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基于UHPLC-Q-ExactiveMS分析鉴定隐丹参酮在大鼠体内的代谢产物

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质谱学报 2020年第4期41卷 307-320页

作者：娄天宇马贝贝梁耀月王晨晓王子健张连中王志斌张加余北京中医药大学中药学院北京100102 北京中医药大学北京中医药研究院北京100029 北京鸿测科技发展有限公司北京100176 滨州医学院药学院山东烟台264003

采用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱(UHPLC-Q-ExactiveMS)法对隐丹参酮在大鼠体内的代谢产物进行分析鉴定。大鼠单次灌胃后,收集不同时间点的血浆以及24h内的尿液和粪便,应用固相萃取法处理生物样品,采用AcquityUPLCBEH... 详细信息

采用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱(UHPLC-Q-ExactiveMS)法对隐丹参酮在大鼠体内的代谢产物进行分析鉴定。大鼠单次灌胃后,收集不同时间点的血浆以及24h内的尿液和粪便,应用固相萃取法处理生物样品,采用AcquityUPLCBEHC18色谱柱(2.1mm×100mm×1.7μm),以0.1%甲酸溶液(A)-乙腈(B)为流动相进行梯度洗脱,在电喷雾离子源正离子模式下对生物样品进行分析。结合精确分子质量、碎片离子信息及相关文献报道,共分析鉴定出45种代谢产物。结果表明,隐丹参酮在大鼠体内的主要代谢途径为还原、羟基化、去甲基化、葡萄糖醛酸化、S-半胱氨酸结合、脱一氧化碳、脱氢、脱乙基以及它们的复合反应等。本研究阐明了隐丹参酮在大鼠体内的代谢情况,可为进一步研究其药效物质基础及质量标准提供依据。

关键词：隐丹参酮超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱(UHPLC-Q-ExactiveMS) 代谢产物

隐丹参酮对人膀胱癌5637细胞增殖和凋亡的影响

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中国临床药理学杂志 2020年第14期36卷 2082-2084页

作者：李兆巍姜华茂锦州医科大学附属第一医院泌尿外科辽宁锦州121000

目的研究隐丹参酮对膀胱癌5637细胞增殖、凋亡的影响及其机制。方法对照组膀胱癌5637细胞用含0.1%DMSO的培养基培养,40,80,120,160μmol·L^-1隐丹参酮组膀胱癌5637细胞用0.1%DMSO配制成的40,80,120,160μmol·L^-1的隐丹参酮处理。以CC... 详细信息

目的研究隐丹参酮对膀胱癌5637细胞增殖、凋亡的影响及其机制。方法对照组膀胱癌5637细胞用含0.1%DMSO的培养基培养,40,80,120,160μmol·L^-1隐丹参酮组膀胱癌5637细胞用0.1%DMSO配制成的40,80,120,160μmol·L^-1的隐丹参酮处理。以CCK-8检测各组细胞的增殖抑制率;以流式细胞仪检测各组细胞凋亡率;以蛋白质印迹(Western Blot)检测各组Bcl-2、Bax、P53、活化的胱天蛋白酶-3(cleaved Caspase-3)蛋白的表达。结果对照组和40,80,120,160μmol·L^-1隐丹参酮组72 h增殖抑制率分别为(0.00±3.76)%,(38.90±3.51)%,(76.69±3.70)%,(85.61±2.77)%,(94.88±0.38)%,差异均有统计学意义(P隐丹参酮组的细胞凋亡率分别为(1.83±0.31)%,(16.37±0.70)%,(25.20±1.05)%,(35.60±1.95)%,差异有统计学意义(P隐丹参酮组的Bcl-2相关X蛋白(Bax)相对表达量分别为1.00±0.14,2.44±0.21,2.30±0.19;cleaved Caspase-3蛋白相对表达量分别为1.00±0.12,2.05±0.23,2.23±0.19;B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)蛋白相对表达量分别为1.00±0.12,0.58±0.05,0.19±0.02,差异均有统计学意义(均P隐丹参酮能够抑制膀胱癌5637细胞增殖,诱导其凋亡,其发生机制可能与上调Bax、cleaved Caspase-3,下调Bcl-2有关。

