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辐射远后效应对红细胞膜阴离子转运蛋白基因表达的影响

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中华放射医学与防护杂志 2002年第4期22卷 275-276页

作者：李津婴周虹夏放翟永平张雨生韩风来章卫平刘本俶第二军医大学长海医院血液科上海200433 复旦大学遗传研究所

目的　研究辐射远后效应对红细胞膜阴离子转运蛋白 (band 3)基因表达的影响。方法　分离 10年期骨髓型急性放射病 (ARS)患者骨髓有核细胞 ,二步法液体培养红系 ,取新生红细胞涂片 ,做band 3mRNA原位杂交。抽提外周血有核细胞总RNA ,进行... 详细信息

目的　研究辐射远后效应对红细胞膜阴离子转运蛋白 (band 3)基因表达的影响。方法　分离 10年期骨髓型急性放射病 (ARS)患者骨髓有核细胞 ,二步法液体培养红系 ,取新生红细胞涂片 ,做band 3mRNA原位杂交。抽提外周血有核细胞总RNA ,进行RT PCR ,以 β actin作内参照 ,半定量分析band 3mRNA表达丰度。结果　ARS新生红细胞中band 3mRNA原位杂交显色不均、淡染 ,定量分析显示 1 2患者band 3mRNA表达强度减弱。结论　辐射远后效应可能在转录水平影响红细胞膜阴离子转运蛋白基因表达 ,使转录产物减少 ,翻译产物功能下降即阴离子转运能力减弱。

关键词：辐射远后效应红细胞膜阴离子转运蛋白基因表达急性放射病

急性呼吸性酸中毒时阴离子转运蛋白抑制剂对脑脊液酸碱的影响

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基础医学与临床 1995年第6期15卷 28-31页

作者：金发光钱桂生唐敏章王琳第四军医大学唐都医院呼吸科第三军医大学新桥医院呼吸中心

本文通过复制犬急性呼吸性酸中毒动物模型，动态观察动脉血和脑脊液（ＣＳＦ）酸碱变量发现：两组实验犬ＰａＣＯ＿２、血浆［ＨＣＯ￣－＿３］、ＣＳＦＰＣＯ＿２、ＣＳＦ［Ｎａ￣＋］、ＣＳＦ乳酸的改变无显著性差异，而对照组ＣＳＦ... 详细信息

本文通过复制犬急性呼吸性酸中毒动物模型，动态观察动脉血和脑脊液（ＣＳＦ）酸碱变量发现：两组实验犬ＰａＣＯ＿２、血浆［ＨＣＯ￣－＿３］、ＣＳＦＰＣＯ＿２、ＣＳＦ［Ｎａ￣＋］、ＣＳＦ乳酸的改变无显著性差异，而对照组ＣＳＦ［ＨＣＯ￣－＿３］在６ｈ时平均升高５ｍｍｏｌ／Ｌ，ＤＩＤＳ组ＣＳＦ［ＨＣＯ￣－＿３］平均升高仅为１ｍｍｏｌ／Ｌ。结果说明：急性呼吸性酸中毒时，ＤＩＤＳ能抑制ＨＣＯ￣－＿３／Ｃｌ￣－的等量交换，中枢神经系统ＨＣＯ￣－＿３／Ｃｌ￣－的等量交换可能是由一种不依赖于Ｎａ￣＋的阴离子转运蛋白所介导的。

关键词：呼吸性酸中毒脑脊液阴离子转运蛋白抑制剂

慢性缺氧和二氧化碳潴留对大鼠脑阴离子转运蛋白mRNA表达的作用

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基础医学与临床 1998年第2期18卷 51-55页

作者：张献全钱桂生范卫东第三军医大学附属新桥医院呼吸病研究所

本实验通过向密闭舱内灌注混合气体的方法，分别复制慢性缺氧、慢性缺氧伴二氧化碳潴留及慢性呼吸性酸中毒大鼠模型。以地高辛标记的脑阴离子转运蛋白（ＡＥ３）ｃＤＮＡ探针，应用核酸原位杂交及点杂交技术，对ＡＥ３ｍＲＮＡ的分布及... 详细信息

