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浙江中医药大学学报 2019年第10期43卷 1124-1129页

作者：殷玉杰闫昭芫赖尚磊朱翔鸿窦晓兵李松涛浙江中医药大学生命科学学院杭州310053 浙江中医药大学滨江学院浙江中医药大学基础医学院、公共卫生学院

[目的]揭示自噬对长链饱和游离脂肪酸(long-chain saturated free fatty acids,L-SFAs)诱导的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)血管内皮细胞黏附分子-1(vascular cell adhesion molecule-1,VCAM-1)表达的影响及其作用机制。[方法]采用软脂酸(palmitic acid,PA)和硬脂酸(stearic acid,SA)对HUVECs进行处理,检测激活或抑制自噬对L-SFAs诱导下细胞内VCAM-1的mRNA及蛋白表达的影响。采用丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases,MAPKs)通路抑制剂筛选参与自噬调控VCAM-1的分子信号通路,对关键靶点的蛋白表达水平进行检测。[结果] L-SFAs可显著上调HUVECs中VCAM-1的m RNA及蛋白表达水平(P酸化水平的变化(P酸化增加,从而抑制血管内皮细胞VCAM-1的表达,自噬调控有望成为改善血管内皮功能的有效策略。

关键词：自噬长链饱和游离脂肪酸血管内皮细胞血管内皮细胞黏附分子-1 p38

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RI/R条件下A1型星形胶质细胞通过分泌饱和脂质诱导RGCs凋亡

RI/R条件下A1型星形胶质细胞通过分泌饱和脂质诱导RGCs凋亡

引用

作者：史文佳中南大学

学位级别：硕士

目的:探究视网膜缺血/再灌注(retinal ischemia/reperfussion,RI/R)损伤条件下星形胶质细胞的A1型极化诱导视网膜神经元凋亡的机制。方法:1)动物实验采用急性高眼压(acute intraocular hypertension,AIH)大鼠模型,细胞实验采用肿瘤坏死... 详细信息

目的:探究视网膜缺血/再灌注(retinal ischemia/reperfussion,RI/R)损伤条件下星形胶质细胞的A1型极化诱导视网膜神经元凋亡的机制。方法:1)动物实验采用急性高眼压(acute intraocular hypertension,AIH)大鼠模型,细胞实验采用肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)、白介素1α(Interleukin-1α,IL-1α)和补体1q(Component1q,C1q)诱导星形胶质细胞A1型极化,并结合R28细胞氧糖剥夺/恢复(oxygen and glucose deprivation/recovery,OGD/R)模型。2)采用免疫荧光实验从形态学角度评估GFAP、C3、S100A10、ELOVL1的蛋白表达情况;采用TUNEL染色、PI染色评估细胞凋亡情况。3)采用蛋白质印记法(western blot,WB)检测GFAP、C3、S100A10、ELOVL1、p-PERK、p-e IF2α、ATF4、CHOP、Bax和Bcl-2的蛋白表达量。4)采用荧光定量聚合酶链式反应(QRT-PCR)从转录水平检测TNF-α、IL-1β、i NOS、BDNF和ELOVL1-ELOVL7的表达情况。5)采用脂质组学测序的方法检测星形胶质细胞培养基内长链饱和游离脂肪酸(free fatty acids,FFAs)的相对含量。结果:1)RI/R损伤后12h时,视网膜星形胶质细胞向A1表型极化达到峰值;RI/R损伤后3d时,视网膜星形胶质细胞向A2表型极化达到峰值。2)与正常组相比,A1型星形胶质细胞内ELOVL1基因表达增加,释放大量长链饱和FFAs,通过si RNA抑制ELOVL1的表达从而抑制饱和脂质的产生可显著改善神经元凋亡。3)A1型星形胶质细胞条件培养基可能通过激活PERK/e IF2α/ATF4/CHOP通路诱导神经元凋亡。结论:在RI/R损伤前期,视网膜星形胶质细胞向A1表型极化,分泌大量长链饱和FFAs,可能通过PERK/e IF2α/ATF4/CHOP通路介导内质网(endoplasmic reticulum,ER)应激引起视网膜神经元凋亡。图9幅,表10个,参考文献217篇

关键词：视网膜缺血/再灌注氧糖剥夺/恢复 A1型星形胶质细胞长链饱和游离脂肪酸 ELOVL1 内质网应激

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