关键词：隐丹参酮膀胱癌5637细胞细胞增殖细胞凋亡活化的胱天蛋白酶-3

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隐丹参酮对肾癌干细胞增殖和凋亡的影响

中国组织工程研究 2016年第1期20卷 49-54页

作者：冯敏贾明华郑州颐和医院肾内科河南省郑州市450008

背景:前期研究发现隐丹参酮对多种肿瘤具有抑制作用,但是对肾癌的影响尚未有报道。目的:探讨隐丹参酮对肾癌干细胞增殖和凋亡的影响。方法:采用免疫磁珠法分离纯化CD133^+肾癌干细胞。通过MTT法检测不同质量浓度(0,0.2,1.5 mg/L)隐丹参... 详细信息

背景:前期研究发现隐丹参酮对多种肿瘤具有抑制作用,但是对肾癌的影响尚未有报道。目的:探讨隐丹参酮对肾癌干细胞增殖和凋亡的影响。方法:采用免疫磁珠法分离纯化CD133^+肾癌干细胞。通过MTT法检测不同质量浓度(0,0.2,1.5 mg/L)隐丹参酮对CD133^+肾癌干细胞增殖的影响;流式细胞仪检测不同质量浓度(0,0.2,1.5 mg/L)隐丹参酮对CD133^+肾癌干细胞凋亡的影响;免疫印迹检测5 mg/L隐丹参酮对肾癌干细胞中Ki67、Bcl-2、Caspase-3和p-Caspase-3蛋白表达的影响。结果与结论:分选前CD133^+阳性细胞的百分率为6.32%,分选后CD133^+阳性细胞的百分率为82.73%,差异有显著性意义(P隐丹参酮抑制肾癌干细胞生长,促进肾癌干细胞凋亡,并呈浓度依赖性。Ki67和Bcl-2在5 mg/L隐丹参酮组中的表达明显低于未加药组,p-Caspase-3的表达水平则明显高于未加药组,而Caspase-3在两组中的表达水平没有明显变化,结果表明隐丹参酮可能通过抑制肾癌干细胞Ki67和Bcl-2表达,促进p-Caspase-3表达来发挥抑增殖促凋亡效应。

关键词：肾肿瘤肿瘤干细胞丹参细胞增殖细胞凋亡组织工程干细胞隐丹参酮肾癌肾癌干细胞增殖凋亡

隐丹参酮通过调节SIRT3/HIF-1α信号轴和线粒体自噬抑制MDA-MB-231细胞增殖迁移的研究

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中药材 2020年第1期43卷 193-196页

作者：宋晓璐乐翊飞卢德赵浙江中医药大学生命科学学院浙江杭州310053

目的:研究隐丹参酮对MDA-MB-231细胞SIRT3/HIF-1α信号通路和线粒体自噬的影响,探讨隐丹参酮抑制MDA-MB-231细胞增殖和迁移的机制。方法:培养三阴性乳腺癌细胞(MDA-MB-231),分为空白对照组及隐丹参酮低(5μmol/L)、中(10μmol/L)、高(20... 详细信息

目的:研究隐丹参酮对MDA-MB-231细胞SIRT3/HIF-1α信号通路和线粒体自噬的影响,探讨隐丹参酮抑制MDA-MB-231细胞增殖和迁移的机制。方法:培养三阴性乳腺癌细胞(MDA-MB-231),分为空白对照组及隐丹参酮低(5μmol/L)、中(10μmol/L)、高(20μmol/L)浓度组,Western blot检测各组细胞SIRT3、HIF-1α、VEGF、Parkin、PINK1蛋白表达;划痕实验检测各组细胞迁移率;流式细胞术检测各组细胞凋亡情况。结果:与空白对照组比较,隐丹参酮处理组SIRT3、Parkin、PINK1表达上调,HIF-1α、VEGF表达下调,MDA-MB-231迁移率显著降低,细胞凋亡率显著升高。结论:隐丹参酮可通过调节SIRT3/HIF-1α信号通路,促进线粒体自噬进而抑制MDA-MB-231细胞的增殖和迁移。

