检索结果-南通市图书馆

犏牛BMP4基因的克隆、生物信息学分析及在附睾的表达研究

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中国畜牧杂志 2023年第2期59卷 286-290页

作者：王鹏陈晓英李春海潘美兰李柯锐赵旺生西南科技大学生命科学与工程学院四川绵阳621010 西藏自治区农牧科学院畜牧兽医研究所西藏拉萨850009

骨形态发生蛋白4(BMP4)基因在哺乳动物生殖机能方面起着重要的调控作用。本研究通过分子克隆技术对犏牛BMP4基因的编码区序列进行克隆,分析BMP4基因的生物信息学特征及其在附睾组织中的表达特点。生物信息学分析结果显示:犏牛BMP4基因CD... 详细信息

骨形态发生蛋白4(BMP4)基因在哺乳动物生殖机能方面起着重要的调控作用。本研究通过分子克隆技术对犏牛BMP4基因的编码区序列进行克隆,分析BMP4基因的生物信息学特征及其在附睾组织中的表达特点。生物信息学分析结果显示:犏牛BMP4基因CDS区片段长1 371 bp,编码456个氨基酸;BMP4蛋白存在一层跨膜结构,肽链中亲水性氨基酸的数量显著高于疏水性氨基酸,表明具有亲水性;组成犏牛BMP4蛋白的456个氨基酸中,100个氨基酸位于α螺旋区,占氨基酸总数的21.93%,82个氨基酸位于延伸链区,占总数的17.98%,14个氨基酸位于β转角区,占总数的3.07%,260个氨基酸以无规则状态存在,占总数的57.02%;犏牛BMP4氨基酸序列与牦牛、绵羊等物种存在较高的同源性,分别为99.2%和99.3%。qPCR分析结果显示:犏牛BMP4基因在附睾体部的表达显著高于头部和尾部。本研究为进一步探讨犏牛精子成熟机制及BMP4基因在犏牛附睾不同部位的作用机制提供了基础数据。

关键词：犏牛附睾 BMP4基因生物信息学分析

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附睾平滑肌瘤1例报告

中华泌尿外科杂志 2023年第5期44卷 388-389页

作者：刘信张育军雒向宁张会波王冬陕西中医药大学附属医院泌尿外科咸阳712000 陕西中医药大学咸阳712000

平滑肌瘤是起源于平滑肌细胞的良性肿瘤,很少累及男性泌尿生殖系统,本文报道1例附睾平滑肌瘤。患者因附睾肿瘤行根治性睾丸切除术,术后病理诊断为附睾平滑肌瘤。术后随访9个月,未见复发。

关键词：附睾平滑肌瘤诊断治疗

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附睾精子抗氧化保护机制研究进展

中国畜牧兽医 2022年第1期49卷 91-97页

作者：许娇霞张家新内蒙古农业大学动物科学学院内蒙古自治区动物遗传育种与繁殖重点实验室呼和浩特010018

通过附睾转运,精子经历了一系列的生化和形态变化逐渐成熟,在精子成熟的过程中,其胞质成分含量逐渐减少,因此精子对氧化应激更为敏感,进而导致精子结构和功能受到损害,故而附睾管腔微环境中抗氧化酶的作用非常重要。活性氧(ROS)在精子... 详细信息

通过附睾转运,精子经历了一系列的生化和形态变化逐渐成熟,在精子成熟的过程中,其胞质成分含量逐渐减少,因此精子对氧化应激更为敏感,进而导致精子结构和功能受到损害,故而附睾管腔微环境中抗氧化酶的作用非常重要。活性氧(ROS)在精子功能中起着双重作用:生理水平的ROS可促进精子受精前的获能,而过高水平ROS则会导致精子发生氧化损伤。在附睾中清除多余ROS的抗氧化酶主要有超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPXs)以及过氧化物酶(PRDXs),但是不同年龄的哺乳动物附睾不同部位中各种抗氧化酶的含量均会发生变化,不同抗氧化酶对ROS也具有不同的清除机制。当附睾缺乏某一抗氧化酶时,会使精子DNA受损、精子质量下降,最终导致异常生殖结果增加。因此,哺乳动物附睾中各类抗氧化酶需要相互协调将ROS维持在生理水平,但有关这方面的研究报道较少。附睾上皮细胞分泌的抗氧化酶以附睾小体的形式传递给精子,以清除自身有氧代谢以及异常精子所产生的ROS,进而保护精子正常成熟。作者综述了附睾精子所面临的氧化应激以及附睾中各类抗氧化酶对精子的保护作用。

