检索结果-南通市图书馆

间接免疫荧光检测石蜡切片中鸭肿头出血症病毒及抗原定位方法的初步建立

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中国农业科学 2008年第3期41卷 868-874页

作者：张舍郁程安春汪铭书沈婵娟李传峰四川农业大学动物医学院禽病防治中心四川农业大学动物医学院禽病防治中心四川雅安625014 四川雅安625014动物疾病与人类健康四川省重点实验室

【目的】建立间接免疫荧光(IFA)检测石蜡切片中鸭肿头出血症病毒(DSHDV)的方法,为DSHDV感染的实验室诊断、DSHDV在感染鸭组织细胞中的亚细胞定位和动态研究提供有效的检测手段。【方法】用差速离心纯化DSHDV,将纯化DSHDV免疫家兔制备兔... 详细信息

【目的】建立间接免疫荧光(IFA)检测石蜡切片中鸭肿头出血症病毒(DSHDV)的方法,为DSHDV感染的实验室诊断、DSHDV在感染鸭组织细胞中的亚细胞定位和动态研究提供有效的检测手段。【方法】用差速离心纯化DSHDV,将纯化DSHDV免疫家兔制备兔抗DSHDV高免血清,并以DEAE-SephadexA-50柱层析纯化出兔抗DSHDVIgG,建立IFA检测石蜡切片中DSHDV的方法;利用建立的IFA对28日龄鸭人工感染DSHDV死亡鸭不同组织器官以及临床样品进行检测。应用PAGE电泳分析DSHDV基因组特性。【结果】IFA最佳条件为:切片在0.01mol·L-1柠檬酸(pH6.0)缓冲液微波修复20min后,以10%马血清37℃下封闭30min,然后加入1﹕50的一抗4℃孵育过夜,最后加入1﹕100FITC标记的含0.01%伊文斯蓝的二抗37℃孵育30min。IFA检测DSHDV感染死亡鸭肝脏石蜡切片为阳性,而检测鸭瘟、禽流感病毒(H5N1)、鸭病毒性肝炎、鸭疫里默氏杆菌感染死亡鸭肝脏石蜡切片为阴性。IFA检测28日龄人工感染DSHDV死亡鸭的不同组织器官,心、肝、脾、胰、肺、肾、法氏囊、食管、气管、胸肌、胸腺、十二指肠、空肠、回肠、盲肠和直肠为阳性;哈德氏腺、脑、皮肤、腺胃为阴性。阳性组织中病毒抗原主要分布在细胞浆。经甲醛固定保持1～6年的临床死亡鸭的病毒分离阳性肝脏,IFA检测结果也呈阳性。DSHDV具有呼肠孤病毒特征,有10条分节段核酸,呈"334"分布。【结论】建立的检测石蜡组织切片中DSHDV抗原的IFA具有直观、特异性强的优点,应用于DSHDV在感染鸭组织细胞中的亚细胞定位具有良好效果,可用于DSHDV感染的实验室诊断、病原在鸭组织细胞中分布研究。DSHDV抗原存在感染细胞浆,肠道、肾脏、法氏囊和胸腺是DSHDV侵害的主要靶器官。

关键词：间接免疫荧光鸭病毒性肿头出血症病毒检测抗原定位

间接免疫荧光法在小鼠卵子sPLA2 GIID蛋白表达检测中的应用

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实用医学杂志 2011年第7期27卷 1141-1144页

作者：李红阁吕建新陈文颖石其贤倪崖温州医学院 325035 浙江省医学科学院杭州市310013

目的:建立间接免疫荧光检测小鼠卵子上未知蛋白表达的方法,为实验室开展卵子上未知蛋白表达的研究提供参考。方法:参考间接免疫荧光检测未知蛋白的常用方法,优化实验步骤中各个环节,通过系统性的回顾和分析本实验室近一年来几个阶段对... 详细信息

目的:建立间接免疫荧光检测小鼠卵子上未知蛋白表达的方法,为实验室开展卵子上未知蛋白表达的研究提供参考。方法:参考间接免疫荧光检测未知蛋白的常用方法,优化实验步骤中各个环节,通过系统性的回顾和分析本实验室近一年来几个阶段对小鼠卵子sPLA2GIID型蛋白表达的探索,建立间接免疫荧光检测小鼠卵子上未知蛋白表达的新方法;并用免疫印迹法(Westernblott)验证结果的准确性。结果:证明小鼠卵子上有很丰富的sPLA2GIID型蛋白的表达;免疫印迹法证实小鼠卵子存在特异的分子质量为16000蛋白条带。结论:本方法测定结果准确可靠、操作简便、重复性好,适宜于实验室推广。

