度洗脱法分离各主要成分;电喷雾电离... 详细信息

目的采用高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱法(HPLC-Q-TOF-MS/MS)对雪峰虫草醇提取物的主要化学成分进行分析鉴定。方法超声法制备雪峰虫草醇提取物,月旭AQ-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)反相HPLC梯度洗脱法分离各主要成分;电喷雾电离源正离子模式和负离子模式对色谱流出物进行检测,四级杆飞行时间串联质谱法对各主要色谱峰进行归属。结果通过二级高分辨质谱分析结合对照品数据及相关文献,共鉴定28个化合物的结构,其主要化学成分为甘露醇、腺苷、麦角甾醇、谷甾醇、氨基酸、脂肪酸、糖类等成分。结论 HPLC-Q-TOF-MS/MS可从保留时间、紫外吸收光谱、精确相对分子质量、分子式和二级结构碎片等方面对雪峰虫草的主要成分进行定性分析,为寻找虫草中活性物质提供一种快速准确的分析方法。

关键词：雪峰虫草高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱定性分析腺苷麦角甾醇氨基酸

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

雪峰虫草生活史研究

雪峰虫草生活史研究

作者：伍陵湖南师范大学

学位级别：硕士

雪峰虫草Ophiocordyceps xuefengensis ***是近年来发现的虫草新种,是雪峰虫草菌与疖蝙蛾幼虫的复合体,研究发现雪峰虫草与冬虫夏草亲缘关系最为接近。目前,对于雪峰虫草的研究,已有其显微特征和化学成分方面的报道,但关于其人工培育及... 详细信息

雪峰虫草Ophiocordyceps xuefengensis ***是近年来发现的虫草新种,是雪峰虫草菌与疖蝙蛾幼虫的复合体,研究发现雪峰虫草与冬虫夏草亲缘关系最为接近。目前,对于雪峰虫草的研究,已有其显微特征和化学成分方面的报道,但关于其人工培育及生活史的报道尚未出现。本文首次对雪峰虫草的生活史进行了较为系统的研究,主要内容及结果如下:1.雪峰虫草的人工培育优化雪峰虫草的培育条件,观察各个阶段的生长状况,同时收集孢子进行萌发实验。结果表明:菌丝初期呈白色,细绒毛状,成熟后呈淡锈色;成熟的菌丝互相扭结,形成小原基,小原基逐渐膨大,分化为无性子座,子座顶端呈白色,中下部呈淡锈色;继续培育,无性子座逐渐增大,顶端仍呈白色,中下部呈深锈色;分生孢子可萌发,形成菌丝体。2.雪峰虫草不同发育时期形态解剖学观察取不同发育时期的雪峰虫草,制作临时装片,用刚果红溶液染色,结果表明:a.菌丝有隔膜,分支。b.菌丝间有“H”型融合现象。c.分生孢子梗单生,不分支或分支。d.无性子座可以分为皮层和髓部。取无性子座,冷冻干燥、喷金后通过透射电镜观察,结果表明:无性子座表面密布着无性孢子,孢子呈卵圆形或圆形,大小为(3.2～5.0)um×(2.1～3.3)um,且表面光滑,每个产孢细胞均只产生一个分生孢子。子座的皮层与髓质都是由菌丝细胞构成,皮层细胞较小且排列紧密,髓质细胞之间有明显的间隙。用荧光染料DAPI分别对成熟菌丝、无性子座表面菌丝和分生孢子染色,荧光显微镜观察,结果表明:不同生长阶段的菌丝细胞粗细长短不等,但隔膜清晰可见。成熟菌丝细胞和无性子座表面菌丝细胞均存在单核、双核现象,但分生孢子为单核。***分子标记在雪峰虫草生活史研究中的应用本实验通过构建雪峰虫草的基因组文库,以基因组文库为模板设计了30对引物,用同一引物对对不同菌株中进行扩增,序列比对、分析,比较不同菌株或样品基因型的差异。在雪峰虫草中,鉴定出36个SNPs位点,SNP发生率为0.129%。通过分析基因序列和图谱,证实雪峰虫草的菌丝体及无性子座均是同核体,成熟子座中具有子囊壳的部位是异核体。4.雪峰虫草交配型基因MAT1-1-1与MAT1-2-1的检测基于冬虫夏草交配型基因MAT1-1-1与MAT1-2-1的保守序列分别设计特异性引物,对不同雪峰虫草样本进行扩增,经检测、分析发现:雪峰虫草的僵虫体、子座(未具有子囊壳)、分离菌株均只含单一交配型基因MAT1-1-1或MAT1-2-1,而在子座的成熟部位(具有子囊壳)同时具有有MAT1-1-1和MAT1-2-1两种交配型基因。从多种样本检测结果表明:雪峰虫草是以异宗配合的方式进行有性生殖。综上所述,我们推测雪峰虫草的生活史为:在野外环境中,雪峰虫草菌的孢子侵染疖蝙蛾幼虫,在虫体内孢子萌发长出菌丝。当菌丝生长到一定阶段,扭结形成僵硬的菌核。在一定环境条件下,只含单一交配型基因的同核体菌丝可形成无性子座,并产生分生孢子。当无性子座发育成熟,在子座表面接受与其交配型基因互补配对的孢子,发生质配和核配从而进行雪峰虫草的有性生殖。