本实验通过向密闭舱内灌注混合气体的方法，分别复制慢性缺氧、慢性缺氧伴二氧化碳潴留及慢性呼吸性酸中毒大鼠模型。以地高辛标记的脑阴离子转运蛋白（ＡＥ３）ｃＤＮＡ探针，应用核酸原位杂交及点杂交技术，对ＡＥ３ｍＲＮＡ的分布及变化进行检测，结果显示：（１）ＡＥ３ｍＲＮＡ广泛分布于脑组织，其中以呼吸调整中枢所在部位脑桥深部灰质最为富集；（２）慢性缺氧组ＡＥ３ｍＲ－ＮＡ的相对含量显著地低于对照组（Ｐ＜０．０５），慢性缺氧伴二氧化碳潴留及慢性呼吸性酸中毒组均非常显著地低于对照组（Ｐ＜０．０１）；（３）慢性缺氧伴二氧化碳潴留及慢性呼吸性酸中毒组均非常显著地低于慢性缺氧组（Ｐ＜０．０１），但二组之间无显著性差异。提示ＡＥ３在呼吸衰竭的发生及其导致的肺性脑病中可能具有一定作用。

关键词：缺氧二氧化碳潴留脑阴离子转运蛋白肺性脑病

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大黄肾脏毒性部分机制研究

中国中药杂志 2018年第13期43卷 2777-2783页

作者：邓诺易艳梁爱华李春英赵雍潘辰张宇实王连嵋韩佳寅刘素彦田婧卓李桂琴刘靖中国中医科学院中药研究所中药鉴定与安全性检测评估北京市重点实验室北京100700 首都医科大学中医药学院北京100069

该研究旨在探讨大黄剂量相关的肾脏毒性及其毒性机制。将SD大鼠随机分为正常组和大黄提取物高、低剂量组（16,2 g·kg-1,按照动物与人体表面积折算分别相当于临床剂量10,1.25倍）,连续灌胃给药1个月后,分析血液尿素氮（BUN）,肌酐（CRE... 详细信息

该研究旨在探讨大黄剂量相关的肾脏毒性及其毒性机制。将SD大鼠随机分为正常组和大黄提取物高、低剂量组（16,2 g·kg-1,按照动物与人体表面积折算分别相当于临床剂量10,1.25倍）,连续灌胃给药1个月后,分析血液尿素氮（BUN）,肌酐（CRE）以及尿KIM-1,NGAL,进行肾脏组织形态学观察,检测肾脏OAT1,OAT3,clusterin等mRNA表达。结果显示,大黄低剂量组未见明显肾脏毒性。高剂量组可见轻中度肾脏病理损伤,其中雄性动物较重,伴有肾脏组织clusterin mRNA表达下调。高剂量组的常规肾脏功能指标血液BUN和CRE无明显变化,但尿液NGAL水平均较正常组提高51.53%,其中雄性动物增高更明显（与正常组比较P〈0.05）。低剂量组肾脏组织的OAT1,OAT3 mRNA表达较正常组有较大幅度增高,而高剂量组增高幅度较小。结果提示,大黄的肾脏毒性与剂量有关,临床用药时应合理控制剂量。肾脏组织中与阴离子物质转运有关的基因OAT1,OAT3 mRNA在大黄造成肾脏损伤过程中起到一定的代偿性保护作用,但在高剂量水平其代偿作用较弱。此外常规肾功能检测指标BUN,CRE对于大黄肾脏毒性的检出能力有限,建议增加尿液NGAL检测,有助于其肾毒性的监测。