关键词：三阴性乳腺癌隐丹参酮线粒体自噬 SIRT3

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隐丹参酮对骨髓来源巨噬细胞功能的影响

中国药理学通报 2015年第3期31卷 346-350页

作者：游艳周春李翠限李东邵薇薇彭锦李婉贞刘培庆沈晓燕中山大学药学院药理与毒理学实验室广东广州510006 复旦大学药学院药理学教研室上海201203

目的研究隐丹参酮对骨髓巨噬细胞功能的影响。方法激光共聚焦检测巨噬细胞吞噬功能;庆大霉素保护法检测巨噬细胞杀菌能力;q-PCR法检测TNF-α、IL-6、IL-10的表达水平;Western blot检测NF-κB通路;LPS(lipopolysaccharides)及IL-4刺激检... 详细信息

目的研究隐丹参酮对骨髓巨噬细胞功能的影响。方法激光共聚焦检测巨噬细胞吞噬功能;庆大霉素保护法检测巨噬细胞杀菌能力;q-PCR法检测TNF-α、IL-6、IL-10的表达水平;Western blot检测NF-κB通路;LPS(lipopolysaccharides)及IL-4刺激检测巨噬细胞分型。结果隐丹参酮能够增强巨噬细胞吞噬功能及杀菌能力;促进抗炎因子IL-10并抑制促炎因子TNF-α及IL-6的表达;阻断NF-κB信号通路;诱导巨噬细胞向M2型分化。结论隐丹参酮能促进巨噬细胞向M2型分化,并上调骨髓巨噬细胞的免疫功能。

关键词：隐丹参酮巨噬细胞吞噬杀菌 TNF-α 分化

隐丹参酮对小鼠急慢性溃疡性结肠炎的作用及其机制的研究

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隐丹参酮对小鼠急慢性溃疡性结肠炎的作用及其机制的研究

作者：樊李明福建中医药大学

学位级别：硕士

溃疡性结肠炎(Ulcerative colitis,UC)是炎症性肠病(Inflammatory bowel disease,IBD)的一种,其主要特征是肠道内慢性复发的免疫应答性炎症。目前UC的发病机制尚不明确,一般认为是遗传、环境、肠道菌群、免疫应答等多种因素相互作用的... 详细信息