关键词：附睾精子抗氧化酶活性氧氧化应激

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高低精子活力的鸡睾丸和附睾转录组系统分析

中国农业大学学报 2023年第12期28卷 144-152页

作者：原佳妮陈少康赵延辉侍玉梅齐晓龙盛熙晖曹永春邢凯北京农学院动物科学技术学院北京102206 北京市畜牧总站北京100107

为探究精子活力与睾丸和附睾组织对种公鸡基因表达的影响,本研究选取精子活力存在显著差异的海兰褐种公鸡8只(高活力4只,低活力4只),屠宰后采集其睾丸和附睾组织进行转录组测序。利用DESeq2的双因素模块筛选不同精子活力组间和不同组织... 详细信息

为探究精子活力与睾丸和附睾组织对种公鸡基因表达的影响,本研究选取精子活力存在显著差异的海兰褐种公鸡8只(高活力4只,低活力4只),屠宰后采集其睾丸和附睾组织进行转录组测序。利用DESeq2的双因素模块筛选不同精子活力组间和不同组织间的差异表达基因,并进行功能富集分析。结果表明:1)2个组织高精子活力和低精子活力组间的差异表达基因有112个;在高精子活力组高表达的基因有32个,低精子活力组高表达的基因有80个。高低精子活力间差异表达基因显著富集于细胞因子-细胞因子受体相互作用、产生IgA的肠道免疫网络和甘油磷脂代谢3条通路,其中CTRP3、TDRD5、KATNAL2、SOCS3和CSF3等差异表达基因可能是调控鸡精子活力的重要基因。2)睾丸和附睾组织间鉴定出9 212个差异表达基因,在睾丸组织高表达的基因有5 206个,在附睾组织中高表达的基因有4 006个。睾丸特异性高表达基因显著富集在细胞周期、细胞核质转运、减数分裂和甘油磷脂代谢等8条通路,其中YTHDC2、MEIG1、GTSF1、JAM3和SFMBT1等差异表达基因在精子发生过程中发挥着重要作用。在附睾组织高表达的基因参与了MAPK信号通路、紧密连接、谷胱甘肽代谢等信号通路,ACE和MMEL1是附睾中发挥作用的关键基因。综上,不同组织和精子活力对种公鸡繁殖相关基因的表达都有影响,为进一步探究影响种公鸡繁殖性能的分子调控机制奠定基础。

关键词：种公鸡 RNA-Seq 睾丸附睾精子活力

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降钙素基因相关肽在牦牛附睾中的定位与表达

西北农林科技大学学报（自然科学版） 2023年第3期51卷 19-28页

作者：陈少宇袁莉刚杨大鹏王华张勇甘肃农业大学动物医学院甘肃省动物生殖生理及繁殖调控重点实验室甘肃兰州730070

【目的】分析降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)在牦牛附睾中的转录水平及蛋白分布特点,探究其对精子运输及成熟的功能。【方法】采集6头3~4岁健康成年牦牛的附睾,将其解剖为头、体、尾三部分,应用实时荧光定量PC... 详细信息

【目的】分析降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)在牦牛附睾中的转录水平及蛋白分布特点,探究其对精子运输及成熟的功能。【方法】采集6头3~4岁健康成年牦牛的附睾,将其解剖为头、体、尾三部分,应用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)、Western blotting分别检测CGRP mRNA和蛋白在附睾的头、体、尾中的表达水平;采用H.E染色法分析附睾组织结构特点;采用免疫组化和免疫荧光技术分析附睾各部分CGRP的分布及表达情况。【结果】RT-qPCR结果表明,CGRP在牦牛附睾头的相对表达量显著高于附睾体和附睾尾(P附睾尾表达量最低(P附睾尾中的表达水平显著高于附睾头和附睾体(P附睾组织纤毛长度从头部至尾部逐渐降低,差异显著;附睾头间质组织的间质平滑肌层厚度显著低于附睾体和附睾尾(P附睾尾分布显著,上皮厚度亦在附睾尾显著降低。免疫组化及免疫荧光分析发现,CGRP主要分布于附睾上皮、基底膜及附睾间质小血管,附睾上皮晕细胞的表达强度最高。【结论】CGRP主要分布于牦牛附睾上皮和间质小血管,提示CGRP对牦牛附睾间质小血管的收缩发挥调节作用。牦牛附睾尾晕细胞数量最多,晕细胞中CGRP的高强度表达提示其可能参与附睾尾的免疫调节。

