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降血糖肽固体分散体及其肠溶胶囊的制备

降血糖肽固体分散体及其肠溶胶囊的制备

作者：陈百科上海海洋大学

学位级别：硕士

生物活性肽根据自身不同的序列,可以表现出具有抗血栓、抗高血压、抗菌、抗糖尿病、抗氧化和免疫调节等功能,甚至可以通过作为辅助性佐剂的形式用于治疗/预防新型冠状病毒。但是活性肽不稳定,易受环境影响而变质,口服则易受消化道逆环... 详细信息

生物活性肽根据自身不同的序列,可以表现出具有抗血栓、抗高血压、抗菌、抗糖尿病、抗氧化和免疫调节等功能,甚至可以通过作为辅助性佐剂的形式用于治疗/预防新型冠状病毒。但是活性肽不稳定,易受环境影响而变质,口服则易受消化道逆环境影响,被体内的蛋白酶分解而失去原有的功能性,因此如何提高活性肽的稳定性及其生物利用率成为当前亟待解决的问题;如何使生物活性肽能在储存和消化过程中不被降解失去活性,能在机体器官或组织内发挥其生理活性仍是当前重点问题。在食品、药品研究领域,常常通过固体分散体、微胶囊、脂质体、纳米颗粒和乳液体系等方式来改善功能活性物质的水溶性,提高其稳定性,控制递送、释放,进而提高其生物利用度。但目前尚未有通过固体分散技术提高活性肽稳定性和生物利用率的报道。本论文首先以降血糖肽为原料,通过选择不同种类、不同比例的载体,测定制备成降血糖肽固体分散体后的降血糖肽的累计释放率,并考察其形态表征;接着将降血糖肽固体分散体分别储存在不同温度和不同湿度的条件下,考察期间降血糖肽固体分散体形态、含量和累计释放率的变化;最后选择合适的辅料种类和比例配合降血糖肽固体分散体制成降血糖肽固体分散体肠溶胶囊,测定释放曲线并拟合释放动力学方程,考察释放机制。1.以降血糖肽为原料,添加载体和调节剂,以其对降血糖肽累计释放率的影响为指标,选择合适的载体和调节剂种类及比例,并辅以红外、扫描电镜和透射电镜等手段加以分析。结果表明:以尤特奇L-100为肠溶载体,羟丙基甲基纤维素为调节剂,制备成降血糖肽固体分散体可以有效地提高降血糖肽的累计释放率,在最佳比例下,即降血糖肽、Eudragit L-100和调节剂的比例为1:2:0.2,降血糖肽固体分散体2 h的累计释放率能达到93.54%。同时,经过固体分散技术处理后,降血糖肽的DPP-Ⅳ抑制率仍具有较高水平。扫描电镜和透射电镜分析发现制备成降血糖肽固体分散体前后活性肽原料、EL-100、HPMC的表观形态有明显的不同;红外谱图分析发现固体分散体中活性肽和载体材料未发生化学反应,载体材料包埋活性肽时两者可能只是发生了氢键键合。2.探究降血糖肽固体分散体的稳定性变化。制备成降血糖肽固体分散体后稳定性有了显著提升,在未制成降血糖肽固体分散体之前,本身2 h的累计释放率仅有57.21%,并且储存5天后,累计释放率下降了30%,10天后仅剩下18.24%。而制备成降血糖肽固体分散体之后其2 h的累计释放率达到94.25%,储存5天后,固体分散体中的降血糖肽的累计释放率仅下降不到1%,10天时,累计释放率仍有90.32%。此外,通过影响因素实验发现,降血糖肽固体分散体对温度最为敏感,其次是湿度。在25℃条件下放置10 d的固体分散体外观、含量和45 min时的累计释放率变化不明显(小于5%),符合要求;在湿度55%±5%条件下放置10天的降血糖肽固体分散体的吸湿增重、含量、累计释放率变化小于5%,符合稳定性要求。加速试验表明降血糖肽固体分散体能在较长时间(38天)内保持稳定性,其外观、含量及45 min的累计释放率变化未超过限定要求,为降血糖肽固体分散体的包装、运输、贮存条件的确定提供依据,对其工业化生产提供了一定的参考。但对其具体的有效性仍须通过长期试验和中试或中试规模样品的实验结果来提供参考依据。总的来说,降血糖肽固体分散体可在低温、干燥的环境中密封保存。3.以休止角、Hausner比值、Carr’s指数和川北方程为指标选择合适的辅料种类及比例,结合肠溶胶囊壳,制备降血糖肽固体分散体肠溶胶囊,测定释放曲线并进行释放模型方程拟合,分析释放过程。结果表明:以微粉硅胶为润滑剂,且微粉硅胶与降血糖肽固体分散体的比例为1:9时,流动性最佳。通过比对发现胶囊内容物的最佳拟合模型为Ritger-Peppas方程为(R=0.9921),内容物的扩散体系为Fickian扩散机制;肠溶胶囊的最佳拟合模型为一级释放方程(R=0.8586),肠溶胶囊的释放以非Fick扩散为主,即扩散和溶蚀协同作用释放。