关键词：大黄提取物肾毒性肾脏损伤因子中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白阴离子转运蛋白

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虎杖苷的降尿酸作用及其机制研究

药学学报 2014年第12期49卷 1739-1742页

作者：吴杲吴汉斌蒋红解放军第411医院上海200081 同济大学附属东方医院上海200120

虎杖（Rhizoma polygoni cuspidati）系蓼科植物虎杖（Polygonum cuspidatum *** Zucc.）的干燥根茎和根。中医认为,虎杖具有祛风利湿、散瘀定痛、止咳化痰的功效。可用于治疗关节痹痛、湿热黄疸、经闭、水火烫伤、跌扑损伤和痈肿疮毒... 详细信息

虎杖（Rhizoma polygoni cuspidati）系蓼科植物虎杖（Polygonum cuspidatum *** Zucc.）的干燥根茎和根。中医认为,虎杖具有祛风利湿、散瘀定痛、止咳化痰的功效。可用于治疗关节痹痛、湿热黄疸、经闭、水火烫伤、跌扑损伤和痈肿疮毒等。虎杖的主要成分是蒽醌及蒽醌苷,还含有二苯乙烯类化合物,如虎杖苷（polydatin）、白黎芦醇（resveratrol）等,其中虎杖苷含量较高,中国药典（2010年版一部）以虎杖苷作为虎杖药材的质量控制指标。

关键词：虎杖苷高尿酸血症尿酸转运体蛋白1 阴离子转运蛋白

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解偶联蛋白2与糖尿病性视网膜病变的相关性

中华医学杂志 2011年第13期91卷 933-936页

作者：李倩郑志许迅上海交通大学附属上海市第一人民医院眼科 200080

解偶联蛋白2（uncoupling proteins 2,UCP2）是一种阴离子转运蛋白,它是解偶联蛋白家族的亚型之一,定位在线粒体内膜上,通过线粒体内膜上的电子传递过程和ATP的合成过程解偶联,使得内膜上的电能以热能的形式释放[1].UCP2分布在生物体的... 详细信息

解偶联蛋白2（uncoupling proteins 2,UCP2）是一种阴离子转运蛋白,它是解偶联蛋白家族的亚型之一,定位在线粒体内膜上,通过线粒体内膜上的电子传递过程和ATP的合成过程解偶联,使得内膜上的电能以热能的形式释放[1].UCP2分布在生物体的许多组织中,在调节机体热量平衡、ATP的生成、活性氧的生成及钙离子平衡中扮演了重要角色,参与了血管及神经组织病理变化的过程.

关键词：解偶联蛋白2 糖尿病性视网膜病变相关性组织病理变化阴离子转运蛋白钙离子平衡合成过程电子传递

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气道上皮中pendrin蛋白的研究进展

广东医学 2013年第1期34卷 159-161页

作者：黄小燕罗庆张剑南昌大学医学院第一附属医院耳鼻喉-头颈外科南昌330006

Pendrin蛋白也称为可溶性转运家族26A4（solute carrier familly26A4，SLC26A4），是SLC26A家族成员之一，SLC26A是一组阴离子转运蛋白，包括presin（存在于内耳的蛋白），先天性高氯性腹泻（congenitalchloridediarrhea）者缺乏此类蛋白。由于pendrin蛋白与其他硫转运因子具有同源性，故以往认为它是一硫酸盐转运子，后来的研究证实主要是一种碘／氯转运子，以一个完整的膜蛋白形式存在，

关键词： pendrin蛋白气道上皮阴离子转运蛋白 Pendrin蛋白家族成员转运因子转运子硫酸盐

刺木蓼和同齿樟味藜植物化学成分与活性的研究

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刺木蓼和同齿樟味藜植物化学成分与活性的研究

作者： Xinhui Wang 天津大学

学位级别：硕士

刺木蓼(Atraphaxis spinosa)是蓼科木蓼属植物,属于小灌木,大约有25种,主要分布在非洲北部、欧洲西南部和亚洲。在中国地区存在11种木蓼属植物,其中大部分分布在我国新疆地区。根据以前的研究,该属植物中富含黄酮类化合物,并且有很多种... 详细信息

