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环腺苷酸对绵羊卵丘-卵母细胞复合体中间隙连接蛋白37表达的影响

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环腺苷酸对绵羊卵丘-卵母细胞复合体中间隙连接蛋白37表达的影响

作者：娜美尔格内蒙古农业大学

学位级别：硕士

哺乳动物卵丘-卵母细胞复合体（Cumulus-oocyte complex,COC）内存在的间隙连接交流（Gap junctional connection,GJC）为卵母细胞成熟过程所需信息交流与营养传递,提供必要支持。间隙连接蛋白37（Connexin 37,Cx37）是卵母细胞分泌的... 详细信息

哺乳动物卵丘-卵母细胞复合体（Cumulus-oocyte complex,COC）内存在的间隙连接交流（Gap junctional connection,GJC）为卵母细胞成熟过程所需信息交流与营养传递,提供必要支持。间隙连接蛋白37（Connexin 37,Cx37）是卵母细胞分泌的主要间隙连接蛋白之一,对卵子发生与卵泡发育过程有着重要作用。高水平环腺苷酸（Cyclic adenosine monophosphate,c AMP）是维持卵母细胞减数分裂恢复的前提条件。研究发现,卵母细胞内c AMP减少会直接造成卵丘与卵母细胞间GJC的关闭与减数分裂恢复;而只要提升c AMP水平,COC中GJC功能即会得到增强。但是在绵羊COC内c AMP与Cx37蛋白表达调控相关研究,尚未见报道。本研究首先采用免疫组织化学与RT-PCR技术检测了未成熟绵羊COC内Cx37蛋白与基因表达。在无促性腺激素的培养体系中添加环腺苷酸调节剂,利用竞争性ELISA技术探究了绵羊COC内环腺苷酸水平变化的时间效应。随后利用实时荧光定量PCR技术和Western-blot技术分别检测了体外培养10 min时Cx37基因与蛋白表达的情况。最后采用Western-blot技术探究了环腺苷酸对绵羊COC内Cx37表达调控的初步机制。研究结果表明:（1）Cx37蛋白定位于绵羊卵母细胞与卵丘细胞中;GJA4基因在绵羊卵母细胞与卵丘细胞内均有表达。（2）在无促性腺激素培养体系中,Forskolin和IBMX处理组与空白对照组相比,体外培养10 min或1 h,均显著提升绵羊COCs内c AMP水平（P＜0.01）。（3）体外培养10 min后,与空白对照组相比,Forskolin和IBMX处理组,均显著提升Cx37基因与蛋白表达（P＜0.05）。（4）体外培养10 min或1 h后,添加Forskolin和IBMX组均能明显提升Cx37蛋白表达（P＜0.05）;与此同时,添加RP-c AMP（一种c AMP特异性竞争性抑制剂）,抑制蛋白激酶A（Protein kinase A,PKA）活性,能够抵消c AMP对Cx37蛋白表达的促进作用。综上,本研究认为,在绵羊COCs中,Cx37同时参与了卵母与卵丘细胞以及卵丘与相邻卵丘细胞之间的间隙连接结构形成。c AMP对于绵羊COCs内Cx37蛋白和基因表达,具有正向调节作用且其机制可能与PKA激活有关。本研究探讨了绵羊卵母细胞成熟过程中环腺苷酸参与间隙连接蛋白37表达的初步调节机制,为进一步揭示绵羊卵母细胞成熟机制提供了试验支持。

关键词：绵羊卵丘-卵母细胞复合体环腺苷酸间隙连接蛋白37 基因表达蛋白表达

飞行因素、间隙连接蛋白37及基质金属蛋白酶9与冠状动脉粥样硬化

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贵州医科大学学报 2017年第8期42卷 869-871页

作者：牟宗阳罗惠兰贵州医科大学贵州贵阳550004 中国人民解放军空军总医院北京100036

冠状动脉粥样硬化（atherosclerosis）是诱发各种心血管系统疾病,如冠心病、心肌梗塞的一个主要原因。冠脉硬化的发病率和死亡率非常高,在许多发达国家中,冠脉硬化引起的疾病均排在死亡原因的第一位,但自20世纪60年代开始,一些发达国家... 详细信息

冠状动脉粥样硬化（atherosclerosis）是诱发各种心血管系统疾病,如冠心病、心肌梗塞的一个主要原因。冠脉硬化的发病率和死亡率非常高,在许多发达国家中,冠脉硬化引起的疾病均排在死亡原因的第一位,但自20世纪60年代开始,一些发达国家的冠心病死亡率呈下降趋势,而在我国冠心病的发病率却呈明显上升趋势,且发病年龄有年轻化的趋势。

关键词：飞行员间隙连接蛋白37 基质金属蛋白酶9 冠状动脉疾病动脉粥样硬化

Connexin37基因多态性与冠心病的相关性关系

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Connexin37基因多态性与冠心病的相关性关系

作者：谢学建第四军医大学

学位级别：硕士

动脉粥样硬化是一种动脉血管壁的慢性炎症性疾病，在其疾病发生发展早期过程中内皮细胞的功能失调起着一定的作用。维持内皮细胞功能的完整性需要单个细胞之间的相互作用，细胞间隙连接是细胞间信息交换的重要通道。运用抗Cx37抗体进行... 详细信息