关键词：降血糖肽固体分散体稳定性肠溶胶囊释放机制

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响应面法优化香榧降血糖肽制备工艺

中国粮油学报 2023年第7期38卷 148-154页

作者：薛加雯王鹏骆晓慧吴莎萍朱巧楠何志平叶伟华吴峰华浙江农林大学食品与健康学院临安311300 浙江榧香源食品加工有限公司丽水323000

以香榧饼粕为原料,α-葡萄糖苷酶抑制率和蛋白水解度为主要考察指标,通过单因素实验和响应面法优化香榧降血糖肽的制备工艺。结果表明,香榧降血糖肽的最优酶解工艺参数为:碱性蛋白酶添加量10440.0 U/g,酶解pH值10.0,酶解温度46.0℃,酶... 详细信息

以香榧饼粕为原料,α-葡萄糖苷酶抑制率和蛋白水解度为主要考察指标,通过单因素实验和响应面法优化香榧降血糖肽的制备工艺。结果表明,香榧降血糖肽的最优酶解工艺参数为:碱性蛋白酶添加量10440.0 U/g,酶解pH值10.0,酶解温度46.0℃,酶解时间5.2 h,此时酶解制得蛋白水解度为24.38%的香榧降血糖肽,α-葡萄糖苷酶抑制率为59.11%。

关键词：香榧饼粕酶解工艺降血糖肽 α-葡萄糖苷酶抑制率

藜麦、黑小麦降血糖肽在血糖调节面包的应用及其降糖活性研究

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藜麦、黑小麦降血糖肽在血糖调节面包的应用及其降糖活性研究

作者：李凤洁昆明理工大学

学位级别：硕士

藜麦是一种富含优质蛋白质的假谷物,具有均衡的氨基酸比例和完整的必需氨基酸种类,是潜在生物活性肽的良好来源。黑小麦具有比常规黄小麦更高的蛋白质和必需氨基酸含量以及平衡的氨基酸组成,亦是很好的肽来源。全球糖尿病患病率的增加... 详细信息

