检索结果-南通市图书馆

钙调素mRNA和蛋白在水稻花药和雌蕊发育过程中的原位定位

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Acta Botanica Sinica 1998年第12期40卷 1087-1092页

作者：陈绍荣韩红梅吕应堂杨弘远武汉大学生命科学学院植物生殖生物学研究室

利用ＲＮＡ原位杂交和免疫组织化学定位技术分别检测了钙调素ｍＲＮＡ和钙调素蛋白在水稻（ＯｒｙｚａｓａｔｉｖａＬ．）花药和雌蕊发育过程中的时空分布特征。钙调素基因在绒毡层、柱头、花粉管生长途径、退化助细胞以及维管薄壁细胞... 详细信息

利用ＲＮＡ原位杂交和免疫组织化学定位技术分别检测了钙调素ｍＲＮＡ和钙调素蛋白在水稻（ＯｒｙｚａｓａｔｉｖａＬ．）花药和雌蕊发育过程中的时空分布特征。钙调素基因在绒毡层、柱头、花粉管生长途径、退化助细胞以及维管薄壁细胞中大量表达，也可在小孢子母细胞、小孢子、花粉、反足细胞、卵细胞以及中央细胞中检测到。钙调素基因的表达强度随不同的发育阶段而变化：花药发育早期表达强，以后逐渐减弱并向特定部位集中，如绒毡层和花粉萌发孔等。胚胎发育早期，钙调素基因在胚乳细胞中的表达比原胚中强，而后期则在分化胚中比胚乳细胞中强。推测在有性生殖过程中，钙调素可能通过Ｃａ２＋ＣａＭ信号途径调节小孢子发育、花粉萌发、花粉管生长。

关键词：水稻花药雌蕊钙调素原位定位

油茶自交、异交雌蕊脯氨酸含量及相关基因克隆表达分析

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植物生理学报 2020年第3期56卷 520-528页

作者：周俊琴渠心静卢梦琪余姝姝刘懿瑶杨进谭晓风中南林业科技大学经济林培育与保护教育部重点实验室长沙410004

为研究脯氨酸在油茶(Camellia oleifera)授粉受精过程中的生理作用及相关基因的表达状况,本研究以油茶‘华鑫’为材料,通过反转录PCR (RT-PCR)方法分别克隆出油茶脯氨酸合成途径相关的2个关键基因,即Δ1-吡咯啉-5-羧酸合成酶(P5CS)基因... 详细信息

为研究脯氨酸在油茶(Camellia oleifera)授粉受精过程中的生理作用及相关基因的表达状况,本研究以油茶‘华鑫’为材料,通过反转录PCR (RT-PCR)方法分别克隆出油茶脯氨酸合成途径相关的2个关键基因,即Δ1-吡咯啉-5-羧酸合成酶(P5CS)基因和Δ1-吡咯啉-5-羧酸还原酶(P5CR)基因,以及脯氨酸分解途径相关的2个关键基因,即脯氨酸脱氢酶(ProDH)基因和Δ1-吡咯啉-5-羧酸脱氢酶(P5CDH)基因。克隆的4个基因分别被命名为Co P5CS、Co P5CR、Co Pro DH和Co P5CDH,基因编码区长度分别为2 154、834、1 656和1 473 bp,分别编码538、277、511和490个氨基酸。进化树分析表明, 4个蛋白彼此间的同源性较低,而与茶树(C. sinensis)对应蛋白亲缘关系最近。实时荧光定量PCR结果表明:CoP5CS和CoP5CR在自异交2~96 h期间表达趋势基本一致,在授粉后36h达到最高值,自交授粉表达量明显高于异交授粉;CoP5CDH和CoProDH在授粉后0~36 h期间呈现明显下降的趋势,在36~60 h期间表达量基本没有变化,授粉后60 h有明显上升的趋势。自异交雌蕊游离脯氨酸的含量都在授粉后36 h达到最高值,自交雌蕊脯氨酸含量是异交的1.56倍,表明脯氨酸可能参与了油茶自交花粉管死亡的过程。该研究结果不仅为油茶自交不亲和机制提供新的参考材料,还拟为提高油茶坐果率提供理论支撑。

关键词：油茶自交不亲和脯氨酸雌蕊杂交

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水稻雌蕊与胚囊中钙的超微细胞化学定位

Acta Botanica Sinica 1999年第2期41卷 125-129页

作者：余凡立赵洁梁世平杨弘远武汉大学生命科学学院植物生殖生生物学研究室武汉430072 武汉大学生命科学学院植物生殖生物学研究室武汉430072 武汉大学生命科学院植物生殖生物学研究室武汉430072