关键词：小鼠卵子超促排卵 sPLA2GIID蛋白间接免疫荧光

间接免疫荧光染色检测石蜡切片中的鸭病毒性肠炎病毒和抗原定位

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中国兽医学报 2008年第8期28卷 871-875页

作者：程安春韩晓英朱德康汪铭书袁桂萍廖永洪徐超四川农业大学动物医学院禽病防治研究中心

差速离心和蔗糖密度梯度离心纯化鸭病毒性肠炎病毒(DEV)免疫兔制备兔抗DEV高免血清后,用DEAE-Sephadex A-50柱层析纯化的兔抗DEVIgG建立了间接免疫荧光染色法(IFA)检测石蜡切片中DEV的方法。IFA的最佳条件为:石蜡切片用10mmol/L pH6.0... 详细信息

差速离心和蔗糖密度梯度离心纯化鸭病毒性肠炎病毒(DEV)免疫兔制备兔抗DEV高免血清后,用DEAE-Sephadex A-50柱层析纯化的兔抗DEVIgG建立了间接免疫荧光染色法(IFA)检测石蜡切片中DEV的方法。IFA的最佳条件为:石蜡切片用10mmol/L pH6.0的柠檬酸缓冲液为微波修复液微波修复10min,胰酶修复20min;10%小牛血清室温封闭30min;加入1∶25的兔抗DEVIgG于4℃孵育过夜;再加入FITC标记的羊抗兔IgG于37℃孵育45min。以建立的IFA对DEV人工皮下感染死亡鸭的各组织器官进行检测,在死亡鸭的脾脏、胸腺、法氏囊、肝脏、食道、十二指肠、直肠及肺脏中检测到DEV抗原。研究表明,IFA检测石蜡切片中的DEV具有直观、特异性强的优点,是对DEV进行检测和抗原定位的良好方法。

关键词：间接免疫荧光石蜡切片鸭病毒性肠炎病毒检测抗原定位

间接免疫荧光染色检测鸭源副黏病毒及在鸭体内的抗原定位

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中国兽医学报 2011年第2期31卷 189-193页

作者：吴焕荣刁有祥李宏梅颜赟孙杰李瑶瑶孙洪磊山东农业大学动物科技学院山东泰安271018

以抗新城疫病毒F蛋白的单克隆抗体为一抗,建立了间接免疫荧光染色法(IFA)检测石蜡切片中鸭副黏病毒(DPMV)的方法。以建立的IFA对DPMV人工感染鸭的各组织器官进行检测,结果显示:各组织器官均能检测到DPMV,但不同时间取样,阳性信号分布的... 详细信息

以抗新城疫病毒F蛋白的单克隆抗体为一抗,建立了间接免疫荧光染色法(IFA)检测石蜡切片中鸭副黏病毒(DPMV)的方法。以建立的IFA对DPMV人工感染鸭的各组织器官进行检测,结果显示:各组织器官均能检测到DPMV,但不同时间取样,阳性信号分布的器官不同。脾脏、胸腺、法氏囊、肠道、肝脏、肺脏DPMV的阳性检出率较高,表明这些器官为DPMV的主要靶器官。在所检测的阳性组织中,病毒抗原分布在细胞浆中。IFA检测石蜡切片中的DPMV具有直观、特异性强的优点,是对DPMV进行检测和抗原定位的良好方法。

关键词：间接免疫荧光鸭副黏病毒检测抗原定位

间接免疫荧光方法检测小鼠睾丸和附睾组织Hsp70的表达

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湖北农业科学 2009年第3期48卷 670-672页

作者：姜忠玲青岛农业大学动物科技学院山东青岛266109

采用间接免疫荧光方法对小鼠睾丸和附睾组织Hsp70的表达进行检测。结果表明,小鼠睾丸组织Hsp70呈极强的表达(+++),并且在各级生精细胞及支持细胞都呈极强表达;小鼠附睾头、附睾体、附睾尾的Hsp70呈现极强表达(+++),主要在附睾上皮细胞,... 详细信息

采用间接免疫荧光方法对小鼠睾丸和附睾组织Hsp70的表达进行检测。结果表明,小鼠睾丸组织Hsp70呈极强的表达(+++),并且在各级生精细胞及支持细胞都呈极强表达;小鼠附睾头、附睾体、附睾尾的Hsp70呈现极强表达(+++),主要在附睾上皮细胞,而管腔内精子偶见阳性染色。说明间接免疫荧光方法能够特异性、原位地检测小鼠睾丸和附睾组织Hsp70的表达,而且操作简单,适用于研究Hsp70在精子发生和成熟过程的作用。