关键词：降钙素基因相关肽(CGRP) 牦牛附睾晕细胞

脂联素及其受体在不同年龄牦牛附睾中的表达与分布

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中国兽医科学 2024年

作者：祁正满崔燕余四九张虔马睿牛悦悦卢凯翟国亮甘肃农业大学动物医学院甘肃省牛羊胚胎技术研究中心

为研究脂联素（APN）及其受体在不同年龄牦牛附睾中的表达与定位，笔者采集幼年（0.5～1岁）、成年（4～5岁）、老年（7岁）牦牛附睾（头、体、尾），通过实时荧光定量 PCR（qRT-PCR）、蛋白免疫印迹（Western-blotting）和免疫组织化学... 详细信息

为研究脂联素（APN）及其受体在不同年龄牦牛附睾中的表达与定位，笔者采集幼年（0.5～1岁）、成年（4～5岁）、老年（7岁）牦牛附睾（头、体、尾），通过实时荧光定量 PCR（qRT-PCR）、蛋白免疫印迹（Western-blotting）和免疫组织化学（IHC）方法检测APN及其受体1（APNR1）和受体2（APNR2）在附睾（头、体、尾）中的表达与定位。qRT-PCR结果显示，APN和APNR1在老年牦牛附睾尾中的mRNA转录水平显著高于幼年和成年（P附睾头、体、尾中的转录水平均呈上升趋势，并且APNR2在老年牦牛附睾尾中的转录水平最高（P附睾头、体、尾中的表达量呈下降趋势（P附睾尾表达量最高（P附睾中APNR1的蛋白表达量显著高于幼年和成年牦牛（P附睾尾表达量最高；APNR2蛋白在幼年牦牛附睾头中表达量最高，而在成年和老年牦牛附睾头、体、尾中均呈上升趋势，且在老年牦牛附睾尾中表达量最高（P附睾上皮细胞、纤毛、间质和精子中。研究结果表明，APN及其受体在牦牛性成熟前后的表达差异显著，推测其对于牦牛附睾中精子成熟、转运和储存等方面具有重要的意义，本实验为高原环境下对于雄性牦牛生殖调控的研究提供了一定的理论依据。

关键词：牦牛附睾脂联素脂联素受体

附睾特异性表达羧基酯酶CES5A在精子获能和雄性生殖中的功能研究

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Asian Journal of Andrology 2015年第2期17卷 292-297,I0010,I0011页

作者： Yan-Fei Ru Hai-Min Xue Zi-Mei Ni Dong Xia Yu-Chuan Zhou Yong-Lian Zhang Shanghai Key Laboratory of Molecular Andrology State Key Laboratory of Molecular Biology Institute of Biochemistry and Cell Biology Shanghai Institute for Biological Sciences Chinese Academy of Sciences Shanghai China University of Chinese Academy of Sciences Beijing China Institute of Animal Husbandry and Veterinary Sciences Shanghai Academy of Agricultural Sciences Shanghai China Shanghai Institute of Planned Parenthood Research Shanghai China.

在本文中，我们用慢病毒介导的RNA干扰技术研究了附睾特异性表达基因Ces5a在精子成熟和功能中所起的作用。Ces5a是最近克隆到的一个附睾特异性表达的羧基酯酶（CEs）家族的新基因。目前己经在人、小鼠及猫等物种中发现了Ces5a的同源基因... 详细信息

在本文中，我们用慢病毒介导的RNA干扰技术研究了附睾特异性表达基因Ces5a在精子成熟和功能中所起的作用。Ces5a是最近克隆到的一个附睾特异性表达的羧基酯酶（CEs）家族的新基因。目前己经在人、小鼠及猫等物种中发现了Ces5a的同源基因。CES5A蛋白主要在附睾的体部和尾部特异性表达。我们实验室前期工作表明，重组CES5A蛋白具有羧基酯酶和胆固醇酯酶活力；同时，CES5A蛋白能够分泌到附睾管腔中，但并不结合到精子上。我们实验室最近的研究表明，大鼠附睾特异性表达的非编码RNAHongrES2的过表达能够降低附睾CES5A蛋白水平，而且能够抑制精子获能相关的酪氨酸磷酸化；由于非编码RNA的靶基因很多，所以并不清楚CES5A是否直接与精子的获能有关。因此，我们推测，CES5A蛋白主要是通过其羧基酯酶和／或胆固醇酯酶活性影响附睾管腔液的环境，从而为精子正常功能的获得和维持提供保障。我们的结果表明，当附睾体内CES5A蛋白被下调30％．40％之后，附睾尾部精子运动百分数没有明显变化，直线运动速率和曲线运动速率显著增加。但是，CES5A表达下调后精子获能受到明显抑制；进一步研究发现，CES5A表达下调后精子的体外受精率明显降低，并且雄鼠的生育能力也显著下降。这些结果提示，大鼠CES5A蛋白对于精子的成熟和雄性生殖有着至关重要的作用。