藜麦是一种富含优质蛋白质的假谷物,具有均衡的氨基酸比例和完整的必需氨基酸种类,是潜在生物活性肽的良好来源。黑小麦具有比常规黄小麦更高的蛋白质和必需氨基酸含量以及平衡的氨基酸组成,亦是很好的肽来源。全球糖尿病患病率的增加已成为公共卫生的一个重大问题,根据国际糖尿病联盟报告,全球90%的糖尿病患者为2型糖尿病。尽管现有的药物例如胰岛素、二甲双胍、阿卡波糖等具有良好的抗糖尿病作用,但也具有一定的副作用。生物活性肽具有分子量小、易吸收且副作用小等特点。目前正大力研究食物在2型糖尿病中的作用,从优质蛋白质中制备具有α-淀粉酶抑制活性的血糖调节肽可作为一种新型天然的降血糖成分进行膳食干预,辅助解决糖尿病人饮食与血糖控制的问题,具有较高的潜在价值。本论文利用黑曲霉分别对藜麦和黑小麦进行固态发酵制备藜麦降糖肽和黑小麦降糖肽,将制备的降糖肽部分取代小麦粉制备血糖调节面包,研究面包的颜色、质构、体外模拟消化、血糖指数(GI)、血糖负荷(GL)、抗炎活性、抗氧化活性和小鼠餐后2 h血糖水平;进一步对降糖肽进行纯化和序列鉴定、体外活性测定以及与α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的分子对接分析,并结合高血糖动物模型研究降糖肽的血糖调节作用。主要研究结果如下:1、利用黑曲霉固态发酵藜麦和黑小麦,分别制备藜麦降糖肽和黑小麦降糖肽。用超滤膜超滤得到5 k Da的藜麦肽(QD)、5 k Da的黑小麦肽(BD)。QX、QD、BX和BD对α-淀粉酶抑制活性的IC值分别为3.20、2.83、1.98和1.92 mg/m L,抗炎活性的IC值分别为1.16、1.76、6.30和3.00 mg/m L,对DPPH自由基清除活性的IC值分别为0.29、0.42、0.95和1.04 mg/m L,对ABTS自由基清除活性的IC值分别为0.73、1.04、1.03和1.50 mg/m L。综合考虑各组分的生物活性,藜麦肽中QX的α-淀粉酶抑制活性低于QD,但抗炎活性和抗氧化活性均显著优于QD;黑小麦肽中,BX对α-淀粉酶的抑制活性与BD没有显著性差异,抗炎活性显著低于QD,抗氧化活性显著高于QD。因此,以QX、QD、BX和BD部分替代面包配料中的小麦粉制备降糖肽血糖调节面包,对QX和BX进行进一步纯化研究。2、分别以0%、3%和6%的QX、QD、BX和BD替代面包配料中的小麦粉制备血糖调节面包。结果显示,QX、QD、BX和BD的添加使得面包皮和面包芯的亮度值(L*)和白度指数(WI)降低。血糖调节面包制作完成放于自封袋置于干燥器中分别存放2天和3天进行质构测定。与对照组相比,QX对面包芯的硬度没有影响,以6%QD替代小麦粉的血糖调节面包在存放2天即达到较高的硬度,存放至3天时硬度不会增加。QX和QD对血糖调节面包的弹性不会造成影响。添加BX和BD的血糖调节面包硬度在存放2天时高于对照组面包,存放至3天时,血糖调节面包硬度增加率最高的是添加3%BD的面包(83.17%),低于对照组面包(129.54%)。在体外模拟消化过程中,藜麦降糖肽血糖调节面包和黑小麦降糖肽血糖调节面包的还原糖释放量低于对照组;添加量为6%的QX、QD、BX和BD血糖调节面包的快速消化淀粉含量分别为47.33%、50.57%、46.17%和50.42%,均显著低于对照组面包(57.42%)。与对照组的GI值(100)和GL值(16.30)相比,添加3%和6%的QX、QD、BX和BD血糖调节面包的GI值和GL值均显著降低;添加6%的QD面包的GI值和GL值降低幅度最大,分别降低了20.53%和26.99%;添加6%BX的面包GI值最低(79.40),GL值最低的是添加6%BD的面包(12.11)。所有添加QX、QD、BX和BD血糖调节面包的抗炎活性和抗氧化活性显著优于对照组面包,且添加6%的血糖调节面包活性显著优于添加3%的面包。所有摄入血糖调节面包糖尿病小鼠的血糖水平显著低于糖尿病小鼠摄入对照组面包餐后2 h血糖水平(23.62 mmol/L)。其中,摄入添加6%QX和QD的血糖调节面包小鼠的血糖水平没有显著性差异,分别为9.80和8.82 mmol/L,摄入添加6%的BD的血糖调节面包的血糖水平最低为7.78 mmol/L。3、通过G-25凝胶柱层析、RP-HPLC对QX、BX进一步分离纯化,再经LC-MS/MS进行氨基酸序列鉴定,鉴定出8个藜麦肽(TLEP、KVLPP、AAAP、VGGP、LVNEH、VLKPP、LKPP、LVKPP)和2个黑小麦肽(YAYF和VSSL)。BIOPEP数据库进行抗糖尿病活性预测结果显示,10个肽的预测概率均>0.5;α-淀粉酶抑制活性结果显示,TLEP、AAAP、VGGP对α-淀粉酶的抑制活性最强,IC值分别为1.49、1.48和1.54 mg/m L;YAYF和VSSL对α-淀粉酶抑制活性的IC值分别为