刺木蓼(Atraphaxis spinosa)是蓼科木蓼属植物,属于小灌木,大约有25种,主要分布在非洲北部、欧洲西南部和亚洲。在中国地区存在11种木蓼属植物,其中大部分分布在我国新疆地区。根据以前的研究,该属植物中富含黄酮类化合物,并且有很多种黄酮类化合物已经从木蓼属植物中分离出。一些从该属植物中分离出的物质具有活性,例如N-反式香豆酰多巴胺,N-反式阿魏酰多巴胺对P388淋巴白血病细胞具有细胞毒活性。目前,对于刺木蓼化学成分分类学的研究尚无文献报道。本课题开展了刺木蓼化学成分和其化合物分类学的研究,实验采用硅胶、聚酰胺、大孔树脂、分析和制备型液相对该植物的整株甲醇提取物进行了系统分离,从正丁醇和二氯甲烷相中一共得到16个单体化合物,通过紫外光谱、高分辨质谱、一维和二维核磁共振谱鉴定了这16个化合物的结构,其中包括七种黄酮类化合物,三种苯丙烷酰胺,一种脂肪酸,一种酰基间苯二酚葡糖苷,一种单萜类化合物,一种芳基呋喃-2-酮衍生物和没食子酸及其甲酯。这16种化合物的名称分别为:槲皮苷(1),阿福豆苷(2),N-反式-对香豆酰多巴胺(3),N-反式阿魏酰多巴胺(4),槲皮素3-O-β-D-葡糖苷酸-6“-甲酯(5),杨梅苷(6),槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖醛酸苷(7),2”-加花酰槲皮素-3-O-β-D-葡糖苷酸(8),2-(β-D-吡喃葡萄糖基氧基)-4-羟基-6-甲氧基苯乙酮(9),非瑟酮醇(10),没食子酸甲酯(11),没食子酸(12),α-亚麻酸(13),地芰普内酯(14),N-反式阿魏酰酪胺(15)和lucidulactone A(16)。在这个课题中,化合物1,2,5,7-9,11,13,14,16首次从木蓼属中分离。化合物5,8,9,14,16首次在蓼科中被分离出来。与此同时,该课题讨论了这些化合物的化学分类学意义。在这项研究中,七种黄酮类化合物(1,2,5-8,10)从Atraphaxis spinosa中得到分离和结构鉴定。并且在分离出来的黄酮类化合物中1,2,5,7和8在Atraphaxis属中首分。槲皮素3-O-β-D-吡喃葡糖苷糖醛酸(8)首次在蓼科中报道,而化合物6和10从***(L.)***已经得到分离。根据以前的研究,在Atraphaxis中最常见的是棉酚素和山奈酚的3-O-鼠李糖苷。此研究结果也证实黄酮类化合物是***的主要成分。黄酮类化合物的鉴别与结构测定现在多依赖于谱学的综合解析,而化学方法和色谱方法已降至辅助地位。未知黄酮类化合物的鉴定,多在测定分子式的基础上,利用薄层色谱得到的Rf值或hRf值与文献比较或分析对比样品在甲醇溶液中及加入各种诊断试剂后得到的紫外及可见光谱进行剖析。同时,对于化合物的颜色反应,以及在提取分离过程中所表现的行为(如溶解度、酸或碱中的溶解情况、铅盐沉淀等)也应注意分析。核磁共振氢谱的测定对分析天然黄酮类化合物的结构已经成为一种非常重要的手段,并且C-NMR技术在黄酮类化合物的结构鉴定中也发挥着越来越重要的作用。质谱(MS)技术,尤其场解析质谱(FD-MS)与快速原子轰击质谱(FAB-MS)及串联质谱(MS-MS)的出现与应用,使其成为黄酮类化合物结构鉴定的重要手段之一。通过这个课题的研究,掌握了如何运用液相色谱来寻找目标化合物,例如通过带有DAD检测器的HPLC来判断化合物的大致类型,这样有时可以避免浪费不必要的时间和资源,如果想分离一系列的黄酮类化合物,可以通过DAD检测器中的紫外吸收寻找相似波长的化合物进行初步定性。对反相HPLC的熟练应用也是本课题的重要意义之一。对于反相HPLC来说,最常用的流动相组合为甲醇/水,乙腈/水。在本课题的研究中,所有的化合物都用乙腈/水为流动相来进行分离,有两个原因:一是因为所分离的化合物在乙腈中的溶解度较好,所以色谱图中的峰型比较好看;二是因为乙腈的截止波长为190nm,甲醇的截止波长为210nm,所以甲醇对于化合物的紫外吸收会造成误差,若用紫外在低于此波长而使用该流动相就会导致较大的干扰。并且用乙腈做流动相,色谱图中的峰型会更好一些,基线也比较平稳。如果样品不溶于乙腈,这时可以考虑用甲醇和水作为流动相,但是在这种情况要考虑柱压和保留时间的变化,也要注意甲醇对于样品紫外吸收的干扰。在分析分离的最开始,尝试了很多种不同类型的色谱分析柱,包括C18,C4,aQ等。每一个色谱柱都有独特的性质,并且对不同种类的化合物具有选择性,例如aQ色谱柱非常适合用于分离极性大的化合物。这些知识和经验都对今后的研究有着重要的铺垫作用。在本研究中,三种苯丙素酰胺从***中分离鉴定,包括N-反式香豆酰多巴胺(3),N-反式阿魏酰多巴胺(4),N-反式阿魏酰酪氨酸(15)。这里首次从蓼科中分离的化合物5,8

