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上海海洋大学学报 2018年第1期27卷 29-36页

作者：宋露露王晓杰宋佳坤上海海洋大学海洋生物系统与神经科学研究所上海201306 上海海洋大学水产科学国家级实验教学示范中心上海201306 上海海洋大学海洋生物科学国际联合研究中心中国科技部上海201306 上海海洋大学水产种质资源发掘与利用教育部重点实验室上海201306

以海水青鳉作为研究对象,研究海洋酸化对其性别分化的影响。将刚受精的受精卵置于对照组(CO_2浓度为480×10^(-6))和2个处理组(CO_2浓度分别为1 000×10^(-6)和2 000×10^(-6))的水体中,直到孵化出膜。将出膜后仔鱼饲养在对照组水体中... 详细信息

以海水青鳉作为研究对象,研究海洋酸化对其性别分化的影响。将刚受精的受精卵置于对照组(CO_2浓度为480×10^(-6))和2个处理组(CO_2浓度分别为1 000×10^(-6)和2 000×10^(-6))的水体中,直到孵化出膜。将出膜后仔鱼饲养在对照组水体中至性成熟,然后通过形态学、组织学和遗传学方法,对每一尾实验鱼进行表现型和基因型的性别鉴定。经形态学判断,发现酸化处理组的雄雌比例显著高于对照组(P雄性的个体,即性逆转雄性,性逆转率分别为38.4%和47.5%。

关键词：海洋酸化性别分化胚胎发育雄雌比例性逆转

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海洋酸化对海洋青鳉鱼性腺分化的影响

海洋酸化对海洋青鳉鱼性腺分化的影响

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作者：宋露露上海海洋大学

学位级别：硕士

工业革命之后,来自于化石燃料的燃烧和人类活动的影响,大气中CO浓度不断增加。其中排放到大气中的24%到35%的CO被海洋吸收,是引起海水酸度增加和碳酸盐平衡体系改变的主要原因,当前表层海水的pH已经比工业革命时期降低了0.1个单位。到2... 详细信息

工业革命之后,来自于化石燃料的燃烧和人类活动的影响,大气中CO浓度不断增加。其中排放到大气中的24%到35%的CO被海洋吸收,是引起海水酸度增加和碳酸盐平衡体系改变的主要原因,当前表层海水的pH已经比工业革命时期降低了0.1个单位。到2100年大气CO的浓度升高至800000μL/L(μtam)。科学家们已经意识到过量排放CO正在改变海洋生物赖以生存的水环境,随着海洋中溶解的CO日益增多,海水化学环境的改变,生活在广阔无边的海洋中的生物也是深受其害,很可能会对海洋生物生长发育有影响,甚至影响鱼类繁殖后代。因此开展对海水中CO溶量对鱼类影响研究具有重要意义。海洋青鳉鱼(Oryzias melastigma)隶属于脊索动物门(Chordata)脊椎动物亚门(Vertebrate)辐鳍亚纲鳉形目(Cypernodontiformes)青鳉属(Oryzias)。海水青鳉鱼与日本青鳉鱼的发育上很是接近,当前日本青鳉鱼的解剖和生理方面的研究已经比较完善和系统,这便为海洋青鳉鱼的对应研究提供了便利,同时也使海洋青鳉鱼成为海水生态毒理学研究的模式生物。海洋青鳉鱼个头较小容易在实验室条件下进行大规模饲养。雌雄第二性征明显,性别差异可通过臀鳍的形态不同进行快速的辨别;且雌鱼产卵量大,世代周期短;鱼卵的体积较大,颜色透明且不易破损,发育各阶段变化明显,极易进行各种实验室观察和操作。本文主要研究海洋酸化对青鳉鱼性腺发育及性别分化的影响。首先通过爆CO模拟海洋酸化水环境处理成年青鳉鱼,观察酸化对其受精率的影响,并通过免疫组化和WB的方法观察酸化对成年青鳉鱼脑部c-fos蛋白的表达区域和表达量的影响。其次研究酸化对受精卵胚胎发育以及性腺发育的影响。最后,我们通过H.E.切片染色观察海洋青鳉鱼性腺发育阶段。对成年海洋青鳉鱼生存环境中通入CO发现c-fos蛋白在海洋青鳉鱼的大部分脑区,尤其端脑,视顶盖和延脑三个脑区内均能检测到。通入CO处理和对照组的对比结果,可以初步得出结论,CO对青鳉鱼脑中的c-fos表达具有一定的影响,使得c-fos的表达水平上调,并在不同的脑区存在差异,由于端脑有接收嗅觉刺激的功能,在通入CO水中的化学平衡发生改变,免疫图片实验中发现通入CO后会引起端脑区域的蛋白发生变化,即通入CO后青鳉鱼的嗅觉能够感受到海水酸碱平衡发生了变化,从而使得在端脑区域有c-fos蛋白的表达;视叶位于间脑后方,是鱼类的视觉中枢,并综合各部分感觉的高级中枢,具有维持鱼体平衡、协调和节制肌肉张力等作用,影响鱼类游泳速度。通入CO后,观察视顶盖中c-fos蛋白的生成部位和含量变化。发现通入CO后在视顶盖边缘位置的c-fos蛋白含量比对照组中多,这与现代研究海洋中溶解过多的CO后降低幼鱼的趋光性的研究相吻合;延脑位于脑的最后部,背面覆盖后脉络丛,其下方为第四脑室,脑室与脊髓内的中央管相同。延脑前部两侧有耳状突,为听囊和侧线的感觉中枢。延脑是多种生理机能以及感觉和呼吸的中枢,还是调节色素细胞作用的中枢。通入CO后观察到延脑中央有较多的c-fos蛋白表达,较对照组有明显的不同。延脑中出现较多的c-fos蛋白,即青鳉鱼的多种生理机能、感觉或者呼吸中枢等多种活动受到了CO的影响。本实验中主要是通过观察CO对海洋青鳉鱼受精的过程研究,观察到受精卵的受精率确实降低,故而推测CO可能影响了青鳉鱼的产卵和受精的活动,造成受精率发生改变。在青鳉鱼卵发育过程中通入CO,统计海洋青鳉鱼卵的出膜率,发现海洋青鳉鱼卵的出膜率和孵化时间以及性别比例都会受到酸化的影响,从出膜率的表格中我们能够得到爆CO浓度为1000ppm时,生存水环境中CO浓度出现线性趋势,受精率在1000ppm时要比现阶段空气中CO浓度的受精率要低,但是比通CO浓度为2000ppm时也要低。同时,在通CO浓度为1000ppm时,出膜率却远远高于对照组,待其浓度继续增加时,其出膜率反而降低。从而推测:低浓度CO很可能是作为一种外界刺激,致使孵化中的幼鱼对这个水环境的刺激发生了应激反应;而应激反应促进了青鳉鱼卵孵化出膜速度上升,并且缩短了孵化时间。但是外界环境CO浓度过高时,对孵化中的幼鱼会是一种危害的信号,致使幼鱼开始自我保护躲避外界的危险信号,延长孵化时间。但是当幼鱼长时间在鱼卵膜内不出膜,往往卵黄中的营养物质消耗殆尽之后仍未出膜,造成由孵化时间过长而出现的死卵情况。将经不同CO浓度处理的青鳉幼鱼饲养至性成熟后,与未经酸化处理的对照组统计比较其性别比例。通过形态学和分子学水平观察其第二性征和基因性别,发现:1)在体视显微镜下观察,雄性臀鳍要比雌性臀鳍大,背鳍也是雄性相对雌性大。雌性亲鱼的肛乳头要明显大于雄性,并且雌雄肛乳头外周包裹着一层脂肪层,而雄性个体肛乳头外周并未有脂肪层包裹。2)通过分子水平基因检测出:当CO浓度为1

