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检测牛乳κ-酪蛋白的间接竞争elisa法与间接ELISA法比较

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中国畜牧兽医 2018年第4期45卷 1114-1119页

作者：宋宏新韩波李珊薛海燕陕西科技大学食品与生物工程学院西安710021

试验旨在建立一种快速简单检测牛乳κ-酪蛋白(κ-CN)含量的酶联免疫吸附(elisa)方法,为解决牛乳蛋白掺假问题提供一定的技术支持。以牛乳κ-CN为包被抗原,以酶标抗体(HRP-IgG)为检测抗体分别建立间接竞争elisa法和间接ELISA法,并对两种... 详细信息

试验旨在建立一种快速简单检测牛乳κ-酪蛋白(κ-CN)含量的酶联免疫吸附(elisa)方法,为解决牛乳蛋白掺假问题提供一定的技术支持。以牛乳κ-CN为包被抗原,以酶标抗体(HRP-IgG)为检测抗体分别建立间接竞争elisa法和间接ELISA法,并对两种检测方法进行分析比较。结果表明:对于间接竞争elisa法,κ-CN抗原包被浓度为2.5μg/mL,线性范围为62.5~1 000.0ng/mL,变异系数间接ELISA法,κ-CN抗原包被浓度为1.56μg/mL,线性范围为0.098~3.125μg/mL,变异系数法,间接竞争elisa法检测耗时较短,抗体应用量较少,而间接法不需要包被成本较高的目标标准蛋白,相关系数也较高,但其检测体系组成成分较多,且需包被待测样品,较难组成elisa试剂盒体系,不宜用于现场检测。因此,大规模制备elisa试剂盒体系用于快速检测蛋白含量时可采用间接竞争法,不仅抗体应用量少、节约成本且快速、简单,可更好地用于科研实践。

关键词：牛乳κ-酪蛋白间接竞争elisa法间接ELISA法

双抗原夹心法、间接ELISA法在无偿献血者HCV抗体检测中的比较分析

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中文科技期刊数据库（全文版）医药卫生 2022年第7期 0005-0007页

作者：刘鹏飞阜阳市中心血站安徽阜阳236000

通过对比双抗原夹心法、间接ELISA法在丙型肝炎(HCV)抗体检测,对血站丙型肝炎抗体筛查进行研究分析。方法:选择2021年8月至2022年4月期间阜阳市中心血站采集的无偿献血者标本38169例,分别采用双抗原夹心法、间接法、荧光定量PCR法进行... 详细信息

通过对比双抗原夹心法、间接ELISA法在丙型肝炎(HCV)抗体检测,对血站丙型肝炎抗体筛查进行研究分析。方法:选择2021年8月至2022年4月期间阜阳市中心血站采集的无偿献血者标本38169例,分别采用双抗原夹心法、间接法、荧光定量PCR法进行丙肝检验。以荧光定量PCR为金标准,分析间接法、双抗原夹心法在HCV抗体检测结果的敏感度、特异度、准确度。结果:荧光定量PCR检测HCV阳性38例,阴性38131例;间接ELISA法检测阳性189例,阴性37980例;双抗原夹心法检测阳性58例,阴性38111例。双抗原夹心法敏感度(97.37%)高于间接ELISA法敏感度(60.53%)差异有统计学意义( P法检测HCV抗体与荧光定量PCR法筛查丙型肝炎核酸结果具有较高的一致性(Kappa0.771),接elisa法检测HCV抗体与荧光定量PCR法筛查丙型肝炎核酸结果一致性差(Kappa0.201),双抗原夹心法检出效率明显高于间接法,更为精准。结论:双抗原夹心法检测较间接ELISA法检测HCV抗体具有更高的敏感度、特异度和准确率,可作为血站筛查HCV抗体筛查的首选方式。

关键词：间接ELISA法双抗原夹心法丙型肝炎病毒抗体实时荧光定量PCR法

评价铜绿假单胞菌结合疫苗免疫血清间接ELISA法的建立

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现代预防医学 2012年第23期39卷 6248-6250页

作者：姜晓谢茂超余倩四川大学公共卫生学院医学检验教研室成都蓉生药业有限责任公司抗体研究室

目的建立间接ELISA法用于评价铜绿假单胞菌多糖蛋白结合疫苗免疫血清效价。方法对elisa法的包被、封闭、加样、加酶条件进行系列研究。结果采用PBS缓冲体系,选择0.25μg/ml抗原作为包被浓度,经37℃振荡30min包被,用1%BSA作为封闭剂,选用... 详细信息

目的建立间接ELISA法用于评价铜绿假单胞菌多糖蛋白结合疫苗免疫血清效价。方法对elisa法的包被、封闭、加样、加酶条件进行系列研究。结果采用PBS缓冲体系,选择0.25μg/ml抗原作为包被浓度,经37℃振荡30min包被,用1%BSA作为封闭剂,选用1︰8000稀释的酶标二抗,用进口的NUNC酶标板进行铜绿假单胞菌多糖蛋白结合疫苗免疫血清效价的检测,可获得较好的结果。结论建立的间接ELISA法具有灵敏性高、重复性好的特点,可用于评价铜绿假单胞菌多糖蛋白结合疫苗免疫血清的效价。

