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间质cd10、Ezrin、Nek2与乳腺癌发生发展关系的初步研究

间质CD10、Ezrin、Nek2与乳腺癌发生发展关系的初步研究

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作者：张荣菊天津医科大学

学位级别：硕士

第一部分目的检测间质cd10和Ezrin在乳腺导管内癌及浸润性导管癌中的表达,观察两者的表达与乳腺癌临床病理学特征和预后的关系,探讨两者在乳腺癌发展中的作用。方法采用免疫组织化学S-P法检测乳腺导管内癌60例(低/中分级30例和高分... 详细信息

第一部分目的检测间质cd10和Ezrin在乳腺导管内癌及浸润性导管癌中的表达,观察两者的表达与乳腺癌临床病理学特征和预后的关系,探讨两者在乳腺癌发展中的作用。方法采用免疫组织化学S-P法检测乳腺导管内癌60例(低/中分级30例和高分级30例)和浸润性导管癌60例(Ⅰ级/Ⅱ级30例和Ⅲ级30例)中间质cd10和Ezrin的表达。选取表达间质cd10和Ezrin的乳腺癌组织作阳性对照,以PBS替代一抗作阴性对照。结果 (1)间质cd10的表达在导管内癌中为阴性36例、弱阳性18例、强阳性6例,浸润性导管癌中分别为25例、18例、17例,浸润性导管癌中间质cd10的表达水平高于导管内癌间质cd10的表达水平(z=-2.465,P0.05);肿物最大径=2cm组与>2cm组之间差异无统计学意义(z=-0.892,P>0.05);ER阳性组与ER阴性组之间差异无统计学意义(z=-0.647,P>0.05);PR阳性组与PR阴性组之间差异无统计学意义(z=-0.213,P>0.05);浸润性导管癌中的淋巴结阳性组与阴性组之间差异无统计学意义(z=-0.712,P>0.05)。(2)Ezrin在导管内癌组的定位为癌细胞腔面15例、胞膜13例、胞质21例,在浸润性导管癌组分别为5例、6例、38例,与导管内癌相比Ezrin在浸润性导管癌癌细胞胞质中的表达率更高(χ2=12.477,P0.05);肿物最大径=2cm组与>2cm组之间差异无统计学意义(χ2=0.314,P>0.05);ER阳性组与ER阴性组之间差异无统计学意义(χ2=3.464,P>0.05);PR阳性组与PR阴性组之间差异无统计学意义(χ2=2.195,P＞0.05);浸润性导管癌中的淋巴结阳性组与阴性组之间差异无统计学意义(χ2=3281,P>0.05)。(3)间质cd10表达的增加及Ezrin在细胞内亚定位的变化与无病生存期呈成正相关。结论与导管内癌相比浸润性导管癌中间质cd10表达增加、Ezrin在癌细胞胞质内的表达率更高,这提示间质cd10表达的增加和Ezrin在癌细胞内亚定位的改变可能在导管内癌发展为浸润性导管癌的局部浸润过程中起重要作用。间质cd10阳性表达及Ezrin在癌细胞胞质表达增加提示预后不良与二者促进局部浸润发生的作用相一致。第二部分目的检测乳腺癌多阶段发生发展模式的不同阶段NIMA相关激酶2(NIMA-related kinase 2, Nek2)的表达水平和细胞内亚定位及两者的变化趋势,观察其与中心体异常关系,进而探讨Nek2的表达水平和细胞内亚定位与乳腺癌发生发展的关系。方法以国内外相关研究为依据,用乳腺普通增生细胞系MCF10A、乳腺不典型增生细胞系MCF10AT、乳腺导管内癌细胞系***和乳腺浸润性导管癌细胞系MCF10Cal四个细胞系建立乳腺癌的多阶段发生发展模型。采用流式细胞术对四种细胞的DNA倍性进行检测,western blot技术检测四种细胞中Nek2蛋白的表达水平,免疫荧光双染色技术观察Nek2在四种细胞内的亚定位及四种细胞系中心体的异常情况。结果 ***倍性检测：以MCF10A作为DNA二倍体的内标准(DI=1.0),得到MCF10AT的DNA指数为1.0,***的DNA指数为1.2, MCF10Cal的DNA指数为1.5。 2.中心体异常：乳腺导管上皮普通增生细胞MCF10A内异常中心体的百分率为1%、不典型增生细胞MCF1OAT内异常中心体的百分率为3%、导管内癌细胞***内异常中心提的百分率为5.6%、浸润性癌细胞MCF10Cal内异常中心体的百分率为8%。 ***2表达：在乳腺癌发生发展模型中Nek2的表达情况为普通增生细胞MCF10A阴性、不典型增生细胞MCF1OAT低表达、导管内癌细胞***与浸润性癌细胞MCF10Cal高表达。Nek2在四种细胞中均表达于胞浆(包括中心体)及胞核。结论 ***10A与MCF10AT为二倍体,***和MCF10Cal为异倍体。普通增生进展为不典型增生的过程中DNA倍性不发生变化,不典型增生进展为导管内癌过程中由二倍体成为异倍体。 2.在乳腺癌发生发展的过程中异常中心体的百分率发生变化。MCF10Cal与***含异常中心体的细胞数目比MCF10A多;MCF10Ca1含异常中心体的细胞数目比MCF10AT多;MCF10A和MCF1OAT细胞间、MCF1OAT和***细胞

关键词：乳腺癌间质cd10 Ezrin 浸润发生发展 DNA倍性中心体 Nek

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