关键词：藜麦黑小麦降血糖肽小麦面包糖尿病

海地瓜降血糖肽的分离、纯化、鉴定及活性评价

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海地瓜降血糖肽的分离、纯化、鉴定及活性评价

作者：张晓艺兰州理工大学

学位级别：硕士

海地瓜(Acaudina molpadioides)属于海参纲芋海参科棘皮动物门,是低值海参的一种,又称之为茄参。我国沿海均有分布,资源相当丰富。海地瓜体壁除了多糖、皂苷、胶原蛋白等化学成分之外,其体壁还含有多种活性多肽,具有降血压、防止肝损伤... 详细信息

海地瓜(Acaudina molpadioides)属于海参纲芋海参科棘皮动物门,是低值海参的一种,又称之为茄参。我国沿海均有分布,资源相当丰富。海地瓜体壁除了多糖、皂苷、胶原蛋白等化学成分之外,其体壁还含有多种活性多肽,具有降血压、防止肝损伤、降低脂肪肝及降血糖等多种生理功能,在食品、医疗等领域有很好的应用,目前有关海参的研究对象主要集中于对刺参、梅花参等经济价值较高的品种,对经济价值较低的海地瓜多肽研究国内报道不多。因此,本课题以利用价值较低的海地瓜为原料,利用基于低共熔溶剂的双水相溶剂系统对海地瓜降血糖肽进行分离富集,通过反向液相色谱技术和中压制备液相色谱技术联用对海地瓜降血糖肽进一步分离纯化,得到目标多肽。利用Edman降解法鉴定目标多肽的氨基酸序列,利用固相合成法合成目标多肽,应用α-淀粉酶活性抑制实验对海地瓜降血糖肽进行活性评价并探讨其构效关系。主要研究内容如下:(1)基于低共熔溶剂的双水相溶剂系统的参数优化以α-淀粉酶活性抑制实验为评价方法,考察低共熔溶剂的质量、海地瓜多肽的质量、分离时间、磷酸氢二钾浓度、温度、pH值等条件对海地瓜降血糖肽的分离富集效果影响,得到最佳分离富集条件。结果表明,最佳的双水相溶剂系统条件为低共熔溶剂质量为14 g,海地瓜多肽质量为200 mg,磷酸氢二钾浓度为0.95 g/mL,分离时间为150min,pH值没有影响,温度控制在15℃-40℃。(2)海地瓜降血糖肽的分离纯化通过基于低共熔溶剂的双水相溶剂系统对海地瓜进行降血糖肽的分离与富集,利用反相液相色谱和中压制备液相色谱对富集后的海地瓜降血糖肽进一步分离纯化,经过多次反复分离纯化,最终得到目标多肽:H11d-1。(3)目标多肽H11d-1的鉴定通过Edman降解法对目标多肽进行氨基酸序列的鉴定。结果表明:鉴定多肽氨基酸序列为:Gly-Pro-Ala-Gly-Pro-Thr/Ile-Gly-Ala-Gln,其中N端第六个位点氨基酸包含两个氨基酸Thr和Ile,同时含量较低,考虑可能修饰或其他结构,N端第九个位点氨基酸含量较低。利用高效液相色谱法对基于低共熔溶剂的双水相溶剂系统的参数优化结果进行验证,结果表明,最佳的双水相溶剂系统条件为低共熔溶剂质量为14 g,海地瓜多肽质量为200 mg,磷酸氢二钾浓度为0.95 g/mL,分离时间为150 min,pH值没有影响,温度控制在15℃-40℃。结果与上述(1)的结论一致。(4)目标多肽H11d-1的合成利用固相合成法合成H11d-1多肽,根据鉴定结果的多样性,合成四条多肽分别是:P1:Gly-Pro-Ala-Gly-Pro-Thr-Gly-Ala-GlnP2:Gly-Pro-Ala-Gly-Pro-Thr-Gly-AlaP3:Gly-Pro-Ala-Gly-Pro-Iler-Gly-Ala-GlnP4:Gly-Pro-Ala-Gly-Pro-Iler-Gly-Ala对四条多肽进行α-淀粉酶活性抑制实验评价。结果表明:P2、P3、P4对α-淀粉酶有抑制活性,具有降血糖作用,当浓度为22 mg/mL时,海地瓜降血糖肽P2、P3、P4对α-淀粉酶抑制率平均达到50%左右。经构效关系分析,目标多肽氨基酸序列中对α-淀粉酶起抑制作用的氨基酸可能是Gly、Pro、Ala、Ile。

