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诱导多能干细胞向雄性生殖细胞分化诱导物的研究进展

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中国生物工程杂志 2019年第4期39卷 94-100页

作者：李欣赵中利罗晓彤曹阳张立春于永生金海国吉林省农业科学院畜牧科学分院公主岭136100 延边大学农学院延吉133002

诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSCs)是利用细胞重编程技术人工获得的与胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESCs)功能类似的细胞,能分化成包括三胚层在内的所有细胞类型,并且规避了ESCs的伦理学争议和移植后的免疫排... 详细信息

诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSCs)是利用细胞重编程技术人工获得的与胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESCs)功能类似的细胞,能分化成包括三胚层在内的所有细胞类型,并且规避了ESCs的伦理学争议和移植后的免疫排斥问题,具有十分广阔的应用前景。对iPSCs体外诱导为生殖细胞所用的诱导物及其诱导效果进行了综述,生殖细胞发育机制的研究有望促进未来生殖和发育技术的进步。

关键词：诱导多能干细胞雄性生殖细胞分化诱导物

补骨脂素可能参与诱导大鼠间充质干细胞向雄性生殖细胞方向分化

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南方医科大学学报 2013年第12期33卷 1723-1726页

作者：万谦陆华邓延莉梁丽梅成都中医药大学第二临床医学院中西医生殖实验室四川成都610041 成都中医药大学四川省计划生育科学研究所四川成都610041 成都中医药大学第二附属医院四川成都610041 成都中医药大学临床医学院四川成都610041

目的验证补骨脂素能诱导大鼠间充质干细胞向雄性生殖细胞方向分化的假说。方法使用终浓度为3.0μg/ml的补骨脂素干预大鼠间充质干细胞,显微观察细胞形态变化情况,接着使用MTT法检测细胞增殖变化,最后使用实时荧光定量PCR(Qpcr)测定被干... 详细信息

目的验证补骨脂素能诱导大鼠间充质干细胞向雄性生殖细胞方向分化的假说。方法使用终浓度为3.0μg/ml的补骨脂素干预大鼠间充质干细胞,显微观察细胞形态变化情况,接着使用MTT法检测细胞增殖变化,最后使用实时荧光定量PCR(Qpcr)测定被干预细胞的七种代表性的生殖分化标记基因的表达变化,七种标记基因分别为:Oct-4、Stra8、RVLG、SCP3、TNP2、Itgb1、Itga6。结果显微观察表明3.0μg/ml的补骨脂素干预72 h后,大鼠间充质干细胞形态变化不显著;MTT法检测表明3.0μg/ml的补骨脂素干预的5 d中,大鼠间充质干细胞增殖情况变化不显著(P>0.05);Qpcr测定表明3.0μg/ml的补骨脂素干预72 h后,显著上调了Oct-4、Stra8、SCP3、Itgb1等基因的表达(P0.05)。结论补骨脂素可能参与诱导大鼠间充质干细胞向雄性生殖细胞方向的分化。

关键词：补骨脂素大鼠间充质干细胞雄性生殖细胞分化标记基因

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雄性生殖细胞暴露于三手烟后的代谢改变

雄性生殖细胞暴露于三手烟后的代谢改变

氧化应激介导的ATM/p53通路在MC-LR致雄性生殖细胞自噬中的作用及机制

中国毒理学会第七次全国毒理学大会暨第八届湖北科技论坛

作者：徐菠陈敏健姚梦梦嵇晓丽王心如夏彦恺南京医科大学公共卫生学院卫生毒理系现代毒理学教育部重点实验室生殖医学国家重点实验室毒理研究所

【目的】研究雄性生殖细胞系暴露于三手烟后的代谢改变。【材料和方法】三手烟样本的制作过程如下:将3M公司的色谱纸放入一个6立方米的不锈钢密闭室连续20天以上,总暴露时间为32小时,总烟雾接触量为545 mg。将富集三手烟的暴露纸称重并... 详细信息