用焦锑酸盐沉淀法对水稻（OryzasativaL．）授粉前后雌蕊和胚囊中的钙进行了超微细胞化学定位。结果表明，柱头乳突细胞表面和花柱薄壁细胞中均含钙沉淀；开花前1d，整个胚囊中含钙较少，两个助细胞中钙分布无差异；临近开花时，1个助... 详细信息

用焦锑酸盐沉淀法对水稻（OryzasativaL．）授粉前后雌蕊和胚囊中的钙进行了超微细胞化学定位。结果表明，柱头乳突细胞表面和花柱薄壁细胞中均含钙沉淀；开花前1d，整个胚囊中含钙较少，两个助细胞中钙分布无差异；临近开花时，1个助细胞已退化，其钙含量明显增加；开花后6h，胚囊已受精，退化助细胞中钙含量进一步增加;受精前卵细胞中钙主要分布在液泡中，核和胞质中较少；受精后，其钙含量明显增加，主要分布于核中。重点讨论了钙与助细胞退化和卵细胞激活的关系。

关键词：水稻钙化学定位雌蕊助细胞卵细胞

RALFs调控植物花粉与雌蕊间互作的分子机制

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植物生理学报 2021年第8期57卷 1633-1637页

作者：王显亚余坤江王天娅晏伟 Aimal Nawaz KHATTAK 赵海菲田恩堂贵州大学农学院贵阳550025

开花植物受精作用是植物界有性生殖的最进化、最高级的形式,是植物遗传和育种学的重要理论依据。RALFs(rapid alkalinization factors)类蛋白是一类小的、富含色氨酸的多肽,该类蛋白可调控植物花粉与雌蕊间互作,保障受精过程的顺利进行... 详细信息

开花植物受精作用是植物界有性生殖的最进化、最高级的形式,是植物遗传和育种学的重要理论依据。RALFs(rapid alkalinization factors)类蛋白是一类小的、富含色氨酸的多肽,该类蛋白可调控植物花粉与雌蕊间互作,保障受精过程的顺利进行。本文围绕RALFs类蛋白综述了植物受精过程遗传调控的最新研究进展,同时也展望了目前存在的问题及未来的研究方向,可为未来开花植物受精过程调控网络的研究及遗传改良提供参考。

关键词： RALFs 花粉管发育受精花粉雌蕊

质谱蛋白质组学研究中草莓雌蕊蛋白提取方法优化

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浙江农业学报 2020年第12期32卷 2186-2191页

作者：裘劼人柴伟国童建新周历萍王淑珍杭州市农业科学研究院浙江杭州310024

为筛选适用于质谱蛋白质组学研究的草莓雌蕊蛋白提取方法,通过在传统酚提法中加入氯仿提取步骤建立了一种新的酚氯仿提取方法,并对三氯乙酸/丙酮沉淀法(方法Ⅰ)、酚提法(方法Ⅱ)和酚氯仿法(方法Ⅲ)提取草莓雌蕊蛋白的3种方法的适用性进... 详细信息

为筛选适用于质谱蛋白质组学研究的草莓雌蕊蛋白提取方法,通过在传统酚提法中加入氯仿提取步骤建立了一种新的酚氯仿提取方法,并对三氯乙酸/丙酮沉淀法(方法Ⅰ)、酚提法(方法Ⅱ)和酚氯仿法(方法Ⅲ)提取草莓雌蕊蛋白的3种方法的适用性进行了评估。总蛋白提取得率、总蛋白鉴定通量、非共有蛋白亚细胞位置和亲疏水性分布4个方面的分析结果表明,酚氯仿法的蛋白提取效率最高,蛋白提取最全面。方法Ⅰ、方法Ⅱ、方法Ⅲ的蛋白提取得率分别为0.20%、0.12%和0.27%,总蛋白鉴定量分别为5170、5345和5697。韦恩图分析显示,方法Ⅲ交集到了方法Ⅰ和方法Ⅱ的大部分非共有蛋白。亚细胞定位分析显示,方法Ⅰ和方法Ⅲ的非共有蛋白主要分布在细胞核中,而方法Ⅱ则主要分布在细胞质中,表明3种方法具有不同的亚细胞偏好性。亲疏水性分析显示,方法Ⅰ亲水性蛋白比例最高但疏水性蛋白提取不足,方法Ⅱ则亲水性蛋白提取较少,方法Ⅲ兼顾了亲疏水性蛋白的提取。试验结果表明,3种方法中方法Ⅲ为草莓雌蕊的最优提取方法。