关键词：羧基酯酶 CES5A 附睾雄性生殖精子获能

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免疫细胞在牦牛附睾和输精管的分布规律

畜牧兽医学报 2022年第6期53卷 1925-1933页

作者：张倩崔燕余四九何俊峰潘阳阳王萌甘肃农业大学动物医学院兰州730070

旨在研究免疫细胞在健康雄性牦牛附睾和输精管的分布。采用免疫组织化学和实时荧光定量(qRT-PCR)方法对幼龄(5~6月龄)及成年(3~4岁)牦牛附睾(头、体、尾)和输精管中CD68+巨噬细胞、CD3+T淋巴细胞、CD79α+B淋巴细胞、IgA+和IgG+浆细胞... 详细信息

旨在研究免疫细胞在健康雄性牦牛附睾和输精管的分布。采用免疫组织化学和实时荧光定量(qRT-PCR)方法对幼龄(5~6月龄)及成年(3~4岁)牦牛附睾(头、体、尾)和输精管中CD68+巨噬细胞、CD3+T淋巴细胞、CD79α+B淋巴细胞、IgA+和IgG+浆细胞的分布特征及其表面标志分子的表达水平进行研究。结果显示:CD68+巨噬细胞、CD3+T淋巴细胞、CD79α+B淋巴细胞、IgA+和IgG+浆细胞主要分布在附睾管和输精管的上皮和间质;另外,CD68和CD3 mRNA和蛋白水平在各年龄组牦牛附睾头和附睾体显著高于附睾尾和输精管(P附睾尾和输精管显著高于附睾头和附睾体(P附睾和输精管CD3、CD79α、IgA、IgG、CD68 mRNA和蛋白水平均显著高于幼龄牦牛(P附睾头可能主要是细胞免疫发生的位点,而附睾尾和输精管则主要进行体液免疫应答,此外,成年牦牛附睾和输精管的局部免疫可能更完善,以上数据为进一步研究高原牦牛局部生殖免疫和病理提供了形态学资料。

关键词：牦牛附睾输精管免疫细胞

GPx5在牦牛隐睾附睾组织的分布特征及定位分析

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云南农业大学学报（自然科学版） 2022年第4期37卷 587-596页

作者：邢引弟袁莉刚陈少宇马晓杰杨大鹏王华宋娟娟甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070

【目的】研究谷胱甘肽过氧化物酶-5(glutathione peroxidase-5,GPx5)在成年牦牛隐睾及正常附睾组织的表达及分布特征,探索其对牦牛精子成熟及生殖机能的调节作用。【方法】选取4岁成年牦牛隐睾及正常附睾各8对,应用实时荧光定量PCR、免... 详细信息

【目的】研究谷胱甘肽过氧化物酶-5(glutathione peroxidase-5,GPx5)在成年牦牛隐睾及正常附睾组织的表达及分布特征,探索其对牦牛精子成熟及生殖机能的调节作用。【方法】选取4岁成年牦牛隐睾及正常附睾各8对,应用实时荧光定量PCR、免疫印迹、免疫组织化学SP法、免疫组织荧光染色法及IPP图像分析研究GPx5的表达及分布特征。【结果】(1)牦牛正常组附睾上皮为假复层柱状纤毛上皮,管腔内有大量精子,管腔外围结缔组织丰富;隐睾组附睾组织趋向纤维化,间质内胶原纤维增生,无正常精子。(2)GPx5在牦牛正常组附睾头部和体部表达均显著高于隐睾组(P附睾基细胞、晕细胞、管周肌样细胞、静纤毛及血管内皮细胞均有不同程度表达,正常组附睾上皮主细胞GPx5呈强阳性表达,而隐睾组主细胞无阳性表达;正常组附睾头部和体部顶端细胞GPx5呈阳性表达,尾部顶端细胞GPx5则呈强阳性,隐睾组附睾头、体和尾顶端细胞GPx5均呈强阳性表达。【结论】高原低氧环境下,牦牛隐睾附睾趋向纤维化;隐睾附睾头及附睾体GPx5显著降低,且主要表现为主细胞及基细胞的表达缺失,提示其与精子氧化应激损伤及抗氧化调节密切相关。

关键词： GPx5 牦牛附睾蛋白定位基因表达