关键词：海地瓜降血糖肽双水相溶剂系统分离纯化合成

双酶法制备马鹿茸降血糖肽工艺优化及其对α-葡萄糖苷酶的抑制效果

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食品科学 2017年第6期38卷 88-95页

作者：包美丽杨添植张立钢赵玉红东北林业大学林学院黑龙江哈尔滨150040 黑龙江民族职业学院黑龙江哈尔滨150066 东北农业大学食品学院黑龙江哈尔滨150030

为探索制备马鹿茸降血糖肽的最佳工艺条件,以α-葡萄糖苷酶抑制率为指标,从碱性蛋白酶、风味蛋白酶、中性蛋白酶和胰蛋白酶中筛选出两种酶,根据其体外降血糖效果确定酶的作用顺序,再以水解度、α-葡萄糖苷酶抑制率和蛋白质回收率为指标... 详细信息

为探索制备马鹿茸降血糖肽的最佳工艺条件,以α-葡萄糖苷酶抑制率为指标,从碱性蛋白酶、风味蛋白酶、中性蛋白酶和胰蛋白酶中筛选出两种酶,根据其体外降血糖效果确定酶的作用顺序,再以水解度、α-葡萄糖苷酶抑制率和蛋白质回收率为指标进行单因素试验和正交试验,优化降血糖肽制备工艺条件。结果表明:碱性蛋白酶和风味蛋白酶比中性蛋白酶和胰蛋白酶更适合用于制备马鹿茸降血糖肽。采用碱性蛋白酶-风味蛋白酶顺序对马鹿茸进行水解,所得酶解产物的α-葡萄糖苷酶抑制率、蛋白质回收率和水解度较高,分别为21.11%、39.12%、19.88%。通过单因素试验和正交试验确定双酶酶解最佳工艺条件为先用碱性蛋白酶在p H 8.0、60℃、底物质量分数12%、加酶量5 000 U/g条件下酶解3 h,再用风味蛋白酶于p H 6.5、45℃、底物质量分数5%、加酶量6 000 U/g条件下酶解1 h。双酶分步水解终产物的α-葡萄糖苷酶抑制率受质量浓度的影响,当质量浓度为3 mg/m L时,α-葡萄糖苷酶抑制率可达94.09%,IC50值为1.82 mg/m L。碱性蛋白酶-风味蛋白酶双酶分步水解马鹿茸可获得高α-葡萄糖苷酶抑制率的降血糖肽。

关键词：马鹿茸酶解降血糖肽

油用牡丹籽粕降血糖肽的制备、鉴定及基于分子对接的序列设计

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油用牡丹籽粕降血糖肽的制备、鉴定及基于分子对接的序列设计

作者：魏睿婷西北大学

学位级别：硕士

Ⅱ型糖尿病已经成为世界范围内一种威胁人类健康的慢性疾病。α-葡萄糖苷酶是一种水解酶,具有水解糖和转糖苷的双重作用,抑制酶活性可以延迟多糖和寡糖转化为可吸收的单糖的进程。开发天然来源的α-葡萄糖苷酶抑制剂成为现今功能食品的... 详细信息