关键词：小鼠睾丸附睾 Hsp70 间接免疫荧光

间接免疫荧光试验在全程尿分段检菌对男性淋病治疗程度判定上的应用

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中国皮肤性病学杂志 1992年第4期6卷 232-233页

作者：郭永禄卜秀兰赵志贤赵春华林文静长春市中心医院皮肤科 130051 长春市中心医院检验科 130051

为了准确的判定淋病双球菌在男性患者体内是否已绝迹,我院自1987年以来,以间接免疫荧光试验对228例男性淋病病人进行了全程尿分段检菌的检测,现将试验结果报告如下。临床资料共观察228例男性淋病患者。

关键词：淋病男性间接免疫荧光

间接免疫荧光技术在内质网观察实验教学中的应用

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实验技术与管理 2016年第10期33卷 168-170页

作者：王宏刚陈成彬王春国陈力宋文芹白艳玲张金红刘方南开大学生物实验教学中心天津300071

内质网的观察实验一直是"细胞生物学实验"的经典教学内容,该实验的教学主要采用活体染色的方式来开展。为了提高实验教学的效果,将间接免疫荧光技术应用到该实验的教学中。在实验过程中,利用小鼠抗人钙网蛋白的单克隆抗体和FITC标记的... 详细信息

内质网的观察实验一直是"细胞生物学实验"的经典教学内容,该实验的教学主要采用活体染色的方式来开展。为了提高实验教学的效果,将间接免疫荧光技术应用到该实验的教学中。在实验过程中,利用小鼠抗人钙网蛋白的单克隆抗体和FITC标记的山羊抗小鼠的荧光二抗对广泛存在于内质网上的钙网蛋白进行标记,通过荧光显微镜观察Hela细胞中内质网的基本形态和分布情况。将间接免疫荧光技术应用于内质网观察实验的教学中,可以让学生掌握科研中常用的内质网标记技术,提高他们对科研工作的兴趣,有助于培养他们的创新思维和科研综合素质。

关键词：间接免疫荧光内质网实验教学

间接免疫荧光和酶联免疫吸附试验对嗜肺军团菌的检测效果分析

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现代预防医学 2016年第11期43卷 2041-2043页

作者：刘晓丽张秀芝蔡军孙长义河南省人民医院检验科河南医学高等专科学校

目的评估西班牙VIRCELL公司生产的间接免疫荧光法（indirect immunofluorescence,IIF）和德国欧蒙医学诊断有限公司（EUROIMMUN）的酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）试剂盒对嗜肺军团菌（legionellapneumophila,LP）抗体Ig M检测的等效性。方法采用同步盲对比试验,对360份有呼吸道感染症状患者的血液样本分别用IIF和ELISA进行LP-Ig M检测。结果（1）IIF与ELISA检测的阳性符合率95.71%[95%置信区间（confidence interval,CI）:88.14%;8.53%],阴性符合率98.56%（95%CI:96.35%;9.44%）,总符合率95.28%（95%CI:92.57%;7.03%）。一致性分析Kappa=0.869,检测结果具有高度一致性。（2）46例交叉干扰样本:腺病毒、流感病毒、呼吸道合胞病毒、Q热立克次体、支原体等阳性样本对两种方法检测LP-IgM结果无影响。（3）33例干扰物质样本:类风湿因子阳性样本、高胆红素样本、高脂样本和溶血样本对两种试剂检测LP-Ig M结果无影响。（4）IIF和ELISA联合应用时,并联试验可以使可疑结果的数量大大减少（IIF:10例;ELISA:13例;并联试验:3例）,检测结果更加明确。结论 VIRCELL公司的IIF和EUROIMMUN的ELISA对LP-Ig M的检测有明显的等效性,由于IIF的高通量性（同时检测9种病原体）,在需要同时检测多种病原体时具有明显优势,ELISA法在需要单独检测嗜肺军团菌时针对性更强,二者联合则可使检测结果更加明确。

关键词：嗜肺军团菌抗体间接免疫荧光酶联免疫吸附试验一致性分析并联试验

间接免疫荧光和免疫印迹诊断天疱疮的比较研究

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International Journal of Dermatology And Venereology 1995年第5期 304-305页

作者：林麟

为了在常规诊断为寻常型天疱疮(PV)、落叶型天疱疮(PF)的患者中,比较间接免疫荧光(IIF)和免疫印迹(IB)两种方法,作者回顾性地研究了54例天疱疮,其中PV 40例、PF 14例。年龄40～70岁。

关键词：天疱疮 IIF IB 亚型大疱性皮肤病间接免疫荧光免疫印迹蛋白质印迹免疫诊断