关键词：雪峰虫草同核体异核体交配型基因生活史

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

液态发酵法合成雪峰虫草活性成分的初步研究

中国药房 2017年第22期28卷 3079-3083页

作者：刘莎张小娟王炜陈林廖彦鲁耀邦唐映红崔培梧湖南中医药大学药学院长沙410208 湖南中医药大学中药药性与药效实验室长沙410208 湖南中医药大学中药民族药物创新与发展实验室长沙410208

目的:探索液态发酵法合成雪峰虫草活性物质的基础工艺,为雪峰虫草资源的综合开发提供必要技术支持。方法:利用液态发酵技术对雪峰虫草菌丝体进行培养,并通过培养基组成和培养条件控制来实现活性物质的高效合成。以雪峰虫草菌为出发菌株... 详细信息

目的:探索液态发酵法合成雪峰虫草活性物质的基础工艺,为雪峰虫草资源的综合开发提供必要技术支持。方法:利用液态发酵技术对雪峰虫草菌丝体进行培养,并通过培养基组成和培养条件控制来实现活性物质的高效合成。以雪峰虫草菌为出发菌株,分别考察不同碳源(蔗糖、葡萄糖和可溶性淀粉)、不同氮源(蛋白胨、酵母浸粉、酵母浸膏、硝酸钠、硝酸钾和尿素)、不同维生素B(维生素B1和复合维生素B)和不同初始p H(p H为4、5、6、7、8、9)对雪峰虫草菌丝生长和胞外多糖、胞内多糖、虫草酸、胞内三萜合成的影响,进而筛选最佳培养基成分。结果:最佳碳源为蔗糖,最佳氮源为酵母浸粉,最佳维生素B为维生素B1,最佳初始p H为8。在碳源为蔗糖、氮源为酵母浸粉、添加0.1 g/L维生素B1和初始p H为8时可得到较高的生物量和代谢产物积累水平。结论:雪峰虫草可在液态发酵体系高效积累代谢产物;可通过发酵过程优化控制,实现该菌株细胞生长和活性代谢产物合成的优化。

关键词：雪峰虫草活性成分液态发酵生物合成

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

雪峰虫草子座不同生长发育时期的转录组研究

中国现代中药 2023年第3期25卷 523-532页

作者：钟灿金剑刘浩谢景刘平安张水寒湖南省中医药研究院中药研究所湖南长沙410013 道地药材国家重点实验室北京100700

目的:挖掘调控雪峰虫草生长发育的相关通路和基因,揭示其子座生长发育的内在分子机制。方法:采用转录组测序技术(RNA-Seq)对雪峰虫草子座菌丝体(MD1)、子座原基(PD2)和子座(SD3)生长发育3个不同阶段进行测序;数据通过非冗余蛋白(NR)、Sw... 详细信息

目的:挖掘调控雪峰虫草生长发育的相关通路和基因,揭示其子座生长发育的内在分子机制。方法:采用转录组测序技术(RNA-Seq)对雪峰虫草子座菌丝体(MD1)、子座原基(PD2)和子座(SD3)生长发育3个不同阶段进行测序;数据通过非冗余蛋白(NR)、Swiss-Prot、Pfam、京都基因与基因组百科全书(KEGG)、真核生物相邻类的聚簇(KOG)、基因本体(GO)数据库进行功能注释。利用EdgeR软件进行差异表达基因分析,挖掘调控雪峰虫草子座生长发育的相关通路和基因。结果:测序结果显示,MD1、PD2、SD3分别获得了8.15、7.51、6.87GB分析数据,拼接分析数据共获得34218个转录本,平均长度为5502bp,组装及去冗余后获得10511条unigenes,平均长度为2470bp。KOG功能注释和GO富集分析显示,细胞和细胞组分、新陈代谢过程、信号转导及碳代谢是雪峰虫草子座发育过程中的关键基因类别。对子座不同生长发育时期的基因进行差异表达分析发现,PD2和SD3相比差异表达基因最多,其中上调基因1073个,下调基因1036个,MD1和SD3相比差异表达基因最少,上调基因533个,下调基因578个。差异表达基因的KEGG通路富集结果显示,细胞外信号调节激酶(MAPK)信号通路是参与调节雪峰虫草子座生长发育的关键信号通路。结论:Ste2和Gpd1及其所在途径可能分别调控雪峰虫草子座原基的形成和子座的生长。