关键词：草莓雌蕊蛋白质组学提取方法

两种非标记定量技术在筛选草莓雌蕊发育差异表达蛋白中的应用与比较

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农业生物技术学报 2020年第8期28卷 1331-1342页

作者：裘劼人柴伟国周历萍王淑珍杭州市农业科学研究院生物技术研究所

研究雌蕊发育进程对育种具有重要意义。蛋白质组学技术是强有力的系统生物学研究工具,目前草莓(Fragaria ananassa)雌蕊发育方面的蛋白质组学研究尚未见报道。为筛选适宜草莓雌蕊大规模蛋白质组学分析的方法,本研究采用数据依赖性采集(d... 详细信息

研究雌蕊发育进程对育种具有重要意义。蛋白质组学技术是强有力的系统生物学研究工具,目前草莓(Fragaria ananassa)雌蕊发育方面的蛋白质组学研究尚未见报道。为筛选适宜草莓雌蕊大规模蛋白质组学分析的方法,本研究采用数据依赖性采集(data-dependent acquisition, DDA)和非数据依赖性采集(data-independent acquisition, DIA)技术对小蕾期、初绽期和盛开期3个发育时期的草莓雌蕊进行非标记定量蛋白质组研究。从蛋白鉴定量、肽段离子峰强变异系数(coefficient of variation, CV)和数据缺失率3个方面评估两种技术的优劣。结果表明,DIA数据的覆盖度、重现性和准确度均高于DDA。DDA共鉴定到3 687个蛋白质,而DIA鉴定到5 341个蛋白质;DDA的3个时期肽段离子峰强平均CV值分别为28.4%、33.3%和28.4%,而DIA仅为10.4%、10.9%和11.9%;DDA的3个时期组内数据缺失率分别为12.4%、13.0%、13.9%,而DIA为2.7%、2.2%、3.4%。对DIA筛选到的差异表达蛋白(differentially expressed proteins, DEPs)进行基因本体(Gene Ontology, GO)功能注释,小蕾期和初绽期的DEPs主要注释到有丝分裂、甲基化和次生代谢物合成等过程;而初绽期和盛开期的DEPs则注释到能量代谢、光合作用和初级代谢等过程;KEGG富集分析显示,过氧化物酶4 (peroxidase 4, POD4)等多个过氧化物酶参与了木质素合成,其表达量随花的发育进程而上升。对甲基化相关蛋白进一步分析,挖掘到开花调控相关的精氨酸N-甲基转移酶5 (protein arginine methyltransferase 5, PRMT5)、转座子沉默相关的DNA (胞嘧啶5)-甲基转移酶3 (DNA (cytosine 5)-methyltransferase 3, CMT3)和香气物质合成相关的苔黑酚O-甲基转移酶(orcinol O-methyltransferase, OOMT)等多个具有重要生理功能的蛋白质。并且PRMT5、CMT3和POD4等重要蛋白质仅在DIA数据鉴定到,进一步证明了DIA相对DDA的优越性。本研究发现DIA为草莓雌蕊大规模蛋白质组学分析的较优方法,并初步探索了小蕾期、初绽期和盛开期3个发育时期的雌蕊蛋白表达水平变化,可为草莓雌蕊发育进程的机理研究提供基础资料。

关键词：草莓雌蕊蛋白质组学数据依赖性采集(DDA) 非数据依赖性采集(DIA) 过氧化物酶甲基转移酶

陆地棉雌蕊的花粉管生长途径中钙分布的超微细胞化学定位

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Acta Botanica Sinica 1997年第2期39卷 121-125页

作者：张劲松杨弘远朱绫童华武汉大学生命科学学院植物生殖生物学研究室武汉430072 武汉大学分析测试中心武汉430072

用焦锑酸盐沉淀法对陆地棉(Gossypium hirsutum L.)授粉前后的柱头、花柱、珠孔与珠心组织中的钙进行了超微细胞化学定位。X射线波谱与能谱分析证明所定位的沉淀确系焦锑酸钙。观察结果表明:在整个花粉管生长途径中的雌蕊组织,钙分布均... 详细信息

