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降钙素基因相关肽受体组分蛋白

生命的化学 2011年第2期31卷 277-280页

作者：唐江琼秦旭平南华大学药物药理研究所衡阳421001

降钙素基因相关肽受体组分蛋白(calcitonin gene-related peptide-receptor component protein,CGRP-RCP)是降钙素基因相关肽受体的一个具有146/148个氨基酸的胞内膜周边蛋白,特异地与降钙素受体样受体(calcitonin receptor-like receptor,CRLR)相互作用并促进CGRP和肾上腺髓质素的信号跨膜转导,现认为CGRP-RCP也是G蛋白偶联受体中一个动态的调节器。CGRP-RCP的mRNA在人和鼠的几乎所有组织均可检测到,在小鼠睾丸中分布尤其明显。在哺乳动物中,CGRP-RCP与C17(酵母菌中聚合酶III的必需亚基)是直系同源蛋白,人体的CGRP-RCP能取代酵母中的C17,发挥与C17相同的生物学作用。

关键词：降钙素基因相关肽受体降钙素基因相关肽受体组分蛋白降钙素受体样受体受体活性修饰蛋白-1

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降钙素基因相关肽受体研究的新进展

生理科学进展 2019年第5期50卷 396-400,F0003页

作者：侯可赛王林林王洪波傅风华于龙川烟台大学药学院烟台264005 北京大学生命科学学院北京100871

降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)是一种神经肽,它由37个氨基酸残基组成。CGRP通过激活细胞膜上的CGRP受体参与循环系统、神经系统等功能的调节,特别是CGRP在血管舒张以及偏头痛中发挥着重要的作用。过去认为CGR... 详细信息

降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)是一种神经肽,它由37个氨基酸残基组成。CGRP通过激活细胞膜上的CGRP受体参与循环系统、神经系统等功能的调节,特别是CGRP在血管舒张以及偏头痛中发挥着重要的作用。过去认为CGRP受体是一种经典的G蛋白偶联受体,具有G蛋白偶联受体的结构特性。近年来发现,与经典的G蛋白偶联受体不同,具有生物活性的CGRP受体由降钙素受体样受体(calcitonin receptor-like receptor,CLR)、受体活性修饰蛋白-1(receptor activity modifying protein,RAMP1)和受体组成蛋白(receptor component protein,RCP)组成,CGRP受体的这些不同组分在跨膜信号转导中分别发挥不同的作用。RAMP参与多种G蛋白偶联受体的组成,在G蛋白偶联受体的表型及功能调节等方面具有重要的作用。所以,RAMP的发现修正了有关G蛋白偶联受体的基本概念和理论。目前对CLR,RAMP以及RCP在CGRP受体激活和信号转导中作用的研究已经有了很大的进展。深入研究RAMP的胞外N末端和RAMP的单跨膜区域如何协同CLR以识别并结合相应的配体,以及G蛋白与RCP之间怎样相互作用,都将为有关G蛋白偶联受体的理论提供新的内容。本文将综述CGRP受体各组分的结构和功能,以及它们之间的相互作用对CGRP受体功能的影响。

关键词：降钙素基因相关肽(CGRP) 降钙素基因相关肽受体降钙素受体样受体(CLR) 受体活性修饰蛋白(RAMP) 受体组成蛋白(RCP) G蛋白偶联受体

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降钙素基因相关肽受体重构及其信号跨膜转导

中南医学科学杂志 2011年第2期39卷 121-126页

作者：秦旭平李元建南华大学药物药理研究所湖南衡阳421001 中南大学药理系

降钙素基因相关肽（calcitonin gene-related pep-tide,CGRP）是一种由37个氨基酸组成的生物活性多肽,与降钙素（calcitonin,CT）来源于同一基因,CGRP是降钙素基因的另一种表达产物。人和鼠的CGRP都有两种基因型,即α-CGRP和β-CGRP（... 详细信息

降钙素基因相关肽（calcitonin gene-related pep-tide,CGRP）是一种由37个氨基酸组成的生物活性多肽,与降钙素（calcitonin,CT）来源于同一基因,CGRP是降钙素基因的另一种表达产物。人和鼠的CGRP都有两种基因型,即α-CGRP和β-CGRP（人为Ⅰ和Ⅱ-CGRP）。

