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基于血清代谢组学和网络毒理学研究闹羊花毒性作用机制

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中国中药杂志 2022年第7期47卷 1932-1941页

作者：郭小红黄孟军王立娟冉强杨森吴文辉张小琼刘友平成都中医药大学药学院西南特色中药资源国家重点实验室四川成都611137 重庆市中医院重庆400021 重庆文理学院药学院创新靶向药物国家地方联合工程研究中心重庆402160

基于血清代谢组学和网络毒理学研究有毒中药闹羊花的毒性作用机制。正常大鼠灌胃给予闹羊花药材粉末后,通过中毒症状、血清生化及病理组织学评价其毒性作用。利用血清代谢组学技术结合多元统计学分析,寻找内源性差异代谢物及相关代谢通... 详细信息

基于血清代谢组学和网络毒理学研究有毒中药闹羊花的毒性作用机制。正常大鼠灌胃给予闹羊花药材粉末后,通过中毒症状、血清生化及病理组织学评价其毒性作用。利用血清代谢组学技术结合多元统计学分析,寻找内源性差异代谢物及相关代谢通路;采用网络毒理学技术挖掘闹羊花的毒性成分、靶点及信号通路,并进一步与血清代谢组学整合分析,筛选并构建关键“成分-靶点-代谢物-代谢通路”。血清生化和病理组织结果表明闹羊花有明显神经、肝脏、心脏毒性。血清代谢组学发现了31个差异代谢物,获取10条主要代谢通路;网络毒理学挖掘出闹羊花中11个毒性成分相关的332个靶点和141条信号通路。进一步整合分析,筛选出闹羊花中木藜芦毒素Ⅲ、木藜芦毒素Ⅰ;闹羊花毒素Ⅱ、闹羊花毒素Ⅴ、闹羊花毒素Ⅵ、闹羊花毒素Ⅶ和kalmanol 7关键毒性成分,作用于AR、ALB、ESR2、SHBG、HSD17B11、ESR1、RXRG、LDHC、AKR1C3、ABCB1、UGT2B7、GLUL 12个靶点,干扰氨基丁酸、雌三醇、睾丸素、视黄酸、2-氧丁酸5种内源性代谢物,影响丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢,半胱氨酸和蛋氨酸、类固醇激素生物合成,视黄醇代谢4条代谢通路。可见,闹羊花毒性累及多器官系统,由多成分、多靶点、多途径所致,通过关键毒性成分、靶基因、代谢物及代谢通路,揭示了其潜在神经、心脏、肝脏毒性机制,为有毒中药基础研究提供了思路。

关键词：闹羊花代谢组学生物标志物网络毒理学靶蛋白毒性

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闹羊花的本草考证及炮制历史沿革分析

中国实验方剂学杂志 2021年第22期27卷 172-180页

作者：郭小红冯靖雯王耀登吴文辉陈鸿平冷静刘友平成都中医药大学药学院西南特色中药资源国家重点实验室成都611137 重庆市中医院重庆400021

笔者拟通过收集与整理历代本草、医籍、方书,结合现代文献资料,对闹羊花的名称、基原、产地、采收时间、入药部位、毒性、功能主治进行系统考证,并对其古今炮制方法进行梳理与分析,以期为闹羊花的临床应用、炮制规范及基础研究提供参考... 详细信息

笔者拟通过收集与整理历代本草、医籍、方书,结合现代文献资料,对闹羊花的名称、基原、产地、采收时间、入药部位、毒性、功能主治进行系统考证,并对其古今炮制方法进行梳理与分析,以期为闹羊花的临床应用、炮制规范及基础研究提供参考。经考证可知,闹羊花基原为杜鹃花科植物羊踯躅Rhododendron molle的干燥花,在各历史时期出现的别名、俗称较多,存在同名异物、同物异名的现象。该药材多野生,少量种植,采收时间多为三、四月,采收花期有初开、盛开、开泛等不同描述。闹羊花在《神农本草经》中未言其入药部位,后有花、果、根入药,其中花是其主要入药部位。闹羊花炮制历史悠久,古代有炒、醋炒、酒炒、蒸等炮制方法,现今临床仅用其生品,极少量现代著作保留了炒、酒蒸炮制方法,认为炮制可降低毒性。