【目的】研究雄性生殖细胞系暴露于三手烟后的代谢改变。【材料和方法】三手烟样本的制作过程如下:将3M公司的色谱纸放入一个6立方米的不锈钢密闭室连续20天以上,总暴露时间为32小时,总烟雾接触量为545 mg。将富集三手烟的暴露纸称重并切成小块,每0.15g纸加3ml无血清的培养基提取三手烟溶液。检测不同浓度的三手烟溶液染毒小鼠雄性生殖细胞系（小鼠精母细胞系、小鼠睾丸支持细胞）后的细胞活力,流式细胞仪检测细胞凋亡、细胞周期,高内涵分析系统检测三手烟染毒小鼠雄性生殖细胞系后的多参数细胞毒性;用荧光探针DCFH-DA进行活性氧检测;气相色谱法检测三手烟染毒小鼠雄性生殖细胞系后的代谢小分子物质的改变。逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测代谢小分子相关代谢酶的表达。【结果】不同浓度的三手烟溶液染毒小鼠雄性生殖细胞系后,发现50μg/ml的三手烟不影响细胞活力,此剂量的尼古丁、可替宁和NNK的含量分别为84.0μg/ml,7.3μg/ml和0.16μg/ml。三手烟（50μg/ml）染毒两种小鼠雄性生殖细胞系后,细胞周期、细胞凋亡和多参数细胞毒性都没有明显改。三手烟染毒小鼠精母细胞系后,正交偏最小二乘判别分析（OPLS-DA）显示染毒组与对照组能明显分开,谷胱甘肽（GSH）和甘氨酸的浓度在三手烟处理组显著高于对照组。流式细胞技术未观察到活性氧含量的改变。进一步探讨谷胱甘肽通路发现谷胱甘肽合成酶（GSS）的mRNA水平上升,γ-谷氨酰转移酶（GGT）的mRNA水平下降。三手烟染毒小鼠睾丸支持细胞系后,正交偏最小二乘判别分析（OPLS-DA）显示染毒组与对照组能明显分开,核酸代谢相关的小分子（尿嘧啶、胸腺嘧啶、脱氧胸苷一磷酸（DTMP）、丙二酸、亚精胺和腺苷）,氨代谢相关的小分子（羟胺和谷氨酰胺）发生改变。这些代谢通路相关的酶,如胸苷激酶（TK）,精胺合酶（SMS）,谷氨酸-氨连接酶酶（glnA）的mRNA水平都发生下降。【结论】低剂量、无细胞毒性的三手烟可以显著改变两种雄性生殖细胞系的代谢,提示三手烟对雄性生殖细胞系有潜在毒性。

关键词：三手烟雄性生殖细胞代谢组

来源： cnki会议评论

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氧化应激介导的ATM/p53通路在MC-LR致雄性生殖细胞自噬中的作用及...

作者：王蕊郑州大学

学位级别：硕士

目的微囊藻毒素-LR(microcystin-LR,MC-LR)是由蓝藻水华产生的一种人类致癌物质,威胁男性生殖系统健康。本研究旨在探究MC-LR对雄性生殖细胞DNA损伤和细胞自噬的影响及调控机制。通过分析氧化应激与DNA损伤之间的关系,并探讨DNA损伤后AT... 详细信息

