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大豆科学 2003年第3期22卷 193-196页

作者：高学文杨春樊建坤丁俊杰郑天琪马淑梅南京农业大学农业部病虫监测与治理重点开放实验室南京210095 黑龙江省农业科学院合江农业科学研究所佳木斯154007

用大豆同一品种与不同灰斑病菌生理小种和不同品种与同一生理小种互作 ,测定了大豆叶片防卫酶及可溶性蛋白的表达特征。结果表明 ,大豆品种与不同亲和性的小种互作后POD和SOD活性都有增强 ,但非亲和互作中防卫酶活性增加的速度和强度显... 详细信息

用大豆同一品种与不同灰斑病菌生理小种和不同品种与同一生理小种互作 ,测定了大豆叶片防卫酶及可溶性蛋白的表达特征。结果表明 ,大豆品种与不同亲和性的小种互作后POD和SOD活性都有增强 ,但非亲和互作中防卫酶活性增加的速度和强度显著高于亲和互作。POD和SOD同工酶谱带仅发生强弱变化 ,未见有数量改变 ,说明POD和SOD活性的增加与同工酶活性的增强有关。可溶性蛋白电泳图谱显示 ,在非亲和或亲和互作中大豆某些可溶性蛋白谱带有所增强 ,是一些病程相关蛋白。而大豆不同品种与灰斑病菌同一生理小种互作后POD快速而显著表达也与大豆和灰斑病菌的非亲和性相关。上述结果表明防卫酶POD和SOD活性的快速而显著增高是大豆与灰斑病菌非亲和互作的特征。

关键词：大豆灰斑病菌互作防卫酶可溶性蛋白表达特征感病生理机制

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植物源诱导剂对甜瓜叶片防卫酶活性的影响

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西北植物学报 2010年第10期30卷 2016-2021页

作者：陈年来乃小英张玉鑫乔昌萍张建农李喜娥甘肃农业大学农学院兰州730070 甘肃农业大学资源与环境学院兰州730070

以甜瓜主栽品种‘银帝’(抗病)和‘卡拉克赛’(感病)幼苗为材料,通过盆栽试验研究了几种植物源诱导剂对其接种古巴假霜霉菌叶片过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)、几丁质酶(CHI)和葡聚糖酶(GLU)活性的影响,以阐... 详细信息

以甜瓜主栽品种‘银帝’(抗病)和‘卡拉克赛’(感病)幼苗为材料,通过盆栽试验研究了几种植物源诱导剂对其接种古巴假霜霉菌叶片过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)、几丁质酶(CHI)和葡聚糖酶(GLU)活性的影响,以阐释植物源诱导剂提高甜瓜抗病性的生化机制。结果显示:苯丙噻二唑(BTH)、侧柏叶提取液(CB)和中草药制剂(ZY)处理对甜瓜霜霉菌具有显著的预防效果;诱导处理或接菌后甜瓜叶片中上述抗病相关酶活性都显著上升,抗病品种‘银帝’的PPO、PAL、CHI、GLU活性增幅大于感病品种‘卡拉克赛’,‘卡拉克赛’的POD活性增幅则较‘银帝’大。研究表明,叶面喷施两种植物源诱抗剂对甜瓜叶片防卫酶活性增强具有系统诱导作用,而叶片防卫酶活性增强可能是诱导剂处理后甜瓜对霜霉抗性提高的重要生化机制。

关键词：甜瓜诱导抗性霜霉病侧柏叶提取液中草药制剂防卫酶

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化学合成寡糖诱导烟草抗黑胫病的初步研究

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植物病理学报 2004年第3期34卷 231-236页

作者：朱振元张勇民徐同浙江大学农业与生物技术学院植保系 Ecole Normale Supérieure Département de Chimie Associé au CNRS 24 Rue Lhomond 75231 Paris Cedex 05 France

抑菌测定和盆栽试验表明 :化学合成的 Lewisx 和 Lewisa 寡糖对烟草黑胫病病原菌菌丝生长无明显影响 ;Lewisx 五糖和七糖处理烟草 ,可使烟草植株产生对黑胫病菌 ( Phytophthora nicotianae)的抗性 ,在处理浓度 0～ 1 0 μg/m L内 ,随着... 详细信息

抑菌测定和盆栽试验表明 :化学合成的 Lewisx 和 Lewisa 寡糖对烟草黑胫病病原菌菌丝生长无明显影响 ;Lewisx 五糖和七糖处理烟草 ,可使烟草植株产生对黑胫病菌 ( Phytophthora nicotianae)的抗性 ,在处理浓度 0～ 1 0 μg/m L内 ,随着浓度增高诱导效果增强 ,当浓度达 1 0 μg/m L时 ,诱导防病效果达 90 %以上。 Lewisx七糖处理 ,可导致烟草叶片过氧化物酶( POD)、多酚氧化酶 ( PPO)和苯丙氨酸裂解酶 ( PAL)等防卫酶活性不同程度地提高 ,PPO、POD及 PAL分别在处理后第 4d、第 6d和第 8d达到最大值 ,比对照分别增加了 70 .7%、1 5 0 .0 %和 1 42 .8%。

关键词：寡糖烟草黑胫病诱导抗病性防卫酶

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玉米纹枯病菌（Rhizoctonia solani AG-1-IA）β-1，4-内切纤维素酶的基因克隆表达及功能研究

玉米纹枯病菌（Rhizoctonia solani AG-1-IA）β-1，4-内切纤维素...