Ⅱ型糖尿病已经成为世界范围内一种威胁人类健康的慢性疾病。α-葡萄糖苷酶是一种水解酶,具有水解糖和转糖苷的双重作用,抑制酶活性可以延迟多糖和寡糖转化为可吸收的单糖的进程。开发天然来源的α-葡萄糖苷酶抑制剂成为现今功能食品的热门研究领域。油用牡丹是近些年来木本油料作物栽培的重要品种之一,榨油后的籽粕富含膳食纤维、蛋白质,其氨基酸组成丰富,成本低廉易得,可以作为植物蛋白的天然来源。目前籽粕主要作为废弃物直接丢弃,少量作为动物饲料或其他用途,对油用牡丹籽粕中的蛋白质进行开发利用具有应用前景和实际意义。本研究以油用牡丹籽粕为原料,通过双酶连续水解蛋白质制备降血糖肽,对酶解产物进行连续分离、纯化和鉴定,共鉴定得到六个新型降血糖肽。此外,通过酶抑制动力学分析、分子对接研究和多肽序列设计,探究了潜在的多肽降血糖机理。具体研究内容如下:1.蛋白质提取和酶解产物制备。采用正己烷对油用牡丹籽粕脱脂,通过碱溶酸沉法制得油用牡丹籽粕蛋白(PSMP),比较5种不同酶切位点蛋白酶的水解度,可得知使用碱性蛋白酶和胰蛋白酶酶解时具有最高的水解度,分别是12.84±0.80%和9.77±0.04%。使用连续酶解的方法酶解蛋白质,测定两种不同酶解方式产物的氨基酸组成,两者都富含谷氨酸(16.9 g/100 g和16.2 g/100 g)和必需氨基酸,但是先后使用碱性蛋白酶和胰蛋白酶酶解方式的产物具有更高的氨基酸含量(60.6 g/100g)和更强的降血糖活性(IC=0.115±0.026 mg/m L)。2.降血糖多肽的分离纯化及鉴定。以α-葡萄糖苷酶抑制活性为指标,对PSMP酶解产物进行超滤,将分子量降血糖多肽组分,通过Nano LC-ESI-MS/MS对该组分进行氨基酸序列鉴定和分子量测定,共得到六个新型短肽:YFFM(Tyr-Phe-Phe-Met,622.246),TYPLL(Thr-Tyr-Pro-Leu-Leu,605.343),SLLPF(Ser-Leu-Leu-Pro-Phe,575.332),YSPAPL(Tyr-Ser-Pro-Ala-Pro-Leu,647.340),WLLDPM(Trp-Leu-Leu-Asp-Pro-Met,774.386),SLLGDFM(Ser-Leu-Leu-Gly-Asp-Phe-Met,797.363)。体外α-葡萄糖苷酶抑制实验证明多肽YFFM具有最高的降血糖活性,其IC=1.099±0.037 mg/m L。3.多肽YFFM与α-葡萄糖苷酶的抑制动力学研究。通过测定不同底物浓度下不同样品浓度的酶促反应速度,以及在酶浓度不变时改变多肽浓度和底物浓度,做出Lineweaver-Burk双倒数曲线图,判断可得多肽YFFM是α-葡萄糖苷酶的可逆的混合型抑制剂,经计算抑制常数K=0.8247 m M,表观系数α=0.5132。4.构效关系研究及多肽序列设计。使用Peptide Ranker,Toxin Pred,Innovagen和admet SAR在线工具对鉴定出的六个肽进行生物活性、毒性、水溶性和ADMET性质的预测,结合计算机分子对接模拟,阐明受体-配体之间的相互作用位点,探究得到α-葡萄糖苷酶与抑制剂的活性关系可能与多肽上特殊的氨基酸残基有关。此外以YFFM为基础序列,结合氨基酸基团上产生的相互作用,设计得到具有更强α-葡萄糖苷酶抑制活性的降血糖多肽FFFM(Phe-Phe-Phe-Met,590.733)和YYFM(Tyr-Tyr-Phe-Met,622.732),其IC分别为0.145±0.026 mg/m L和0.191±0.030 mg/m L。结合分子对接实验,这个两个多肽与α-葡萄糖苷酶上的残基分别形成5个和4个氢键,证实这两种四肽分子都能进入酶分子的活性口袋内并产生稳定结合,可以作为潜在的α-葡萄糖苷酶抑制剂。

