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长柱金丝桃ISSR-PCR反应体系的建立与优化

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东北林业大学学报 2017年第10期45卷 13-16页

作者：王丽俊王霞吉林农业科技学院吉林省吉林市132101

为筛选可用于长柱金丝桃遗传分析的最适ISSR-PCR反应体系,采用正交试验对影响ISSR-PCR反应的5个重要因素(Taq DNA聚合酶、dNTPs、Mg^(2+)、引物和模板DNA浓度)进行4水平正交优化,并对退火温度、循环次数进行筛选。结果表明,20μL ISSR-... 详细信息

为筛选可用于长柱金丝桃遗传分析的最适ISSR-PCR反应体系,采用正交试验对影响ISSR-PCR反应的5个重要因素(Taq DNA聚合酶、dNTPs、Mg^(2+)、引物和模板DNA浓度)进行4水平正交优化,并对退火温度、循环次数进行筛选。结果表明,20μL ISSR-PCR最佳反应体系包括Taq DNA聚合酶1.0 U、dNTPs 0.2 mmol·L-1、Mg2+3.0 mmol·L^(-1)、引物0.4μmol·L^(-1)、DNA模板40 ng,对ISSR-PCR反应的影响程度由大到小为:Taq DNA聚合酶、引物、Mg2+、dNTPs、DNA模板;引物UBC822的最佳退火温度52.7℃,最佳循环次数41,利用优化的反应体系从61条引物中筛选出12条稳定性好、多态性高的引物,验证试验表明优化的反应体系具有较高的稳定性。

关键词：长柱金丝桃 ISSR反应体系正交试验引物筛选

长白山金丝桃属植物生态分化中的光合特性分析

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东北师大学报（自然科学版） 2023年第2期55卷 109-115页

作者：夏昀瑞李舒宁赵哲宋锐张南翼吉林农业大学林学与草学学院吉林长春130118

对长白山地区两种金丝桃属植物长柱金丝桃(Hypericum ascyron L.)与乌腺金丝桃(Hypericum attenuatum Choisy)的净光合速率、蒸腾速率与水分利用率等光合特性,光合色素含量以及其生境土壤中的水分含量之间的差异进行了比较研究.结果表明... 详细信息

对长白山地区两种金丝桃属植物长柱金丝桃(Hypericum ascyron L.)与乌腺金丝桃(Hypericum attenuatum Choisy)的净光合速率、蒸腾速率与水分利用率等光合特性,光合色素含量以及其生境土壤中的水分含量之间的差异进行了比较研究.结果表明:长柱金丝桃的净光合速率在两个生长季均明显高于乌腺金丝桃,且差异极显著(P长柱金丝桃的水分利用率显著高于乌腺金丝桃(P长柱金丝桃中的叶绿素a、叶绿素b及总叶绿素的含量显著高于乌腺金丝桃(P长柱金丝桃的光合性能强于乌腺金丝桃,净光合速率与光合色素含量是导致两种植物生态分化的主要外部因素.

关键词：长柱金丝桃乌腺金丝桃光合特性生态分化分析

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长柱金丝桃中金丝桃素的含量变化

中国药学杂志 2011年第3期46卷 174-176页

作者：张克勤薛晓丽孔令瑶赵桂英李玉杰依守红廖晓丹吉林大学畜牧兽医学院长春132000 吉林农业科技学院动物科学学院吉林吉林132101 吉林省通榆县制药厂吉林通榆137200

目的确定长柱金丝桃中是否含有金丝桃素及金丝桃素含量的变化规律。方法使用体积分数80%的乙醇进行提取,利用高效液相色谱仪进行金丝桃素的检测。结果长柱金丝桃中含有金丝桃素;金丝桃素的含量随季节变化,茎、叶5月份较高,以后下降,8月... 详细信息

目的确定长柱金丝桃中是否含有金丝桃素及金丝桃素含量的变化规律。方法使用体积分数80%的乙醇进行提取,利用高效液相色谱仪进行金丝桃素的检测。结果长柱金丝桃中含有金丝桃素;金丝桃素的含量随季节变化,茎、叶5月份较高,以后下降,8月最低;花的变化与季节变化关系不大;同一时期不同器官含量不同,其中花中含量最高,叶中含量居中,茎中含量最低。结论长柱金丝桃中含有金丝桃素,金丝桃素含量随着季节和器官的不同而变化。

关键词：长柱金丝桃金丝桃素含量

长白山两种金丝桃属植物光合特性及MADS-box差异研究

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长白山两种金丝桃属植物光合特性及MADS-box差异研究

作者：夏昀瑞吉林农业大学

学位级别：硕士

长白山山脉位于中朝边界,是典型的温带大陆性山地气候。由于其独特的地理条件,在第四纪冰期使其成为了欧亚大陆珍稀物种,甚至是一些濒危动植物的自然栖息地和重要的避难所。金丝桃属植物是一类具有很高药用价值的植物,被国内外研究人员... 详细信息