关键词：铜绿假单胞菌多糖蛋白结合疫苗间接ELISA法

基于间接ELISA法检测长爪沙鼠肝脏基因组DNA整体甲基化的初步探索

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基于间接ELISA法检测长爪沙鼠肝脏基因组DNA整体甲基化的初步探索

间接ELISA法检测羊促乳素抗体方法的建立

第十三届中国实验动物科学年会

作者：王志远刘月环浙江省医学科学院

目的用间接ELISA法检测长爪沙鼠肝脏基因组DNA整体甲基化的水平,以用于今后评价沙鼠非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)模型及筛选甲基化水平的遗传标记。方法选取新生仔鼠6只(ZS组),3月龄鼠12只(正常对照组6只,标记为3Y组),高脂饮食诱发的模型... 详细信息

目的用间接ELISA法检测长爪沙鼠肝脏基因组DNA整体甲基化的水平,以用于今后评价沙鼠非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)模型及筛选甲基化水平的遗传标记。方法选取新生仔鼠6只(ZS组),3月龄鼠12只(正常对照组6只,标记为3Y组),高脂饮食诱发的模型组6只,标记为4M组),8月龄中老年鼠6只(标记为LN组),均为雄性,按组采集血清(新生鼠除外)用于总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)检测,同时采集肝脏标本二份,一份作常规HE染色的病理学观察,一份提基因组DNA,用elisa法试剂盒检测肝脏基因组DNA整体甲基化的水平(即5-mc含量)。结果模型组鼠及8月龄组沙鼠均出现高脂血症,血清TC及TG均不同程度地出现了显著上升,对照组鼠血脂正常。病理学检查发现,模型组与8月龄组肝脏出现较为明显的脂肪变性,而青年组肝脏无异常发现,新生仔鼠肝血窦中可见大量成堆分布有单核细胞和红细胞。肝脏基因组DNA整体甲基化检测结果看出高脂饲料诱导的模型组青年沙鼠>新生仔鼠>老龄鼠>对照组青年鼠。结论间接ELISA法检测肝脏基因组DNA整体甲基化水平简便、迅速,成本低,可以作为评价其表观遗传学的一种方法。

关键词：非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）模型长爪沙鼠基因组DNA整体甲基化水平 5-mC 间接ELISA法

来源： cnki会议评论

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西北农林科技大学学报（自然科学版） 2009年第2期37卷 47-51页

作者：于秋丽赵晓娥胡林勇陈玉林马保华西北农林科技大学动物医学院陕西杨凌712100 西北农林科技大学动物科技学院陕西杨凌712100

【目的】建立促乳素单克隆抗体制备中筛选阳性分泌细胞的间接elisa检测方法。【方法】用促乳素纯品与Freund佐剂免疫6--8周龄雌性BALB／c小鼠，初次免疫采用抗原与完全Freund佐剂，每2周免疫1次，从第2次开始采用抗原与不完全Freund佐... 详细信息

【目的】建立促乳素单克隆抗体制备中筛选阳性分泌细胞的间接elisa检测方法。【方法】用促乳素纯品与Freund佐剂免疫6--8周龄雌性BALB／c小鼠，初次免疫采用抗原与完全Freund佐剂，每2周免疫1次，从第2次开始采用抗原与不完全Freund佐剂，免疫4次后尾静脉采血，收集血清制备阳性对照抗体，以未免疫的BALB／c小鼠血清为阴性对照，筛选间接ELISA法检测促乳素抗体的最佳反应条件，并对单克隆抗体制备中的阳性细胞进行筛选。【结果】间接ELISA法的最佳反应条件：血清稀释倍数为1：200，抗原包被质量浓度为100ng／mL，封闭液为1％牛血清白蛋白，酶标抗体的工作浓度为1：10000，酶标抗体作用时间为37℃90min，底物作用时间37℃30min。用该方法检测融合的杂交瘤细胞，最终获得OD450为0．875和0．460的阳性细胞株。

关键词：促乳素抗体间接ELISA法

双抗原夹心elisa法与间接ELISA法检测丙型肝炎病毒抗体对比分析

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临床研究 2019年第6期27卷 156-157页

作者：孙丽商丘市第四人民医院检验科河南商丘476100

目的分别探讨双抗原夹心酶联免疫吸附法(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay, elisa)与间接ELISA法对丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus, HCV)抗体(抗-HCV)的临床检测价值。方法回顾性分析2016年1月～2019年2月期间在本院进行无偿献血的10... 详细信息