溃疡性结肠炎(Ulcerative colitis,UC)是炎症性肠病(Inflammatory bowel disease,IBD)的一种,其主要特征是肠道内慢性复发的免疫应答性炎症。目前UC的发病机制尚不明确,一般认为是遗传、环境、肠道菌群、免疫应答等多种因素相互作用的结果。在UC中,免疫系统在疾病的发病中起着重要的作用,促炎介质和抗炎介质之间的平衡被破坏,从而导致免疫反应过度激活,因此,包括辅助性T细胞17(T helper cell 17,Th17)和调节性T细胞(Regulatory cells,Tregs)在内的免疫细胞被认为在UC的发病机制中扮演着重要的角色。白细胞介素-17(Interleukin 17,IL-17)是Th17细胞特异性分泌的一种细胞因子,它能够将单核细胞和中性粒细胞募集到炎症部位,同时协同促炎细胞因子如肿瘤坏死因子-α(Tumor Necrosis Factor,TNF),引起炎症反应的发生。因此,抑制Th17细胞分化是一种潜在治疗UC的方法。JAK激酶/信号传导与转录激活因子(The Janus kinase/Signal transducers and activators of transcription,JAK/STAT)信号通路在细胞生长、分化、迁移等过程中起着关键作用,此外还参与了炎症和自身免疫性疾病的发病机制,如类风湿性关节炎、炎症性肠病等。信号转导与转录激活因子3(Signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)在UC中的作用已有大量文献报道,特别是在UC患者中,STAT3表达和活性明显增加,同时发现在肠粘膜T细胞中磷酸化的STAT3显著增加。UC的治疗通常基于疾病的严重程度,目前的治疗药物主要包括氨基水杨酸类、糖皮质激素类、免疫调节药物等。不久前,辉瑞公司宣布美国食品药品监督管理局(Food and Drug Administration,FDA)已批准托法替尼缓释片的新增适应症申请,即用于治疗中度至重度溃疡性结肠炎患者,这是目前针对中重度溃疡性结肠炎患者的第一种JAK抑制剂,而针对治疗溃疡性结肠炎的STAT3抑制剂目前尚无上市药物。隐丹参酮(Cryptotanshinone,CTS)是一种从中药丹参中提取的丹参酮类化合物,具有抗炎、抗肿瘤、抗菌、抗氧化等多种活性,但是,其对溃疡性结肠炎的作用尚未见报道。课题组在前期研究中采用表面等离子共振技术(Surface Plasmon Resonance,SPR)发现CTS能够与STAT3特异性地结合,因此,为了进一步研究CTS在溃疡性结肠炎中的作用,在本研究中我们考察了CTS对葡聚糖硫酸钠(Dextran sulfate sodium,DSS)诱导急慢性溃疡性结肠炎模型小鼠的作用,并探讨其作用机制。首先,我们研究了CTS对STAT3活化以及Th17细胞分化的影响。在体外制备小鼠脾细胞悬液,细胞增殖与毒性检测法(Cell Counting Kit-8,CCK8)检测CTS对细胞活力的影响,酶联免疫吸附测定(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法检测CTS对刀豆蛋白A(Concanavalin A,ConA)诱导细胞因子白细胞介素-17A(Interleukin17A,IL-17A)、TNF-α、白细胞介素-2(Interleukin 2,IL-2)、白细胞介素-6(Interleukin6,IL-6)、γ-干扰素(Interferon-γ,IFN-γ)以及白细胞介素-10(Interleukin 10,IL-10)的影响,蛋白质印迹法(Western blot,WB)法检测CTS对IL-6诱导STAT3磷酸化水平的影响,激光共聚焦法检测CTS对STAT3核转位的影响,流式细胞术检测CTS对初始(na?ve)CD4T细胞向Th17细胞分化的影响。结果显示CTS(3、10、30μM)对脾细胞毒性无显著影响,且能够浓度依赖地抑制STAT3磷酸化,同时能够有效抑制IL-6诱导的STAT3核转位;另外,CTS能够抑制ConA刺激脾细胞产生IL-17A、TNF-α,但对IL-2、IL-6、IFN-γ、IL-10的产生没有显著影响;最后,CTS能够显著抑制转化生长因子-β(Transforming growth factor-β,TGF-β)和IL-6共同诱导的初始CD4T细胞向Th17细胞的分化。表明CTS对STAT3活化以及Th17细胞分化具有抑制作用。为了进一步研究隐丹参酮对溃疡性结肠炎的作用,我们采用DSS诱导C57BL/6小鼠建立急慢性溃疡性结肠炎模型。在急性模型中,小鼠自由饮用2.5%DSS溶液连续7 d,随后3 d自由饮水,20 mg/kg和60 mg/kg隐丹参酮连续灌胃治疗至第10天;在慢性模型中,小鼠自由饮用2.5

关键词：隐丹参酮急慢性溃疡性结肠炎 STAT3 Th17 Treg

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隐丹参酮治疗肿瘤的研究进展

中文科技期刊数据库（全文版）医药卫生 2024年第6期 0008-0011页

作者：张馨白洁欣成都中医药大学四川成都610075

目前,恶性肿瘤的死亡率非常高,其治疗方案的缺乏与疗效的有限性使得肿瘤治疗成为一项极具挑战性的任务。在这一背景下,天然药物提取物作为治疗肿瘤的研究热点备受关注,其中隐丹参酮(Cryptotanshinone,CPT)展现出了广泛而强大的抗肿瘤活... 详细信息