关键词：降钙素基因相关肽受体重构跨膜转导

降钙素基因相关肽受体单克隆抗体的制备与初步鉴定

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生物技术通讯 2019年第6期30卷 775-779,785页

作者：王佳星许永亮付楚溪张丹雨薛冲张惟材王升厚熊向华沈阳师范大学生命科学学院辽宁沈阳110034 军事科学院军事医学研究院生物工程研究所北京100071 辽宁大学生命科学学院辽宁沈阳110036

目的:制备与鉴定抗降钙素基因相关肽受体(CGRPR)单克隆抗体。方法:构建GST-CGRPR胞外区融合表达载体,诱导表达后经GST亲和层析得到的重组蛋白作为抗原免疫BALB/c小鼠,利用杂交瘤技术筛选阳性细胞株,通过腹水制备鼠源单克隆抗体,采用ELIS... 详细信息

目的:制备与鉴定抗降钙素基因相关肽受体(CGRPR)单克隆抗体。方法:构建GST-CGRPR胞外区融合表达载体,诱导表达后经GST亲和层析得到的重组蛋白作为抗原免疫BALB/c小鼠,利用杂交瘤技术筛选阳性细胞株,通过腹水制备鼠源单克隆抗体,采用ELISA、SDS-PAGE、Western印迹和抗体分型试剂盒等方法进行分析鉴定。结果:纯化得到的GST-CGRPR胞外区融合蛋白纯度大于90%,筛选到2株针对CGRPR的单克隆抗体1F9、1F10,轻、重链均分别为κ型、IgG1型,细胞上清效价分别为1∶3200、1∶1600,腹水效价都达到105,抗体纯度均达到90%以上,且都以线性表位结合GST-CGRPR,亲和力常数分别为3.95×10^-8、1.49×10^-8 mol/L。结论:获得2株具有高亲和力针对CGRPR的单克隆抗体,为偏头痛治疗药物研发奠定了基础。

关键词：降钙素基因相关肽受体抗原单克隆抗体杂交瘤

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中国康复医学杂志 2013年第1期28卷 9-12,82页

作者：房春燕王燕王亚南孟蒂张广学李宁潍坊医学院应用药理学实验室 261053

目的:探讨大鼠伏核内勿动蛋白A(Nogo-A)和降钙素基因相关肽1(CGRP1)受体在痛觉调制过程中的作用。方法:健康雄性SD大鼠随机分为4组:空白对照组,伏核内注射生理盐水1μl;炎性痛模型对照组、吗啡组和纳洛酮组。福尔马林致炎成功后,分别向... 详细信息

目的:探讨大鼠伏核内勿动蛋白A(Nogo-A)和降钙素基因相关肽1(CGRP1)受体在痛觉调制过程中的作用。方法:健康雄性SD大鼠随机分为4组:空白对照组,伏核内注射生理盐水1μl;炎性痛模型对照组、吗啡组和纳洛酮组。福尔马林致炎成功后,分别向其伏核内注射生理盐水、吗啡、纳洛酮各1μl。采用Western blot法,观察各组大鼠伏核内Nogo-A和CGRP1受体蛋白表达的变化,分析炎性痛、吗啡、纳洛酮对大鼠伏核内Nogo-A和CGRP1受体蛋白表达的影响。结果:正常大鼠伏核内有Nogo-A和CGRP1受体蛋白表达;福尔马林致炎后Nogo-A的蛋白表达量降低(P<0.05),而CGRP1表达升高(P<0.05);与炎性痛模型对照组比较,吗啡组大鼠伏核内Nogo-A的蛋白表达量增高(P<0.05),CGRP1降低(P<0.05),而纳洛酮组Nogo-A降低(P<0.05),CGRP1增高(P<0.05)。结论:Nogo-A和CGRP参与了炎症致痛敏大鼠伏核内的痛觉调制过程,且二者之间存在反向调节关系,内源性阿片系统可能参与并影响了该过程。

关键词：勿动蛋白-A 降钙素基因相关肽受体吗啡伏核痛觉调制

肝细胞生长因子、降钙素基因相关肽对小儿鞘状突闭合影响的体内外研究

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肝细胞生长因子、降钙素基因相关肽对小儿鞘状突闭合影响的体内外...