目的微囊藻毒素-LR(microcystin-LR,MC-LR)是由蓝藻水华产生的一种人类致癌物质,威胁男性生殖系统健康。本研究旨在探究MC-LR对雄性生殖细胞DNA损伤和细胞自噬的影响及调控机制。通过分析氧化应激与DNA损伤之间的关系,并探讨DNA损伤后ATM/p53通路在诱导细胞自噬中的作用,为MC-LR诱导雄性生殖细胞DNA损伤及细胞自噬提供新的分子机制,为进一步研究MC-LR诱导的人类雄性生殖系统损伤提供可靠的理论基础。方法1.评估MC-LR对C57BL/6N小鼠睾丸组织病理损伤程度将48只C57BL/6N小鼠随机分成8组,分别进行腹腔注射染毒14天。记录小鼠体重变化及最后睾丸组织重量;Western Blot和微囊藻毒素检测试剂盒分别检测MC-LR在睾丸组织和血清中的水平;H&E染色检测睾丸组织中的病理损伤情况。2.确定GC-1细胞中MC-LR染毒浓度和抗氧化剂NAC干预剂量不同浓度MC-LR或NAC对GC-1细胞进行暴露24小时后,采用CCK-8试剂盒检测细胞活性,确定MC-LR和NAC的后续实验浓度。Western Blot检测MC-LR在GC-1细胞中的表达水平。3.检测MC-LR对小鼠睾丸组织和GC-1细胞中DNA损伤情况及氧化应激相关指标的影响Western Blot、免疫荧光和羟自由基(hydroxyl radical,·OH)检测试剂盒联合酶标仪分别检测小鼠睾丸组织及GC-1细胞中γ-H2AX、8-羟基脱氧鸟苷(8-hydroxy-2’-deoxyguanosine,8-OHdG)以及·OH的水平;彗星实验检测GC-1细胞中DNA损伤程度。4.检测MC-LR对小鼠睾丸组织和GC-1细胞中ATM及其下游相关蛋白表达水平和自噬水平的影响Western Blot检测小鼠睾丸组织和GC-1细胞中ATM及其下游相关蛋白和自噬相关蛋白的表达水平;免疫荧光检测小鼠睾丸组织和GC-1细胞中LC3蛋白的表达水平;MDC染色法检测GC-1细胞中自噬小体含量的变化。结果1.MC-LR在小鼠睾丸组织中蓄积并引起组织病理学损伤C57BL/6N小鼠腹腔注射染毒14天后发现,MC-LR可通过血液循环进入睾丸组织,导致小鼠体重及性腺指数明显降低(P细胞活性先升高后降低将GC-1细胞暴露于不同浓度MC-LR 24 h后,计算MC-LR对GC-1细胞的IC为24μg/mL,确定后续实验浓度为3,6和12μg/mL。暴露于不同浓度NAC后,发现当NAC浓度为5 mM时,细胞活性最高,确定NAC后续实验浓度为5mM。Western Blot结果发现,染毒24 h后MC-LR可进入GC-1细胞。4.MC-LR暴露后通过氧化应激诱导GC-1细胞DNA损伤MC-LR可显著诱导GC-1细胞彗星尾距(olive tail moment,OTM)和拖尾细胞中彗星尾部DNA含量(DNA content of comet tail in trailing cells,Tail DNA%)增加,导致γ-H2AX表达水平显著升高(P细胞中·OH产生能力的增加,诱导8-OHdG的高表达。抗氧化剂NAC预处理可显著降低·OH的产生能力和8-OHdG的表达水平,导致GC-1细胞OTM、Tail DNA%以及γ-H2AX表达水平的降低。5.DNA损伤诱导的ATM/p53通路参与MC-LR在小鼠睾丸和GC-1细胞中引起的细胞自噬MC-LR可诱导小鼠睾丸组织和GC-1细胞中ATM、CHK2和p53蛋白磷酸化水平升高,以及自噬相关蛋白Beclin1、ATG5、ATG12、ATG5-ATG12和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ表达水平增加(P细胞的自噬水平。结论1.MC-LR可通过氧化应激引起小鼠雄性生殖细胞DNA损伤。2.DNA损伤诱导的ATM/p53通路在MC-LR引起的细胞自噬中起重要作用。

关键词：微囊藻毒素-LR 雄性生殖细胞 DNA损伤细胞自噬氧化应激

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蛋白质代谢通路对鸡雄性生殖细胞分化的调控

中国农业科学 2016年第24期49卷 4814-4823页

作者：李东汤贝贝王颖洁纪艳芹王飞路镇宇王曼张亚妮李碧春扬州大学动物科学与技术学院/江苏省动物繁育与分子设计重点实验室

【目的】探究蛋白质代谢在鸡雄性生殖细胞分化过程中的作用机制,为完善鸡胚胎干细胞(embryonic stem cell,ESC)体外向雄性生殖细胞诱导分化体系研究提供依据。【方法】采用流式分选的方法获取高纯度的ESC、原始生殖细胞(primordial germ... 详细信息