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作者：李海云山东农业大学

学位级别：硕士

玉米纹枯病是世界上玉米产区广泛发生、危害严重的土传病害之一。在我国玉米纹枯病已成为玉米生产上的一种重要病害,且有逐年加重的趋势。其主要致病菌为立枯丝核菌(Rhizoctonia solani Kühn),属于丝核菌属,寄主范围十分广泛,能侵染水... 详细信息

玉米纹枯病是世界上玉米产区广泛发生、危害严重的土传病害之一。在我国玉米纹枯病已成为玉米生产上的一种重要病害,且有逐年加重的趋势。其主要致病菌为立枯丝核菌(Rhizoctonia solani Kühn),属于丝核菌属,寄主范围十分广泛,能侵染水稻、玉米、大豆、大麦、小麦等40多个科200多种植物,引起纹枯、立枯等症状。玉米纹枯病菌可以产生多种细胞壁降解酶,如果胶酶、纤维素酶等,是病原物致病的主要因子。本研究根据第45家族糖苷水解酶氨基酸保守区设计引物,从*** AG-1-IA中克隆到两条45家族β-1,4-内切纤维素酶基因,分别命名为EG-1、EG-2。其中EG-1基因的DNA序列长1061bp,包含7段内含子区域,该基因cDNA和DNA在GenBank中的登录号分别为GU372731和GU372728;EG-2基因的DNA序列长1086bp,包含7段内含子区域,该基因cDNA和DNA在GenBank中的登录号分别为GU372730和GU372729。将EG-1、EG-2基因分别构建重组表达载体pPIC9K/EG-1和pPIC9K/EG-2,用限制性内切酶Sac I线性化后转化巴斯德毕赤酵母GS115。其中, pPIC9K/EG-1获得了酵母工程菌PEG-45,培养8d时表达量达到最高0.35mg/mL,SDS-PAGE确认纯化蛋白分子量约为28.05kDa,其最适反应pH为3.0,最适反应温度为45℃。pPIC9K/EG-2转化酵母,发酵后未检测到目的蛋白的表达。将Rhizoctonia. solani菌丝块接种玉米叶片发现,菌丝接菌后侵染能力很强,24h后即表现明显病斑,RT-PCR证明菌丝在侵染过程中有β-1,4-内切纤维素酶基因EG-1、EG-2和EGIII的表达。通过改变Marcus诱导培养基的底物发现,β-1,4-内切纤维素酶的产生对底物存在依赖性,最适诱导底物为羧甲基纤维素钠CMC-Na。将酵母工程菌株PEG-45表达的β-1,4-内切纤维素酶接种玉米叶片,发现在接种部位出现明显的病斑,且病斑沿叶脉扩展,以灭活酶液为对照,无病斑扩展。RT-PCR证明在发病过程中有防卫酶基因:病程相关蛋白(PR)、过氧化物酶(POD)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)的表达。本实验从生理检测和基因表达两个方面对玉米纹枯病致病机制进行了初步研究,研究结果将为玉米纹枯病致病机制的深入研究、培育玉米纹枯病抗病新品种及研制防治玉米纹枯病的有效药剂奠定基础。

关键词：玉米纹枯病 Rhizoctonia solani β-1 4-内切纤维素酶基因克隆表达纯化致病性防卫酶

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NO诱导小麦抗赤霉菌粗毒液胁迫的生物学效应及机制的研究

NO诱导小麦抗赤霉菌粗毒液胁迫的生物学效应及机制的研究

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作者：李冰四川师范大学

学位级别：硕士

赤霉菌产生的毒素能够抑制小麦种子萌发及幼苗生长,使小麦产生典型的赤霉病症状,外源一氧化氮(NO)供体硝普钠(SNP)作为诱导剂能够缓解逆境胁迫对小麦造成的氧化损伤。本研究使用实验室自制的赤霉菌粗毒液,以SNP作为诱导剂对抗、感两品... 详细信息

赤霉菌产生的毒素能够抑制小麦种子萌发及幼苗生长,使小麦产生典型的赤霉病症状,外源一氧化氮(NO)供体硝普钠(SNP)作为诱导剂能够缓解逆境胁迫对小麦造成的氧化损伤。本研究使用实验室自制的赤霉菌粗毒液,以SNP作为诱导剂对抗、感两品系小麦种子进行处理,对NO诱导小麦抗赤霉菌粗毒液胁迫的生物学效应及机制进行讨论。通过粗毒液对小麦种子萌发和幼苗生长的影响实验,对不同稀释倍数粗毒液处理下小麦种子萌发和幼苗生长所造成的抑制进行测定,结果显示,不同浓度赤霉菌粗毒液对抗、感两品系小麦的萌发均有抑制作用,浓度愈高抑制程度愈明显,且感病品系小麦种子受抑制程度的高于抗病品系。经过分析,选择对抗、感两品系小麦胁迫适中的1:6倍粗毒液进行后续实验。使用不同浓度SNP对抗、感两品系小麦种子萌发和幼苗生长进行诱导,对生理指标以及α-淀粉酶和蛋白酶的活性进行测定,结果显示,低浓度SNP能够促进小麦种子萌发和幼苗生长,而高浓度则具有抑制作用,甚至表现出毒害,其中0.1mmol/LSNP的诱导促进作用最明显。使用1:6倍粗毒液和0.1mmol/L SNP对抗、感两品系小麦进行处理时,对不同时间HO、O含量以及相关抗病保护性酶CAT、SOD、POD、PPO、PAL的活性进行测定,结果显示,外源NO诱导对小麦活性氧代谢变化产生影响,能够促进防卫反应相关酶的活性升高,推测此过程中NO诱发了小麦系统获得抗性,对赤霉菌粗毒液对两品系小麦造成的胁迫具有缓解作用。此外,琼脂糖凝胶电泳图谱还显示出,外源NO对赤霉菌粗毒液导致小麦根尖细胞DNA损伤具有一定的保护作用。

关键词：赤霉菌粗毒液一氧化氮活性氧防卫酶 DNA损伤

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