关键词：雪峰虫草人工培育丝状真菌

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

雪峰虫草高效液相色谱指纹图谱研究

湖南中医药大学学报 2016年第2期36卷 47-50页

作者：秦优陈林梁雪娟糜亚男肖娟张水寒湖南中医药大学湖南长沙410208 湖南省中医药研究院中药研究所湖南长沙410013 湖南省2011数字中医药协同创新中心湖南长沙410208

目的建立雪峰虫草药材的高效液相色谱指纹图谱,为评价其质量提供依据。方法采用高效液相色谱法,色谱柱为月旭AQ-C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm);检测波长260 nm;以甲醇-0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱;体积流量0.5 mL/min;柱温30℃;... 详细信息

目的建立雪峰虫草药材的高效液相色谱指纹图谱,为评价其质量提供依据。方法采用高效液相色谱法,色谱柱为月旭AQ-C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm);检测波长260 nm;以甲醇-0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱;体积流量0.5 mL/min;柱温30℃;进样量20μL。结果建立了11批雪峰虫草药材高效液相色谱指纹图谱,确定共有峰15个,采用对照品结合HPLC-Q-TOF-MS/MS技术对7个特征峰进行了指认,并采用相似度分析、主成分分析、聚类分析的方法对指纹图谱进行了分析。结论建立的雪峰虫草高效液相指纹图谱方法简便、可靠且重复性好,为雪峰虫草的质量控制提供了有效的手段。

关键词：雪峰虫草高效液相色谱指纹图谱质量控制聚类分析度相似度分析

雪峰虫草乙酸乙酯及石油醚部位的GC-MS分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

湖南中医药大学学报 2017年第11期37卷 1209-1213页

作者：宛玉祥陈林唐雪阳沈冰冰黄惠勇张水寒湖南省中医药研究院湖南长沙410013 湖南省中药原料质量监测技术服务中心湖南长沙410013 湖南中医药大学湖南长沙410208 湖南省2011数字中医药协同创新中心湖南长沙410208

目的利用GC-MS分析技术鉴定雪峰虫草中的挥发性成分。方法采用Rxi-5MS(30 m×0.25 mm,0.25μm)弹性石英毛细管柱;以高纯He气(纯度99.999%)为载气,进行程序升温;质谱定性以EI电离方式采集数据;根据NIST质谱数据库推测雪峰虫草的物质成分... 详细信息

目的利用GC-MS分析技术鉴定雪峰虫草中的挥发性成分。方法采用Rxi-5MS(30 m×0.25 mm,0.25μm)弹性石英毛细管柱;以高纯He气(纯度99.999%)为载气,进行程序升温;质谱定性以EI电离方式采集数据;根据NIST质谱数据库推测雪峰虫草的物质成分。结果分别从雪峰虫草的石油醚部位中鉴定了44个化合物;从雪峰虫草的乙酸乙酯部位中鉴定了28个化合物。两部位的主要化合物类型为酸类、酯类以及甾醇类,石油醚和乙酸乙酯部位的相对含量分别占78.5%和77.36%。结论首次采用GC-MS方法对雪峰虫草两部位的挥发性成分进行对比分析,以期为雪峰虫草的物质基础研究提供参考。

关键词： GC-MS 雪峰虫草甾醇类化合物

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

雪峰虫草补肾壮阳及抗疲劳作用的研究

湖南中医杂志 2017年第7期33卷 164-166页

作者：谢芳一郑兵蔡媛高守泉李心亮肖梅英熊宇杰湖南省中医药研究院中药研究所湖南长沙410013 湖南省中医药研究院湖南长沙410006

目的:探讨雪峰虫草在补肾助阳及抗疲劳方面的作用。方法:通过建立雄性去势大鼠模型和氢化可的松致小鼠肾阳虚模型,观察雪峰虫草对去势大鼠的附性器官、性激素水平的影响及抗疲劳作用。结果:雪峰虫草小、中、高剂量组能显著缩短大鼠阴茎... 详细信息

目的:探讨雪峰虫草在补肾助阳及抗疲劳方面的作用。方法:通过建立雄性去势大鼠模型和氢化可的松致小鼠肾阳虚模型,观察雪峰虫草对去势大鼠的附性器官、性激素水平的影响及抗疲劳作用。结果:雪峰虫草小、中、高剂量组能显著缩短大鼠阴茎勃起时间,增加大鼠包皮腺指数、精囊腺+前列腺指数;能显著增加肾阳虚小鼠自主活动次数、负重游泳时间,并且雪峰虫草中、高剂量组能显著增加小鼠实验后体质量,与模型对照组比较,差异均有统计学意义(P雪峰虫草具有较好的补肾助阳和抗疲劳作用。

关键词：雪峰虫草补肾助阳抗疲劳实验研究