【目的】探究蛋白质代谢在鸡雄性生殖细胞分化过程中的作用机制,为完善鸡胚胎干细胞(embryonic stem cell,ESC)体外向雄性生殖细胞诱导分化体系研究提供依据。【方法】采用流式分选的方法获取高纯度的ESC、原始生殖细胞(primordial germ cells,PGCs)和精原干细胞(spermatogonia stem cell,SSCs),分别提取细胞的总RNA,采用RNA-Seq方法对3种细胞的转录本进行深度测序,然后进行WEGO(web gene ontology)和KEGG(kyoto encyclopedia of genes and genomes)通路富集分析,筛选出鸡雄性生殖细胞分化过程中参与蛋白质代谢的关键通路及其关键基因,RT-q PCR(Real time Quantitative PCR)检测部分关键差异基因的表达变化,并与RNA-Seq(RNA sequencing)结果进行比较分析,同时分别从体内和体外水平对关键基因NOS2进行抑制,观察各分组不同天数的细胞形态变化及检测NOS2和C-kit、Cvh、Stra8、Dazl、integrinα6和integrinβ1等生殖标记基因表达变化情况。【结果】在雄性生殖细胞分化的整个阶段,有697个差异基因参与生物代谢,显著富集于精氨酸-脯氨酸代谢通路、酪氨酸代谢通路以及色氨酸代谢通路,在这3条通路上筛选出NOS2、FAH和IDO等关键性基因,这些基因的在ESCs向SSCs分化过程中表达变化趋势与其在RNA-Seq中的结果一致。体内抑制NOS2基因后,NOS2及C-kit、Cvh、Stra8、Dazl、integrinα6和integrinβ1等生殖标记基因在空白组和对照组之间无显著性的差异,而在抑制剂组中,NOS2及C-kit、Cvh、Stra8、Dazl、integrinα6和integrinβ1等生殖标记基因的m RNA表达量均出现了降低;而体外抑制NOS2基因后,对照组中的ESCs在2、4、6、8和10d内细胞不断增殖,但是未出现类胚体;RA诱导组中,2d出现小的类胚体,4d类胚体增大,且数量增多,6d类胚体边缘开始出现破裂,8d类胚体解体,10d出现类精原样细胞;抑制剂组中,ESCs在2、4、6、8和10d内无类胚体出现,且相较于对照组细胞增殖缓慢;RA+抑制剂组中,2和4d内无类胚体出现,细胞增殖缓慢,6d出现小的类胚体,8d类胚体数量少量增多,且体积稍显增大,10d类胚体开始裂解。并且经过抑制剂的抑制后,NOS2及C-kit、Cvh、Stra8、Dazl、integrinα6和integrinβ1等生殖标记基因的表达量在RA诱导组、抑制剂组和RA+抑制剂组中相对于对照组均呈显著性或极显著性的下调趋势。【结论】基于RNA-Seq技术及生物信息学方法筛选出ESCs向雄性生殖细胞分化过程中精氨酸-脯氨酸代谢通路及关键基因NOS2的基础上,通过对NOS2基因在鸡体内和体外的抑制,发现NOS2在被抑制后,ESCs向雄性生殖细胞分化的过程受到抑制。说明了精氨酸-脯氨酸代谢通路及关键基因NOS2对ESCs向雄性生殖细胞分化过程中起到重要的调节作用。

关键词： RNA-Seq 鸡胚胎干细胞原始生殖细胞精原干细胞雄性生殖细胞一氧化氮合成酶2 抑制剂分化

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脂代谢通路对鸡雄性生殖细胞分化的调控机制

中国农业科学 2015年第22期48卷 4539-4550页

作者：左其生张蕾连超肖天荣王颖洁汤贝贝王飞纪艳芹路镇宇赵瑞峰张文慧张亚妮李碧春扬州大学动物科学与技术学院/江苏省动物繁育与分子设计重点实验室

【目的】探索家鸡雄性生殖细胞分化过程中脂代谢相关基因以及信号通路的调控机制,以期为完善体外诱导体系提供依据。【方法】采用流式细胞分选法获得纯度较高的胚胎干细胞(embryonic stem cell,ESC)、原始生殖细胞(primitive germ cells... 详细信息