关键词：闹羊花羊踯躅本草考证炮制沿革可视化分析中医药

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闹羊花与野菊花红外光谱的分析与鉴定

光谱学与光谱分析 2014年第9期34卷 2434-2438页

作者：金哲雄王玥周群陈建波马芳孙素琴哈尔滨商业大学药学院中药学黑龙江哈尔滨150001 清华大学化学系北京100084

采用傅里叶变换红外光谱对杜鹃花科植物闹羊花与菊科植物野菊花两种花类中药材的主成分进行表征,其中闹羊花出现在1 648和1 543cm-1出现明显的酰胺Ⅰ带和酰胺Ⅱ带吸收峰,证明其中含有蛋白质,可能与其具有的免疫作用相关;野菊花出现在1 ... 详细信息

采用傅里叶变换红外光谱对杜鹃花科植物闹羊花与菊科植物野菊花两种花类中药材的主成分进行表征,其中闹羊花出现在1 648和1 543cm-1出现明显的酰胺Ⅰ带和酰胺Ⅱ带吸收峰,证明其中含有蛋白质,可能与其具有的免疫作用相关;野菊花出现在1 734和1 515cm-1等CO伸缩振动吸收峰,证明其中含有挥发油等酯类成分。由于二者的红外光谱具有较高的相似性且难以区分,通过二级鉴别比较闹羊花与野菊花的二阶导数红外光谱可看出,在1 656和1 515cm-1附近的吸收峰,表明二者均含有黄酮类成分;野菊花的二阶导数谱图中出现在1 163,1 077,1 026,986和869cm-1的吸收峰与菊糖的特征吸收峰一致,因此可以看出野菊花中含有菊糖。选取不同波数范围的闹羊花与野菊花的二维相关红外光谱进行对比,发现在1 700~1 400cm-1黄酮类成分区域闹羊花有3个明显的自动峰,野菊花有10个明显的自动峰;在1 250~900cm-1糖苷类成分区域闹羊花有10个明显的自动峰,野菊花有9个明显的自动峰。红外光谱的'三级鉴定法'为中药材的鉴别提供更快速、准确、方便的手段。

关键词：闹羊花野菊花傅里叶变换红外光谱二阶导数红外光谱二维相关红外光谱

栀子-闹羊花配伍对大鼠血浆中闹羊花毒素Ⅱ和闹羊花毒素Ⅲ的药动学影响

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中国现代应用药学 2023年第24期40卷 3352-3359页

作者：张小琼李婷王惠玉刘楠郭小红重庆市中医院药剂科重庆400021 重庆医科大学药学院重庆400016 岛津企业管理(中国)有限公司北京分公司北京100020 浙江康恩贝集团医疗保健品有限公司技术研发部浙江兰溪321100

目的考察栀子与闹羊花配伍对闹羊花中闹羊花毒素Ⅱ和闹羊花毒素Ⅲ药动学的影响。方法建立LC-MS/MS测定大鼠血浆中闹羊花毒素Ⅱ和闹羊花毒素Ⅲ的分析方法,并用此方法测定大鼠口服给予闹羊花与栀子配伍液及闹羊花单煎液后大鼠体内的闹羊... 详细信息

目的考察栀子与闹羊花配伍对闹羊花中闹羊花毒素Ⅱ和闹羊花毒素Ⅲ药动学的影响。方法建立LC-MS/MS测定大鼠血浆中闹羊花毒素Ⅱ和闹羊花毒素Ⅲ的分析方法,并用此方法测定大鼠口服给予闹羊花与栀子配伍液及闹羊花单煎液后大鼠体内的闹羊花毒素Ⅱ和闹羊花毒素Ⅲ的血药浓度,计算其药动学参数并统计分析。结果闹羊花毒素Ⅱ在1~200 ng·mL^(–1)、闹羊花毒素Ⅲ在1~100 ng·mL^(–1)内线性关系良好(r>0.999),质控样本精密度均闹羊花给药和单独给药后体内闹羊花毒素Ⅱ的AUC_(0–t)分别为(260.44±51.67)和(213.39±59.03) h·ng·mL^(–1),闹羊花毒素Ⅲ的AUC_(0–t)分别为(60.97±22.78)和(22.38±5.55)h·ng·mL^(–1)。与闹羊花单煎给药相比,栀子与闹羊花配伍给药后闹羊花毒素Ⅱ的T_(1/2)和MRT_((0–t))显著升高,闹羊花毒素Ⅲ的AUC_(0–t)、T_(1/2)、T_(max)和CL显著升高。结论栀子与闹羊花配伍给药后使闹羊花毒素Ⅲ在大鼠体内的吸收速度和分布体积增加、消除速率降低,闹羊花毒素Ⅱ和闹羊花毒素Ⅲ的半衰期延长,但不影响闹羊花毒素Ⅱ在大鼠体内的吸收速率。