关键词：海水青鳉鱼性腺分化胚胎发育海洋酸化雄雌比例性逆转

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提高雌龟产卵量九法

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闽东农业科技 2000年第2期 46-46,37页

作者：蒋张林浙江海宁市袁花镇龙头阁动物养殖场314416

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怎么样使雌龟多产卵

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饲料与畜牧（新饲料） 2004年第1期 33-33页

作者：李秋菊四川省蓬安县

雌龟产卵多与否，直接关系到养龟的经济效益。笔者通过近几年的养龟实践，现将提高雌龟产卵量的粗浅体会归纳如下，供广大养龟读者参考。

关键词：雌龟产卵经济效益池塘水质调节雄雌比例产卵场营养补给光照

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鹌鹑的人工孵化与饲养管理

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养殖技术顾问 2010年第12期 41-41页

作者：张秀峰黑龙江省鹤岗市动物卫生监督所 154100

1人工孵化要选择优质抗病力强的鹌鹑留种,母鹌鹑应挑选腹腔容积大、产蛋力强,公鹑应选体型较大、爪必须完全伸开、有利交配繁殖的留种。雄雌比例应为1：2或1：3,种蛋应选颜色鲜艳、斑点明显的。人工孵化种类多,有缸孵法、桶孵法、平箱... 详细信息

1人工孵化要选择优质抗病力强的鹌鹑留种,母鹌鹑应挑选腹腔容积大、产蛋力强,公鹑应选体型较大、爪必须完全伸开、有利交配繁殖的留种。雄雌比例应为1：2或1：3,种蛋应选颜色鲜艳、斑点明显的。人工孵化种类多,有缸孵法、桶孵法、平箱或立箱孵化法等。桶孵法是将桶四周用纸糊几层,将炒热的稻谷装入麻袋内,作为热源。蛋也用麻袋装好,1层蛋1层稻谷,放入桶内。管理人员必须严格掌握孵化规律,才能获得高孵化率。

关键词：人工孵化饲养管理鹌鹑交配繁殖雄雌比例孵化规律管理人员抗病力

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