目前,恶性肿瘤的死亡率非常高,其治疗方案的缺乏与疗效的有限性使得肿瘤治疗成为一项极具挑战性的任务。在这一背景下,天然药物提取物作为治疗肿瘤的研究热点备受关注,其中隐丹参酮(Cryptotanshinone,CPT)展现出了广泛而强大的抗肿瘤活性。本文的研究重点为隐丹参酮(Cryptotanshinone,CPT)在多种肿瘤治疗中的作用机制上,文中详细介绍了隐丹参酮的来源、化学结构,并总结了其治疗结肠癌、卵巢肿瘤、乳腺癌等其他肿瘤的研究进展,研究旨在为肿瘤的预防和治疗提供新的方向。

关键词：隐丹参酮肿瘤中药丹参

隐丹参酮在炎症性肠病治疗中的作用机制及临床应用研究

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中文科技期刊数据库（全文版）医药卫生 2024年第2期 0024-0028页

作者：钟其新陈杨洋吴学敏广州中医药大学深圳医院(福田)全科医学科广东深圳518034 广州中医药大学深圳医院(福田)内分泌科广东深圳518034

本论著旨在研究隐丹参酮胶束对炎症性肠病的治疗作用。递送系统的构建及表征,评估其性能,并进行体内外药效学和安全性评价,改善隐丹参酮的成药性,阐明隐丹参酮调控巨噬细胞表型极化改善IBD炎症微环境的作用机制。方法探讨了环境响应型... 详细信息

本论著旨在研究隐丹参酮胶束对炎症性肠病的治疗作用。递送系统的构建及表征,评估其性能,并进行体内外药效学和安全性评价,改善隐丹参酮的成药性,阐明隐丹参酮调控巨噬细胞表型极化改善IBD炎症微环境的作用机制。方法探讨了环境响应型靶向药物递送系统的构建方法和表征技术。同时,通过体外和体内实验评估了该递送系统的药物释放能力、细胞摄取效率、药效学特性以及生物相容性和安全性。结果胶束解体,释放CTS,消除过量生成的ROS,抑制MAPK/NF-κB信号通路活化,降低细胞因子SOCS3的表达,解除SOCS3对STAT3的抑制作用,抑制巨噬细胞的促炎性M1型极化,驱动其向抑炎性M2型极化,增加IL-4、IL-10、TGF-β等抑炎性细胞因子水平,改善IBD病灶炎性微环境,促进炎症消退,提高IBD治疗效果。结论环境响应型靶向递药系统可特异性靶向至目标细胞,在特定微环境作用下释放治疗药物,有效降低药物的毒副作用,提高用药安全性。

关键词：隐丹参酮炎症性肠病机制研究

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隐丹参酮及其衍生物抗肿瘤活性研究进展

药学实践与服务 2023年第4期41卷 207-211页

作者：温萍张俊平福建中医药大学药学系福建福州350108

隐丹参酮是中药丹参的有效成分之一,对多种肿瘤显示很好的活性。其抗肿瘤效应包括抑制细胞增殖、诱导肿瘤细胞凋亡、抑制细胞迁移和侵袭、调节机体免疫功能和逆转药物耐药性等。抗肿瘤直接靶点有信号转导和转录激活因子3(STAT3)、酪氨... 详细信息

隐丹参酮是中药丹参的有效成分之一,对多种肿瘤显示很好的活性。其抗肿瘤效应包括抑制细胞增殖、诱导肿瘤细胞凋亡、抑制细胞迁移和侵袭、调节机体免疫功能和逆转药物耐药性等。抗肿瘤直接靶点有信号转导和转录激活因子3(STAT3)、酪氨酸蛋白磷酸酶SHP2、DNA拓扑异构酶2(top2),其它的作用机制包括诱导活性氧(ROS)产生、调控雌、雄激素受体信号、抑制PI3K/AKT信号通路等。此外,近年来研究人员还设计合成了许多隐丹参酮衍生物,并对其抗肿瘤作用进行了研究。本文主要就隐丹参酮及其衍生物抗肿瘤活性研究进展进行综述,希望能够有助于隐丹参酮及其衍生物在抗肿瘤方面的药物研发。

关键词：隐丹参酮衍生物抗肿瘤机制