关键词：闹羊花栀子配伍给药药动学闹羊花毒素Ⅲ 闹羊花毒素Ⅱ

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闹羊花不同炮制品的“减毒-存效”比较研究

中草药 2021年第5期52卷 1411-1418页

作者：郭小红冯靖雯张小琼尤强陈鸿平刘友平成都中医药大学药学院西南特色中药资源国家重点实验室四川成都611137 重庆市中医院重庆400021

目的研究古籍记载的闹羊花不同炮制品的毒性和药效的相关性,确定"减毒-存效"的最佳炮制方法。方法采用分光测色仪、高效液相色谱电雾式检测器法(HPLC-CAD)、小鼠急性毒性实验、二甲苯致小鼠耳肿胀实验分别对闹羊花生品及不同炮制品的性... 详细信息

目的研究古籍记载的闹羊花不同炮制品的毒性和药效的相关性,确定"减毒-存效"的最佳炮制方法。方法采用分光测色仪、高效液相色谱电雾式检测器法(HPLC-CAD)、小鼠急性毒性实验、二甲苯致小鼠耳肿胀实验分别对闹羊花生品及不同炮制品的性状(颜色)、指标性成分含量、毒性、药效进行评价。结果相较于生品,闹羊花经炮制后饮片颜色由灰黄色变为棕褐色,指标性成分闹羊花毒素II、III、V含量大幅度降低,3种毒性成分总量的顺序为生品(0.340%)>清蒸(0.181%)>酒蒸(0.178%)>醋蒸(0.154%)。小鼠急性毒性实验表明,闹羊花不同炮制品半数致死量(median lethal dose,LD50)的大小顺序为醋蒸(3.538 g/kg)>酒蒸(3.467 g/kg)>清蒸(2.725 g/kg)>生品(2.172 g/kg),表明炮制达到了"减毒"的目的。抗炎药效实验表明,闹羊花炮制前后均能抑制二甲苯致小鼠耳肿胀,抑制率大小顺序为生品高剂量组(73.25%)>生品中剂量组(58.39%)>酒蒸高剂量组(49.63%)>醋蒸高剂量组(42.48%)>清蒸高剂量组(40.56%),相较于对照组均有显著性差异(P闹羊花的多种炮制方法均有"减毒存效"作用,"减毒"以醋制为优,"存效"以酒制为优,为临床用药提供了依据,同时建立了毒性中药"外观性状-化学成分-毒性-药效"多元评价模式,为闹羊花炮制工艺、质量标准、减毒存效机制等研究奠定了理论基础。

关键词：闹羊花炮制毒性抗炎减毒存效

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闹羊花ISSR-PCR反应体系建立及优化

北方园艺 2020年第21期 96-102页

作者：覃芳史艳财邹蓉唐健民蒋运生熊忠臣广西师范大学生命科学学院广西桂林541006 广西壮族自治区中国科学院广西植物研究所广西桂林541006

以闹羊花的叶片为试材,采用正交实验和单因素试验2种方法对闹羊花ISSR-PCR反应体系的主要影响因子(Taq DNA聚合酶、dNTPs、模板DNA、引物、Mg2+以及反应程序)进行了优化组合。以期为深入开展闹羊花种质资源遗传多样性的研究提供参考依... 详细信息

以闹羊花的叶片为试材,采用正交实验和单因素试验2种方法对闹羊花ISSR-PCR反应体系的主要影响因子(Taq DNA聚合酶、dNTPs、模板DNA、引物、Mg2+以及反应程序)进行了优化组合。以期为深入开展闹羊花种质资源遗传多样性的研究提供参考依据。结果表明:闹羊花ISSR-PCR反应体系中各组分的Taq DNA聚合酶用量为2.5 U,引物浓度为0.2μmol·L-1,Mg2+浓度为1.0 mmol·L-1,dNTPs浓度为0.4 mmol·L-1,模板DNA浓度为60 ng,10×Buffer为2μL,以纯水补足反应总体积至20μL。扩增程序为94℃条件下预变性5 min;94℃条件下变性30 s,49.6℃条件下退火30 s,72℃条件下延伸30 s,以上3个步骤循环45次,最后72℃延伸5 min。