用焦锑酸盐沉淀法对陆地棉(Gossypium hirsutum L.)授粉前后的柱头、花柱、珠孔与珠心组织中的钙进行了超微细胞化学定位。X射线波谱与能谱分析证明所定位的沉淀确系焦锑酸钙。观察结果表明:在整个花粉管生长途径中的雌蕊组织,钙分布均较其它相邻组织密集;钙主要分布在细胞壁与胞间基质等质外体系统中。在雌蕊中生长的花粉管,其尖端细胞器区也有丰富的钙。

关键词：棉花陆地棉雌蕊花粉管钙超微细胞化学定位

磷酸化酶mRNA在水稻雌蕊中表达的时空动态

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遗传 1999年第3期21卷 31-33页

作者：陈绍荣吕应堂杨弘远武汉大学生命科学学院植物生殖生物学研究室

利用ＲＮＡ原位杂交技术，对水稻受精前后雌蕊组织切片进行磷酸化酶基因表达的定位。结果显示，磷酸化酶ｍＲＮＡ在柱头、花柱、子房壁以及维管束中大量表达，而胚珠中除合点部位外表达很弱。受精前后的胚囊中各细胞磷酸化酶ｍＲＮＡ表... 详细信息

利用ＲＮＡ原位杂交技术，对水稻受精前后雌蕊组织切片进行磷酸化酶基因表达的定位。结果显示，磷酸化酶ｍＲＮＡ在柱头、花柱、子房壁以及维管束中大量表达，而胚珠中除合点部位外表达很弱。受精前后的胚囊中各细胞磷酸化酶ｍＲＮＡ表达也很弱，并且没有明显的时空变化。在积累淀粉的胚乳细胞中磷酸化酶ｍＲＮＡ大量分布。原胚中的磷酸化酶ｍＲＮＡ表达较弱，到分化胚积累过渡性淀粉时才显著增加。本文首次对磷酸化酶ｍＲＮＡ在植物雌性器官发育过程中的时空分布动态作了初步研究。

关键词：磷酸化酶 mRNA 水稻雌蕊 RNA 原位杂交

低温对仁用杏雌蕊抗坏血酸—谷胱甘肽循环的影响

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园艺学报 2013年第3期40卷 417-425页

作者：王萍李彦慧张雪梅李保国姚飞飞河北农业大学林学院河北保定071000 河北农业大学园林与旅游学院河北保定071000 河北旅游职业学院园艺系河北承德067000

利用人工智能模拟霜箱,设8个温度(18、–1、–2、–3、–4、–5、–6、–7℃),对抗寒性不同的两个仁用杏(Prunus armeniaca Linn.)品种雌蕊的过氧化氢(H2O2)含量和抗坏血酸—谷胱甘肽(AsA-GSH)循环进行了研究。结果表明,低温胁迫增加了... 详细信息

利用人工智能模拟霜箱,设8个温度(18、–1、–2、–3、–4、–5、–6、–7℃),对抗寒性不同的两个仁用杏(Prunus armeniaca Linn.)品种雌蕊的过氧化氢(H2O2)含量和抗坏血酸—谷胱甘肽(AsA-GSH)循环进行了研究。结果表明,低温胁迫增加了仁用杏雌蕊H2O2含量,–7℃时抗晚霜品种‘围选1号’和晚霜敏感品种‘龙王帽’分别为对照(18℃)的5.49倍和7.22倍。低温期间,‘围选1号’雌蕊AsA等酶含量及APX等酶活性均高于‘龙王帽’,–7℃时,‘围选1号’雌蕊AsA、MDHA、DHA、GSH和GSSG含量比对照分别下降了66%、69%、48%、52%、53%,‘龙王帽’下降了78%、79%、59%、66%、65%,–7℃时,‘围选1号’雌蕊APX、MDHAR、DHAR、GPX、GR活性、AsA/DHA、GSH/GSSG分别是对照的2.87倍、1.07倍、1.42倍、1.60倍、1.20倍、65%和1.03倍,‘龙王帽’是对照2.41倍、96%、1.13倍、1.08倍、98%、54%、97%。结果表明‘围选1号’雌蕊在低温期间有较高的AsA-GSH循环效率,可有效抑制H2O2的积累,这可能是其抗晚霜能力较强的重要原因之一。

关键词：仁用杏雌蕊低温胁迫 AsA-GSH循环