【目的】探索家鸡雄性生殖细胞分化过程中脂代谢相关基因以及信号通路的调控机制,以期为完善体外诱导体系提供依据。【方法】采用流式细胞分选法获得纯度较高的胚胎干细胞(embryonic stem cell,ESC)、原始生殖细胞(primitive germ cells,PGC)和精原干细胞(spermatogonial stem cell,SSC),提取细胞总RNA。利用RNA-seq高通量分析方法对这三种细胞进行转录组水平测序,进行GO(Gene ontology)分析和KEGG通路富集,寻找脂代谢相关基因以及信号通路;并利用脂代谢--视黄醇代谢通路终产物视黄酸(retinoic acid,RA)以及抑制剂苯磺酰异羟肟酸(piloty’s acid)在体外诱导ESC向雄性生殖细胞分化和体外鸡胚注射后孵化,q RT-PCR(quantitative real time PCR)检测视黄醇代谢通路上差异基因的表达变化,与RNA-seq结果进行比较分析同时检测雄性生殖细胞标记基因的变化情况。【结果】GO功能显著性富集和Pathway显著性富集分析结果发现:在ESC向SSC分化过程中共存在328个基因持续参与脂代谢调控,富集到27条脂代谢通路中,包括视黄醇代谢、初级胆汁酸的合成、甾类激素的生物合成、脂肪酸代谢、甘油酯代谢以及类固醇的生物合成等通路。在视黄醇代谢通路中ADH5在PGC中特异表达,ALDH1A1在整个发育过程中持续上调,ADH5和ALDH1A1在细胞中参与视黄酸的合成;CYP26b1在整个发育过程中持续上调,参与视黄酸的降解过程;RA体外诱导ESC向SSC方向诱导试验结果表明ADH5、ALDH1A1和CYP26b1家族基因在体外RA诱导过程中变化与体内分化过程一致,RA诱导组产生的SSC样细胞显著高于控制组和Piloty’s Acid+RA组。鸡胚注射抑制剂试验结果表明视黄醇通路被抑制后孵化至18d后SSC细胞表面特异标记基因integrinα6和integrinβ1的表达水平显著的低于正常的孵化组(CON)和阴性对照组(BLANK)【结论】脂代谢--视黄醇代谢通路在家鸡雄性生殖细胞的分化过程中起重要作用,体外利用视黄醇代谢通路终产物RA进行诱导时第2天出现类胚体,第4、6天类胚体逐渐增大,第8天开始裂解,在第10天出现SSC样细胞,而在诱导过程中抑制视黄醇通路信号后则会降低SSC样细胞的产生,而在体外孵化过程中视黄醇通路抑制后也能影响SSC细胞的产生。

关键词：鸡 RNA-seq 雄性生殖细胞视黄酸脂代谢

视黄酸诱导鸡胚胎干细胞向雄性生殖细胞分化的研究

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中国畜牧兽医 2020年第7期47卷 2142-2149页

作者：李欣赵中利吕阳柳俭强魏天金海国于永生吉林省农业科学院畜牧科学分院公主岭136100 西北农林科技大学动物科技学院杨凌712100

体外胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESCs)向生殖细胞分化可用于治疗不育症,同时也为揭示种系世代的分子机制提供最佳模型。试验旨在探讨视黄酸(retinoic acid,RA)诱导鸡胚胎干细胞(chicken embryonic stem cells,cESCs)向雄性生殖细... 详细信息

体外胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESCs)向生殖细胞分化可用于治疗不育症,同时也为揭示种系世代的分子机制提供最佳模型。试验旨在探讨视黄酸(retinoic acid,RA)诱导鸡胚胎干细胞(chicken embryonic stem cells,cESCs)向雄性生殖细胞(male germ cells,MGCs)分化的作用效果。利用胰蛋白酶消化法从新鲜种蛋X期鸡胚中分离胚胎干细胞,以鸡胚成纤维(chicken embryo fibroblast,CEF)细胞为滋养层,进行体外培养,利用形态法、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AKP)染色和胚胎阶段特异性表面抗原(embryo specific surface antigen 1,SSEA-1)检测对获得的胚胎干细胞进行鉴定。结果表明,获得典型的呈巢状或岛状的cESCs克隆,细胞AKP染色呈蓝紫色,表明其具有较高的内源性AKP活性;SSEA-1鉴定结果呈阳性,显示cESCs克隆具有多能性。采用10-5 mol/L RA诱导鸡胚胎干细胞向雄性生殖细胞分化,镜下观察细胞形态变化,分别于诱导第0、2、4、6、8、10天提取细胞总RNA,反转录成cDNA,用于实时荧光定量PCR检测生殖细胞标志基因的表达。结果表明,在此诱导过程中,作为胚胎干细胞标志基因Nanog、Sox2表达量持续显著下降,而生殖细胞特异性基因Dazl、Stra8、c-kit、integrinα6表达量呈持续上升趋势;免疫细胞化学检测可观察到特异基因相关蛋白的阳性克隆。本研究成功分离出cESCs,可体外培养并保持未分化状态及多能性。10-5 mol/L RA能够促进cESCs向雄性生殖细胞方向分化,可以引起生殖细胞相应基因的表达,为进一步研究雄性生殖细胞的形成和调控机制提供参考。