作者：王峰山西医科大学

学位级别：硕士

目的:探讨肝细胞生长因子(Hepatocytegrowthfactor,HGF)、降钙素基因相关肽(Calcitoningenerelatedpeptide,CGRP)与小儿腹股沟斜疝的关系。方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定60例不同年龄阶段男性腹股沟斜疝患儿(实验组1)和30例来... 详细信息

目的:探讨肝细胞生长因子(Hepatocytegrowthfactor,HGF)、降钙素基因相关肽(Calcitoningenerelatedpeptide,CGRP)与小儿腹股沟斜疝的关系。方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定60例不同年龄阶段男性腹股沟斜疝患儿(实验组1)和30例来院体检的健康小儿(对照组1)血清HGF、CGRP浓度;流式细胞技术检测实验组1患儿疝囊和30例需行开腹手术的非鞘状突疾病患儿(对照组2)腹膜上HGF受体c-met蛋白、CGRP受体密度;另取15例男性腹股沟斜疝患儿(实验组2)疝囊,将离体疝囊行组织培养,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)分别测定含有CGRP细胞培养基和不含CGRP细胞培养基中HGF浓度。结果: 1、血清HGF、CGRP浓度的变化 (1)对照组1中不同年龄阶段小儿血清HGF、CGRP水平无显著性差异(P>0.05);(2)小儿腹股沟斜疝患者血清HGF、CGRP浓度均低于对照组1(P0.05)。 2、实验组1和对照组2中HGF受体、CGRP受体在腹膜和疝囊上的表达 (1)HGF受体在腹膜和疝囊上的表达: ①HGF受体在腹膜间质细胞上低表达或不表达(5.21±2.18),而在疝囊间质细胞上高表达(52.23±53.48)(P受体在腹膜和疝囊间皮细胞上的表达无显著性差异(P>0.05);③HGF受体在腹膜间质细胞上的表达(5.21±2.18)明显低于腹膜间皮细胞上的表达(20.77±11.13)(P受体在腹膜和疝囊上的表达: ①CGRP受体在腹膜间质细胞上的表达(69.78±51.43)低于疝囊间质细胞上的表达(106.47±106.17)(P受体在间质细胞上的表达无显著性差异(P>0.05);②CGRP受体在疝囊间皮细胞上低表达或无表达(6.16±6.51),而在腹膜间皮细胞上表达(22.73±15.45)(P受体在腹膜间质细胞上的表达(69.78±51.43)高于腹膜间皮细胞上的表达(22.73±15.45)(P受体、CGRP受体在单、双侧疝囊上的表达实验组1中HGF受体、CGRP受体在单、双侧疝囊的间质细胞及间皮细胞上的表达无显著性差异(P>0.05)。 3、细胞培养基HGF浓度的变化 (1)经培养0h,24h,48h后,含CGRP细胞培养基和无CGRP细胞培养基中HGF浓度均随培养时间的延长而增加(P0.05),而在培养48h后两种培养基中HGF浓度间存在差异(P<0.05),15例中有2例6月≤年龄<1岁的患儿的HGF在含CGRP细胞培养基中的浓度明显高于无CGRP细胞培养基中的浓度(24h:P<0.01,48h:P<0.01). 结论: (1)6月≤年龄<1岁和1岁≤年龄<3岁年龄段可能是影响鞘状突闭合的关键时期。 (2)外源性CGRP可能引起疝囊间质中HGF浓度的升高,暗示了内源性CGRP、HGF缺乏可能影响鞘状突的闭合。 (3)鞘状突闭合因素的多样性及HGF、CGRP参与鞘状突闭合调控过程的复杂性。

关键词：小儿腹股沟斜疝鞘状突肝细胞生长因子肝细胞生长因子受体降钙素基因相关肽降钙素基因相关肽受体

降钙素基因相关肽在大鼠臂旁核内的痛觉调节作用及其机制

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降钙素基因相关肽在大鼠臂旁核内的痛觉调节作用及其机制

作者：王琳琳烟台大学

学位级别：硕士

研究背景:疼痛是一种复杂的体验,不仅涉及有害环境刺激的转导,还涉及大脑的认知和情感处理。臂旁核（Parabrachial nullei,PBN）位于脑桥上部,参与大脑的疼痛调节,将来自外周的伤害性信息传递到与疼痛有关的大脑区域。研究表明,降钙素... 详细信息