动脉粥样硬化是一种动脉血管壁的慢性炎症性疾病，在其疾病发生发展早期过程中内皮细胞的功能失调起着一定的作用。维持内皮细胞功能的完整性需要单个细胞之间的相互作用，细胞间隙连接是细胞间信息交换的重要通道。运用抗Cx37抗体进行免疫检测证实了间隙连接蛋白(Connexin,Cx)存在于冠状动脉内皮细胞上。而且一些研究表明Cx37基因C1019T突变与颈动脉粥样硬化、急性心肌梗死及冠心病有关。基因的多态性因种族的差异而有所不同，我国汉族人群Cx37基因的多态性是否与冠心病有关，尚待研究。本研究的目的是探讨间隙连接蛋白37(Connexin 37，Cx37)基因多态性在陕西汉族人群中的分布，并分析Cx37基因多态性与冠心病(Coronary heart disease，CHD)的相关关系。采用病例一病例对照的设计方法，应用聚合酶链反应．限制性片段长度多态性(Polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism，PCR-RFLP)技术，检测陕西地区汉族人群无血缘关系的150例冠心病患者和116例对照者Cx37基因C1019T位点多态性，比较

关键词：冠心病间隙连接蛋白37 基因多态性基因频率

TGF-βRⅡ、SCF、Cx-37基因和蛋白在卵巢早衰中的表达及意义

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疑难病杂志 2020年第5期19卷 505-509页

作者：李振淼章青马妍盛菲李文中国人民解放军海军军医大学附属长征医院生殖医学中心上海200000

目的探讨转化生长因子β受体Ⅱ(TGF-βRⅡ)、干细胞因子(SCF)、间隙连接蛋白37(Cx-37)在卵巢早衰(POF)中的表达及意义。方法2019年6月—9月在中国人民解放军海军军医大学附属长征医院动物实验室进行实验,将雌性大鼠40只按随机数字表法... 详细信息

目的探讨转化生长因子β受体Ⅱ(TGF-βRⅡ)、干细胞因子(SCF)、间隙连接蛋白37(Cx-37)在卵巢早衰(POF)中的表达及意义。方法2019年6月—9月在中国人民解放军海军军医大学附属长征医院动物实验室进行实验,将雌性大鼠40只按随机数字表法分为实验组和对照组,各20只。实验组大鼠予雷公藤多苷片悬浮液50 mg·kg^-1·d^-1,1次/d,共2周,制作POF模型;对照组大鼠给予上述相同剂量的生理盐水灌胃,1次/d,共2周。之后抽取血液并处死,同时留存大鼠卵巢。卵巢切片后HE染色,PCR法测定TGF-βRⅡ、SCF、Cx-37 mRNA表达,Western-Blot法测定TGF-βRⅡ、SCF、Cx-37蛋白表达。结果实验组大鼠成熟卵泡、次级卵泡及初级卵泡明显少于对照组,闭锁卵泡明显多于对照组,差异均有统计学意义(t/P=19.899/0.000,10.407/0.000,8.364/0.000,18.491/0.000);血清E2水平低于对照组,血清FSH水平高于对照组(t/P=16.067/0.000,37.947/0.000);TGF-βRⅡ、Cx-37 mRNA和蛋白表达水平低于对照组,SCF mRNA和蛋白表达水平高于对照组,差异均有统计学意义(t/P=12.642/0.000,12.081/0.000,69.397/0.000,50.447/0.000,33.001/0.000,48.152/0.000)。结论卵巢早衰大鼠的SCF蛋白呈现高水平表达,TGF-βRⅡ、Cx-37蛋白呈现低水平表达,在卵巢早衰疾病的发生发展过程中起着重要的作用,可为减缓卵巢早衰提供新的临床指标和靶向治疗思路。

关键词：卵巢早衰转化生长因子β受体Ⅱ 干细胞因子间隙连接蛋白37 大鼠

颗粒细胞Cx37的表达与预测卵泡成熟率及IVF-ET妊娠结局的相关性研究

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贵州医药 2020年第9期44卷 1352-1354页

作者：须文驰陈卓黄官友赵淑云贵州省人民医院生殖医学科贵州贵阳550003 贵州医科大学附属医院生殖中心贵州贵阳550002

目的探讨颗粒细胞表面间隙连接蛋白(connexin,Cx)37的表达与卵泡成熟情况及辅助生殖技术(IVF-ET)妊娠结局的相关性。方法选择64例拟行常规IVF-ET治疗患者的卵泡液,梯度密度离心后收集颗粒细胞,采用流式细胞术检测颗粒细胞表面Cx37的表达... 详细信息

目的探讨颗粒细胞表面间隙连接蛋白(connexin,Cx)37的表达与卵泡成熟情况及辅助生殖技术(IVF-ET)妊娠结局的相关性。方法选择64例拟行常规IVF-ET治疗患者的卵泡液,梯度密度离心后收集颗粒细胞,采用流式细胞术检测颗粒细胞表面Cx37的表达,与MⅡ卵率、hCG日孕酮及雌二醇值进行相关性研究;根据术后14天hCG值分为妊娠组与未妊娠组,比较两组间患者年龄、基础内分泌值、获卵数、Cx37表达情况。结果妊娠组与非妊娠组被检者的年龄、基础内分泌值、hCG日孕酮及雌二醇比较,差异均无统计学意义(P>0.05);妊娠组MⅡ卵率高于非妊娠组MⅡ卵率,差异有统计学意义(P37的表达低于非妊娠组,差异具有统计学意义(P37的表达水平与MⅡ卵率呈负相关性;Cx37的表达水平与hCG日孕酮、雌二醇水平呈正相关性,差异均有统计学意义(P37,在一定程度可对卵泡成熟做出预判,并以期预测辅助生殖技术助孕的妊娠率。

关键词：辅助生殖技术卵泡液间隙连接蛋白37 卵泡成熟