关键词：鸡胚胎干细胞雄性生殖细胞体外培养性别鉴定视黄酸(RA) 诱导分化

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多能干细胞向雄性生殖细胞分化的研究进展

中华男科学杂志 2017年第5期23卷 468-472页

作者：汪诗羽崔毓桂覃莲菊南京医科大学第一附属医院生殖医学中心江苏南京210029

多能干细胞(PSCs)包括胚胎干细胞(ESCs)和诱导多能干细胞(iPSCs),具有分化为成体所有类型细胞的潜能。目前体外已能获得小鼠PSCs来源的成熟精子、人类ESCs(hESCs)/iPSCs(hiPSCs)来源的原始生殖细胞(PGCs)以及减数分裂前期精子细胞。若... 详细信息

多能干细胞(PSCs)包括胚胎干细胞(ESCs)和诱导多能干细胞(iPSCs),具有分化为成体所有类型细胞的潜能。目前体外已能获得小鼠PSCs来源的成熟精子、人类ESCs(hESCs)/iPSCs(hiPSCs)来源的原始生殖细胞(PGCs)以及减数分裂前期精子细胞。若能诱导人类PSCs(hPSCs)体外分化为功能完整的成熟精子,可望治愈临床上非遗传因素无精子症;对于遗传因素导致少弱精子/无精子症,则可进一步结合基因编辑技术获得健康功能精子。iPSC分化的功能精子可避免精子细胞来源及医学伦理问题,具有更高临床价值。本文综述体外诱导PSCs向雄性生殖细胞分化的研究进展,为应用PSCs治疗男性不育提供参考。

关键词：男性不育无精子症多能干细胞雄性生殖细胞分化

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性激素促进鸡胚胎干细胞向雄性生殖细胞分化

中国家禽 2016年第8期38卷 10-16页

作者：张文慧蒋一秀王颖洁左其生李东连超汤贝贝张亚妮李碧春扬州大学动物科学与技术学院江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室江苏扬州225009

试验分别探讨了睾酮和FSH诱导鸡胚胎干细胞(Embryonic stem cells,ESCs)向雄性生殖细胞分化的作用效果。首先筛选睾酮和卵泡刺激素(FSH)的适宜诱导浓度,在RA和支持细胞的诱导基础上分别添加适宜浓度的睾酮和FSH对传至2代的ESCs进行诱导... 详细信息

试验分别探讨了睾酮和FSH诱导鸡胚胎干细胞(Embryonic stem cells,ESCs)向雄性生殖细胞分化的作用效果。首先筛选睾酮和卵泡刺激素(FSH)的适宜诱导浓度,在RA和支持细胞的诱导基础上分别添加适宜浓度的睾酮和FSH对传至2代的ESCs进行诱导,通过形态学观察、实时荧光定量PCR及免疫细胞化学对诱导结果进行检测。结果显示:睾酮和FSH的适宜诱导浓度分别为15 ng/m L和25 ng/m L,单独使用睾酮和FSH诱导均未出现类SSCs样细胞;二者联合支持细胞和RA诱导,诱导2 d出现类胚体,随后类胚体体积逐渐变大,诱导12 d类胚体解体出现类SSC样细胞;实时荧光定量PCR结果显示,睾酮和FSH分别与支持细胞和RA共同诱导组中,Stra8表达量持续上调,integrinβ1、Dazl表达量显著上调,ESCs标记基因Nanog、Sox2表达量均呈持续下降趋势;睾酮的多因素诱导组中,Dazl的表达量明显高于RA和支持细胞诱导组;而FSH的多因素诱导组中Stra8的表达量相对于RA和支持细胞诱导组也显著升高。结果表明睾酮和FSH单独诱导不能引起ESCs向雄性生殖细胞分化,但可以促进支持细胞和RA诱导ESCs向雄性生殖细胞分化的作用效果,该结果为进一步研究雄性生殖细胞的形成和调控机制提供理论基础。

关键词：鸡胚胎干细胞雄性生殖细胞分化睾酮卵泡刺激素