关键词：刺木蓼黄酮苷二维色谱同齿樟味藜异黄酮阴离子转运蛋白

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大黄及其总蒽醌肝肾毒性研究

大黄及其总蒽醌肝肾毒性研究

作者：邓诺中国中医科学院

学位级别：硕士

大黄(Rhei Radix et Rhizoma)是一味常用中药,是蓼科植物唐古特大黄Rheum tanguticum *** Balf.、药用大黄Rheum offcinale Baill.以及掌叶大黄Rheum palmatum L.的干燥根茎及根,具有泻下攻积、清热泻火、凉血解毒、逐瘀通经及利湿退黄... 详细信息

大黄(Rhei Radix et Rhizoma)是一味常用中药,是蓼科植物唐古特大黄Rheum tanguticum *** Balf.、药用大黄Rheum offcinale Baill.以及掌叶大黄Rheum palmatum L.的干燥根茎及根,具有泻下攻积、清热泻火、凉血解毒、逐瘀通经及利湿退黄等作用,临床用于实热积滞便秘,血热吐衄,目赤咽肿,痈肿疔疮,肠痈腹痛,瘀血经闭,产后瘀阻,跌打损伤,湿热痢疾,黄疸尿赤,淋证,水肿,外治烧烫伤[1]。大黄主要成分为蒽醌类,包括大黄素、大黄酸、大黄酚、大黄素甲醚等,除此之外还有苯丁酮苷类、鞣质、挥发油、多糖、脂肪酸、蛋白质等[2]成分。大黄性味苦寒,泻下之力迅猛,若使用不当,可能造成不良反应[3]。以往关于大黄及其主要成分蒽醌类的毒性研究已有报告,结论有一定差异,在多认为蒽醌类在一定剂量下可能造成肝肾毒性。但是以往对大黄及蒽醌的肝肾毒性机制研究较少。本研究拟在重复大黄及其总蒽醌的毒理学研究的基础上,重点通过大黄对肝脏与肾脏转运子表达的影响,初步探讨其毒性机制。根据以往研究,大黄提取物的毒性剂量范围在10～12 g/kg,大黄总蒽醌的毒性剂量范围在135 mg/kg～4500mg/kg。本研究第一部分将参考此毒性剂量范围设计实验剂量,重复大黄提取物及总蒽醌的肝肾毒性研究。肝脏和肾脏分别是人体的代谢及排泄器官,在体内内源性物质以及外源性物质包括药物的代谢和转运过程中起着非常重要的作用。本研究第二部分将主要观察大黄及其总蒽醌对肝肾相关转运子表达的影响,以初步探讨其肝肾毒性机制。目的:观察不同剂量下大黄提取物及总蒽醌的肝肾毒性,了解毒性剂量范围;通过对肝肾相关转运子mRNA的分析,探讨大黄提取物及总蒽醌肝肾毒性机制。方法:健康SPF级SD大鼠80只,雌雄各半。按体重随机分为对照组A、大黄提取物不同剂量组(2、8、16 g生药/kg,分别相当于临床剂量的1.25、5、10倍);对照组B、大黄总蒽醌不同剂量组(0.5、2.5、5 g药粉/kg)。每组10只动物,雌雄各5只。大黄提取物不同剂量组均采用灌胃给药,每日一次,连续给药1个月。