关键词：油用牡丹籽粕降血糖肽纯化鉴定分子对接序列设计

双酶法水解罗非鱼下脚料制备降血糖肽的工艺研究

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农产品加工 2021年第1期 31-34页

作者：赵阔罗山王涛陈艳梁爱文邹易郑联合海南省粮油科学研究所海南琼海571400

以水解度和α-葡萄糖苷酶抑制率为评价指标,确定双酶复合水解罗非鱼下脚料的方案,并通过单因素试验和正交试验进行优化,最后得到最适酶解工艺参数为先在碱性蛋白酶在温度50℃,加酶量10000 U/g,pH值9.5,底物质量分数6%条件下水解;再在胰... 详细信息

以水解度和α-葡萄糖苷酶抑制率为评价指标,确定双酶复合水解罗非鱼下脚料的方案,并通过单因素试验和正交试验进行优化,最后得到最适酶解工艺参数为先在碱性蛋白酶在温度50℃,加酶量10000 U/g,pH值9.5,底物质量分数6%条件下水解;再在胰蛋白酶在温度37℃,加酶量10000 U/g,pH值8条件下水解100 min。此工艺条件下罗非鱼下脚料水解度、水解产物的α-葡萄糖苷酶抑制率分别为48.26%和41.46%。

关键词：罗非鱼加工下脚料降血糖肽双酶 α-葡萄糖苷酶抑制率

响应面法优化超声辅助酶解制备大豆降血糖肽的研究

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食品工程 2020年第1期 20-23,50页

作者：段双庚张佳鑫江明珠江苏科技大学生物技术学院江苏镇江212018 江苏省大港中学江苏镇江212028

超声预处理大豆蛋白,响应面分析(RSA)试验优化酶法制备新型降血糖肽。以酶解产物对α-葡萄糖苷酶的抑制率为评价指标,筛选蛋白酶;在单因素试验的基础上,对超声预处理工艺及酶解过程进行RSA试验。实验结果表明,最佳蛋白水解酶为胰蛋白酶... 详细信息

超声预处理大豆蛋白,响应面分析(RSA)试验优化酶法制备新型降血糖肽。以酶解产物对α-葡萄糖苷酶的抑制率为评价指标,筛选蛋白酶;在单因素试验的基础上,对超声预处理工艺及酶解过程进行RSA试验。实验结果表明,最佳蛋白水解酶为胰蛋白酶;经过RSA优化得到最佳条件为:酶解时间22.0 min,加酶量6416.61 U/g,酶解底物浓度2.10%;超声预处理时间20.9 min,超声功率245.9 W,超声底物浓度6.27%,在此条件下大豆蛋白源多肽的抑制率64.79%,多肽质量浓度4.15 mg/mL。RSA试验优化后,多肽的α-葡萄糖苷酶抑制率比相同条件未使用超声预处理的提高了19.01%。

关键词：超声波预处理大豆蛋白降血糖肽响应面分析

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罗非鱼下脚料酶解制备降血糖肽的工艺研究

现代食品 2020年第14期5卷 93-96,100页

作者：赵阔王涛陈艳张红建邹易梁爱文郑联合海南省粮油科学研究所海南琼海571400

研究以罗非鱼加工下脚料为原料制备降血糖肽的工艺。从5种常用蛋白酶(胃蛋白酶、胰蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶和木瓜蛋白酶)中筛选出了碱性蛋白酶作为目标酶;之后通过单因素试验和正交试验对碱性蛋白酶水解工艺进行优化,得到最适... 详细信息

研究以罗非鱼加工下脚料为原料制备降血糖肽的工艺。从5种常用蛋白酶(胃蛋白酶、胰蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶和木瓜蛋白酶)中筛选出了碱性蛋白酶作为目标酶;之后通过单因素试验和正交试验对碱性蛋白酶水解工艺进行优化,得到最适酶解条件:温度50℃、加酶量1000 U·g^-1、pH9.5、底物浓度6%,此工艺条件下水解度和α-葡萄糖苷酶抑制率分别达到28.19%和30.12%。

关键词：罗非鱼加工下脚料降血糖肽酶解 α-葡萄糖苷酶抑制率