研究背景:疼痛是一种复杂的体验,不仅涉及有害环境刺激的转导,还涉及大脑的认知和情感处理。臂旁核（Parabrachial nullei,PBN）位于脑桥上部,参与大脑的疼痛调节,将来自外周的伤害性信息传递到与疼痛有关的大脑区域。研究表明,降钙素基因相关肽（Calcitonin gene-related peptide,CGRP）及其受体广泛的分布于机体的各种组织和细胞,在中枢和外周神经系统的伤害性信息传递中起着重要作用,并且免疫组化和原位杂交显示,PBN内有CGRP神经元及CGRP阳性纤维和CGRP受体的分布。近来研究显示,PBN内的CGRP神经元能传输到其他脑区,参与疼痛的调节。研究目的:明确CGRP在大鼠PBN内的痛觉调节作用及其机制。研究方法:利用立体定位仪,在正常大鼠的脑内埋管,微量注射不同剂量的CGRP到PBN内,用热板实验和压板实验检测大鼠对伤害性热刺激和机械刺激的后爪缩爪反应潜伏期（Hindpawwithhdawal latency,HWL）,观察CGRP在正常大鼠PBN内的痛觉调节作用。在明确CGRP在正常大鼠PBN内的痛觉调节作用后,在正常大鼠PBN内注射CGRP受体拮抗剂CGRP 8-37,观察CGRP 8-37对CGRP在大鼠PBN内所诱导的疼痛调节作用的影响。在正常大鼠PBN内微量注射慢病毒包裹的CGRP受体siRNA,敲减CGRP受体,用实时荧光定量聚合酶链式反应（RT-PCR）检测CGRP受体mRNA的表达水平并用免疫印迹法（Western blot）检测CGRP受体蛋白含量的变化,并通过痛觉行为学测试检测CGRP受体敲减后大鼠的HWL的变化。采用慢性坐骨神经轻度结扎（Chronic constriction injury,CCI）法制作神经性痛模型,同样在PBN内微量注射不同剂量的CGRP,通过痛觉行为学测试观察大鼠的HWL,从而明确CGRP在神经性痛大鼠PBN内所发挥的疼痛调节作用,注射CGRP 8-37,观察CGRP受体对CGRP在神经性痛大鼠PBN内疼痛调节作用的影响。随后采用RT-PCR和Western blot技术检测正常大鼠和神经性痛大鼠PBN内降钙素受体样受体（Calcitonin receptor-like peptide,CLR）在 mRNA 和蛋白水平的表达,并用 Western blot检测两种大鼠PBN内细胞膜上CLR蛋白的含量。在大鼠左足足跖注射角叉菜胶,建立炎症性痛模型,按照上述方法在炎症性痛大鼠PBN内注射不同剂量的CGRP和一定剂量的CGRP 8-37,通过热板实验和压板实验观察炎症性痛大鼠的HWL,明确CGRP及CGRP 8-37在炎症性痛大鼠PBN内疼痛调节作用。用RT-PCR检测正常大鼠和炎症性痛大鼠PBN内CGRP受体在mRNA的表达水平并用Western blot检测CGRP受体蛋白含量的变化。结果:热板实验和压板实验显示,在正常大鼠PBN内注射不同剂量的CGRP后,大鼠伤害性热刺激和机械刺激的HWL均显著升高,提示CGRP在正常大鼠PBN内有镇痛作用并且呈剂量依赖性。在正常大鼠PBN内注射CGRP受体拮抗剂后发现,与注射CGRP相比,注射CGRP 8-37后伤害性热刺激和机械刺激的HWL显著降低,说明CGRP 8-37降低了 CGRP在正常大鼠PBN内诱导的镇痛作用,提示CGRP受体介导了 CGRP在正常大鼠PBN内的疼痛调节作用。敲减CGRP受体后,RT-PCR和Western blot显示,CGRP受体在mRNA和蛋白水平的表达均下降,行为学测试显示大鼠PBN内的CGRP受体被敲减后,大鼠伤害性热刺激和机械刺激的HWL均显著下降,CGRP在正常大鼠PBN内诱导的镇痛作用显著降低。在神经性痛大鼠和炎症性痛大鼠中同样发现,CGRP在PBN内有镇痛作用并且呈剂量依赖性,并且CGRP 8-37降低了 CGRP受体在大鼠PBN内诱导的镇痛作用,提示CGRP受体介导了CGRP在神经性痛大鼠和炎症性痛大鼠PBN内的疼痛调节作用。将CGRP在正常大鼠PBN内诱导的镇痛效果与在神经性痛和炎症性痛大鼠PBN内诱导的镇痛作用效果做了比较,发现,在两种疼痛模型大鼠PBN内,CGRP诱导的镇痛作用显著低于正常大鼠。为明确这一现象是否是由于CGRP受体的作用,运用分子生物学技术检测了 CGRP受体。RT-PCR反应结果显示,与正常大鼠相比,神经性痛大鼠PBN内CGRP受体在mRNA水平的表达下降,Western blot结果显示,神经性痛大鼠PBN内CGRP受体在蛋白水平表达下降,并且在细胞膜水平上,CGRP受体含量降低。同样,与正常大鼠相比,在炎症性痛大鼠PBN内CGRP受体的表达显著下降。以上实验结果表明,CGRP受体参与了 CGRP诱导的镇痛作用,并且神经性痛与炎症性痛还