关键词：闹羊花 ISSR-PCR反应体系正交实验单因素试验

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闹羊花中的两个新化合物(英文)

中国天然药物 2013年第5期11卷 525-527页

作者：陈绍农鲍官虎汪礼权秦国伟中国科学院上海药物研究所上海201203 伊利诺大学芝加哥分校药学院芝加哥教育部茶叶生物化学生物技术重点实验室安徽农业大学合肥230036

目的:研究中药闹羊花中的化学成分。方法:运用多种色谱方法进行分离和纯化,采用IR,UV,MS和1D,2D NMR技术进行结构解析。结果:从乙醇提取物中分得2个化合物,推定其结构分别为2α,10α-环氧-3β,5β,6β,14β,16β-五羟基-木藜烷和2,6-二... 详细信息

目的:研究中药闹羊花中的化学成分。方法:运用多种色谱方法进行分离和纯化,采用IR,UV,MS和1D,2D NMR技术进行结构解析。结果:从乙醇提取物中分得2个化合物,推定其结构分别为2α,10α-环氧-3β,5β,6β,14β,16β-五羟基-木藜烷和2,6-二羟基苯甲酸苯甲酯-6-O-α-L-鼠李糖基-(1 3)-β-D-葡萄糖苷。结论:两个化合物均为新化合物。

关键词：闹羊花杜鹃花科木藜芦烷二萜核磁共振

不同花期闹羊花中挥发性成分的GC-IMS分析

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中国实验方剂学杂志 2021年第10期27卷 85-92页

作者：冯靖雯郭小红张砚杨昌林刘友平陈鸿平成都中医药大学药学院中药材标准化教育部重点实验室西南特色中药资源国家重点实验室成都611137 四川省食品药品检验检测院成都611731

目的:明确闹羊花的挥发性成分并比较不同花期样品的挥发性成分差异。方法:采用气相色谱-离子迁移谱法(GC-IMS)对5个不同花期(花蕾期、初开期、半开期、盛开期、盛开末期)闹羊花样品的挥发性成分进行检测;利用GC-IMS谱图结合聚类分析、... 详细信息

目的:明确闹羊花的挥发性成分并比较不同花期样品的挥发性成分差异。方法:采用气相色谱-离子迁移谱法(GC-IMS)对5个不同花期(花蕾期、初开期、半开期、盛开期、盛开末期)闹羊花样品的挥发性成分进行检测;利用GC-IMS谱图结合聚类分析、主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)比较不同花期样品的挥发性成分异同。结果:GC-IMS检测出了不同花期闹羊花中的70种挥发性成分,其中67种为共有成分,定性确定了47种,以醇类、酯类、醛类为主。香芹醇是盛开末期样品特有成分;α-松油醇在初开期样品中的含量最高,盛开期、盛开末期样品中则未检出。活性成分(甲基庚烯酮,壬醛,α-松油醇,桉叶油醇,氧化芳樟醇,1-辛烯-3-醇,反式-3-己烯-1-醇)相对质量分数之和在花期中呈下降趋势。GCIMS图谱显示不同花期样品有各自的特征峰区域,也有共同区域。聚类分析,PCA及OPLS-DA结果均显示,不同花期样品区分明显;通过OPLS-DA筛选获得19种区分不同花期样品的差异成分,包括γ-丁内酯、桉叶油醇、乙酸乙酯等。结论:不同花期闹羊花样品可明显区分且其挥发性成分中的活性物质随花开放的程度逐步散失,可为闹羊花的物质基础完善及不同花期研究提供参考。

关键词：闹羊花挥发性成分花期化学计量学气相色谱-离子迁移谱法(GC-IMS) 香芹醇 α-松油醇

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闹羊花毒之历史认识与评价

中药药理与临床 2018年第5期34卷 161-163页

作者：刘艾林张莉杜冠华药物靶点研究与新药筛选北京市重点实验室中国医学科学院北京协和医学院药物研究所北京100050

本文通过查阅历史文献中对闹羊花毒的记载,结合现代研究分析闹羊花引起毒性反应的物质基础、分子机制,毒性反应的临床主要表现及对策,评价毒性反应与药效活性的关系,以期为闹羊花毒的科学认识及其临床合理应用提供参考。

关键词：闹羊花毒性反应药效活性历史认识