对照组A与大黄不同剂量组平行进行试验,给予等体积的纯净水。大黄总蒽醌不同剂量组灌胃给药10天,每日一次,连续给药10天。对照组B与大黄总蒽醌平行进行试验,给予等体积的纯净水。末次给药结束后,采用代谢笼收集16h尿液,测量尿量,采用尿液分析仪进行尿定性指标检测(尿蛋白、尿糖、尿胆原、红细胞、白细胞等);采用ELISA方法测定尿液NGAL(Neutrophil gelatinase-associated lipocalin)、KIM-1(Kidney injure molecule-1)含量。将动物麻醉后经腹主动脉取血,分离血清,分析ALT、AST、BUN、CRE等血清生化指标及血象指标。摘取肝脏和肾脏,将部分肝、肾组织常规用甲醛固定、取材、脱水、石蜡包埋、切片、苏木素-伊红染色,显微镜下进行病理检查。另外部分的肾脏组织分装入去RNA酶的试管中,放入液氮速冻后放入-80℃C留存,用于后续RT-PCR试验,分析肾脏的肾脏有机阴离子转运体(OAT1、OAT3)、中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)、丛集素(Clusterin)mRNA表达水平。另取动物分成对照组和大黄总蒽醌5 g/kg剂量组,进行对氨基马尿酸(PAH)清除率检测实验。大鼠灌胃给予大黄总蒽醌5 g/kg 10天后,腹腔注射10%水合氯醛麻醉(350 mg/kg大鼠)。在无菌条件下行颈总静脉插管和股静脉插管术。将手术成功的大鼠放入IVC笼具单笼饲养,术后恢复。禁食12-16h(自由饮水)后,从颈静脉推注浓度为6 g/L PAH溶液30 mg/kg后,静脉滴注浓度为3 g/L PAH溶液6mg/h/100g45min,然后开始计时,在大鼠清醒状态下,分别在1,5,10,15,20,25,30,40,50,60 min时间点采集血液样品。每个时间点采血后,均静脉输入同体积的生理盐水。在20,40,60 min收集大鼠尿液,并测量各时间段的尿液体积。采用HPLC分别分析血液和尿液中的PAH含量,计算PAH清除率。结果:1.大黄提取物和大黄总蒽醌剂量过高时可导致肾脏轻度损伤,但中、低剂量时无明显肝肾毒性大鼠灌胃给予大黄提取物高剂量组(16 g生药/kg,相当于临床剂量的10倍)于给药后出现软便、被毛不干净、无光泽、尿液颜色加深等现象;血清肌酐(CRE)水平较对照组升高(p<0.001);雄性大鼠的肾脏重量显著性降低(p<0.05)。高剂量组其他生化指标和低、中剂量组生化指标未见有明显毒理学意义的变化。病理检查可见,高剂量组(16 g生药/kg)肝脏出现轻微小灶状炎症细胞浸润,但与对照组比较差异不

关键词：大黄提取物大黄总蒽醌肾毒性肝毒性马尿酸代谢中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白阴离子转运蛋白