目的分别探讨双抗原夹心酶联免疫吸附法(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay, elisa)与间接ELISA法对丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus, HCV)抗体(抗-HCV)的临床检测价值。方法回顾性分析2016年1月～2019年2月期间在本院进行无偿献血的100人次(100份标本)的临床资料,其中包括抗-HCV阴性标本79份,抗-HCV阳性标本21份,上述所有标本均需接受双抗原夹心elisa法与间接ELISA法检测,分析不同检测方法的阳性检出率、特异度与准确度。结果双抗原夹心elisa法的阳性检出率为97.47%,间接ELISA法的阳性检出率为86.08%,不同检测方法阳性检出率对比,差异有统计学意义(P elisa法的准确度与特异度分别为98.00%、100.00%,间接ELISA法为85.00%、80.95%,不同检测方法对比,差异有统计学意义(P 间接ELISA法相较而言,双抗原夹心elisa法为检测抗-HCV阳性标本的有效手段,且阳性检出率与特异度均较高,利于临床应用。

关键词：丙型肝炎病毒抗体双抗原夹心elisa法间接ELISA法

直接elisa法与间接ELISA法检测HIV抗体的对比分析

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中国实用医药 2012年第21期7卷 111-112页

作者：乔健健宜兴市疾病预防控制中心 214200

目的合理选择检测试剂,建立一种准确的elisa检测方法。方法直接elisa法和间接ELISA法对不同血液标本分别进行HIV抗体的检测,并对结果进行比较分析。结果间接ELISA法检测后会出现不同例数的假阳性结果,而直接elisa法未出现假阳性结果。... 详细信息

目的合理选择检测试剂,建立一种准确的elisa检测方法。方法直接elisa法和间接ELISA法对不同血液标本分别进行HIV抗体的检测,并对结果进行比较分析。结果间接ELISA法检测后会出现不同例数的假阳性结果,而直接elisa法未出现假阳性结果。结论直接elisa法检测结果假阳性率低,作为新一代试剂,可逐步取代间接ELISA法。

关键词：酶联接免疫吸附剂测定法直接elisa法间接ELISA法 HIV 检测

利用酵母重组抗原U1RNP-70K建立间接ELISA法检测抗U1RNP-70K抗体

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福建医药杂志 2010年第6期32卷 97-99页

作者：程武杨湘越福建省福州市第六医院检验科福州350004 南京军区福州总医院检验科

目的利用纯化的酵母重组U1RNP-70K抗原建立间接ELISA法,用于检测抗U1RNP-70K抗体。方法将巴斯德毕赤酵母菌重组表达的U1RNP-70K抗原包被于聚苯乙烯微量反应板,与待检血清中抗U1RNP-70K抗体反应后,经洗涤,再加入辣根过氧化物酶标记羊抗人... 详细信息

目的利用纯化的酵母重组U1RNP-70K抗原建立间接ELISA法,用于检测抗U1RNP-70K抗体。方法将巴斯德毕赤酵母菌重组表达的U1RNP-70K抗原包被于聚苯乙烯微量反应板,与待检血清中抗U1RNP-70K抗体反应后,经洗涤,再加入辣根过氧化物酶标记羊抗人IgG与之结合,然后用四甲基联苯胺(TMB)作用显色。结果间接ELISA法与欧蒙斑点酶免疫法的阳性符合率为94.74%(54/57),阴性符合率为98.00%(49/50),总符合率为96.26%(103/107);两者差异无统计学意义(P=0.617,P>0.01)。结论本研究利用酵母重组U1RNP-70K抗原成功建立了用于检测抗U1RNP-70K抗体的间接ELISA法,具有良好的临床诊断应用前景。

关键词：间接ELISA法酵母重组抗原抗体反应检测羊抗人IgG 辣根过氧化物四甲基联苯胺斑点酶免疫法

己烯雌酚单克隆抗体细胞株的筛选及间接ELISA法的建立

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中国兽医科技 2003年第11期33卷 12-16页

作者：单国强刘雅红康彦龙华南农业大学兽医学院广东广州510642 南开大学元素有机化学研究所天津300071

以自行合成的己烯雌酚 (DES)免疫原免疫BALB/c小鼠 ,采用细胞融合、显微克隆等单克隆抗体技术 ,制备了 5株抗DES单克隆抗体分泌杂交瘤细胞株 (7B6、4B10、1G10、4E4、2C7) ;选择其中的 7B6株抗体 ,建立了间接竞争elisa法 (indirectcompe... 详细信息

以自行合成的己烯雌酚 (DES)免疫原免疫BALB/c小鼠 ,采用细胞融合、显微克隆等单克隆抗体技术 ,制备了 5株抗DES单克隆抗体分泌杂交瘤细胞株 (7B6、4B10、1G10、4E4、2C7) ;选择其中的 7B6株抗体 ,建立了间接竞争elisa法 (indirectcompetitiveinhibitionelisa) ,通过初步优化 ,其检测限为 10 pg/孔 ,与同类二苯乙烯类雌激素的交叉反应高 ,而与天然雌激素雌二醇几乎无交叉反应性。这项研究为DES残留检测试剂盒的开发打下了基础。

关键词：己烯雌酚单克隆抗体细胞株筛选间接ELISA法食品药物残留检测试剂盒