关键词：臂旁核降钙素基因相关肽降钙素基因相关肽受体神经性痛炎症性痛

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降钙素基因相关肽的研究进展

中国小儿急救医学 2015年第5期22卷 337-340页

作者：邓慧玲张玉凤符佳王小燕张瑜谢燕袁娟徐鹏飞西安市儿童医院感染二科 710003

降钙素基因相关肽是迄今发现的最强的舒血管物质，其合成与释放受多种因素调节。降钙素基因相关肽具有多种生物学功能，如血管扩张、心肌正性变力变时、肺保护、脑保护以及免疫调节等，在调节机体多系统的功能中都发挥着重要作用。

关键词：降钙素基因相关肽降钙素基因相关肽受体生理功能

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治疗疼痛的抗体药物的临床进展

药学进展 2024年第1期48卷 31-40页

作者：王永梅彭凯婷王琪王桂凤王春河中国科学院上海药物研究所上海201203

疼痛是一种与实际或潜在组织损伤相关的,或类似的不愉快的感觉和情感体验,它极大地影响着人们的生活质量。临床应用发现,传统的非甾体、阿片类小分子镇痛药存在不同程度的不良反应甚至诱发成瘾性,因此,开发新型无成瘾性的镇痛药物具有... 详细信息

疼痛是一种与实际或潜在组织损伤相关的,或类似的不愉快的感觉和情感体验,它极大地影响着人们的生活质量。临床应用发现,传统的非甾体、阿片类小分子镇痛药存在不同程度的不良反应甚至诱发成瘾性,因此,开发新型无成瘾性的镇痛药物具有迫切的临床需求。作为镇痛药物开发的新方向,抗体类药物可以特异性地阻断疼痛信号传导、降低神经敏化,且无阿片类药物的成瘾性问题,具有更好的安全性。对目前在疼痛治疗领域的抗体类药物的最新应用和临床进展进行总结,主要包括靶向神经生长因子、原肌球蛋白受体激酶A、降钙素基因相关肽、降钙素基因相关肽受体、垂体腺苷酸环化酶激活肽38、垂体腺苷酸环化酶激活肽受体1等的单克隆抗体,可用于治疗类风湿性关节炎、骨关节炎、慢性腰痛、偏头痛等疾病。以期为抗体药物在疼痛治疗中的进一步研发和应用提供思路和指导。

关键词：疼痛神经生长因子原肌球蛋白受体激酶A 降钙素基因相关肽降钙素基因相关肽受体垂体腺苷酸环化酶激活肽38 垂体腺苷酸环化酶激活肽受体1