长白山山脉位于中朝边界,是典型的温带大陆性山地气候。由于其独特的地理条件,在第四纪冰期使其成为了欧亚大陆珍稀物种,甚至是一些濒危动植物的自然栖息地和重要的避难所。金丝桃属植物是一类具有很高药用价值的植物,被国内外研究人员争相报道,但是对于其近缘植物间的差异研究鲜有报道。长白山地区常见的金丝桃属植物有两种,分别是长柱金丝桃(Hypericum ascyron L.)与乌腺金丝桃(Hypericum attenuatum Choisy)。因此,本研究对长白山地区金丝桃属植物光合作用、比较转录组及MADS-box基因间的差异进行研究,从宏观与微观两个方面分别对金丝桃属植物进行分析。其研究结果表明:1.长柱金丝桃与乌腺金丝桃的光合色素、利用光照及水分的能力存在差异,其中净光合速率与水分利用效率呈显著正相关。光合有效辐射与蒸发速率呈显著正相关,与水分利用效率呈显著负相关。而主成分分析的结果,可以看出光合色素与净光合速率的显著不同是导致金丝桃属植物长柱金丝桃与乌腺金丝桃形态特征与物种分布差异的主要原因。因此,可初步认为植物自身光合色素的含量以及其自身的净光合速率是导致长柱金丝桃和乌腺金丝桃光合特性差异的主要因素。2.本研究共检测出9287条DEGs,其中6044条基因在两物种中均有表达。GO富集分析中发现,这些差异表达基因主要被富集到47个GO term中。KEGG富集分析发现,表达差异显著的基因主要被富集到维生素C代谢途径、植物激素信号转导、神经营养素信号通路和苯丙烷类化合物代谢途径中。这些通路中的差异基因分别在光合系统、植物激素转运、外界环境感知与传导和次生代谢物的合成方面产生差异,从而导致两个物种的分离与分化。同时预测了长白山地区的这两种植物在距今约40.48 Ma产生了分化。3.本研究从两物种的DEGs中共筛选出4对具有差异表达的、与开花相关的MADS-box基因,并发现在两物种间,同一基因家族的不同分支基因也具有较高的保守性。同时发现该类基因编码蛋白受达尔文选择进化的影响,并且已适应其生长环境。通过分歧时间分析发现,两物种间的II型MADS-box基因的分离分化可能与环境变化及其自身发生的基因组复制事件有关。

关键词：长柱金丝桃乌腺金丝桃净光合速率比较转录组 MADS-box基因

长柱金丝桃提取物对四氯化碳和酒精诱导小鼠肝损伤的保护作用研究

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黑龙江畜牧兽医 2015年第1期 151-153页

作者：刁磊陈惠杰吉林农业科技学院制药工程学院吉林吉林132101

为了研究长柱金丝桃提取物对四氯化碳(CCl4)和酒精诱导小鼠肝损伤的保护作用,试验采用白酒灌胃的方式建立小鼠急性酒精性肝损伤模型,腹腔注射CCl4建立小鼠急性肝损伤模型,检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活... 详细信息

为了研究长柱金丝桃提取物对四氯化碳(CCl4)和酒精诱导小鼠肝损伤的保护作用,试验采用白酒灌胃的方式建立小鼠急性酒精性肝损伤模型,腹腔注射CCl4建立小鼠急性肝损伤模型,检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性、肝脏指数。结果表明:长柱金丝桃乙酸乙酯部位组能极显著抑制CCl4肝损伤小鼠血清ALT、AST活性的升高(P长柱金丝桃正丁醇部位组能显著抑制CCl4肝损伤小鼠血清ALT、AST活性的升高(P长柱金丝桃乙酸乙酯部位组能抑制酒精性肝损伤小鼠血清ALT、AST活性的升高(P长柱金丝桃提取物对CCl4和酒精引起的小鼠急性肝损伤具有保护作用。

关键词：长柱金丝桃酒精四氯化碳(CCl4) 肝损伤肝脏指数保护作用

长柱金丝桃提取物及其化学成分的抗菌活性研究

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长柱金丝桃提取物及其化学成分的抗菌活性研究

作者：王梦晓延边大学

学位级别：硕士

长柱金丝桃（Hypericum longistylum Oliv.）别名红旱莲、湖南连翘,为藤黄科金丝桃属多年生草本植物。全草入药,味微苦,性寒,无毒。有凉血止血,清热解毒的功效。可治疗月经不调、痛经、乳汁不下、风热感冒、疟疾、痢疾、腹泻、毒蛇咬伤... 详细信息

长柱金丝桃（Hypericum longistylum Oliv.）别名红旱莲、湖南连翘,为藤黄科金丝桃属多年生草本植物。全草入药,味微苦,性寒,无毒。有凉血止血,清热解毒的功效。可治疗月经不调、痛经、乳汁不下、风热感冒、疟疾、痢疾、腹泻、毒蛇咬伤,亦有平喘、祛痰、镇咳、抗菌等多种作用。本实验以长柱金丝桃为研究对象,以活性追踪的方式,对其抗菌活性成分进行提取和分离,对长柱金丝桃提取物的抗菌活性进行测试,研究并得到长柱金丝桃复方制剂的组成。本实验对长柱金丝桃全草进行甲醇冷浸法提取,对长柱金丝桃乙酸乙酯萃取物采用正相硅胶柱色谱、反相硅胶柱色谱、制备薄层色谱、高效液相色谱、羟丙基葡聚糖凝胶柱色谱等分离方法进行分离,同时以金黄色葡萄球菌和变形链球菌进行活性追踪,最终得到6个单体化合物,并采用1H-NMR、13C-NMR和TOP-MS等现代波谱技术和多种化学方法进行了鉴定,分别为p-谷甾醇（化合物Ⅰ）、（24S）豆甾-4-烯-3-酮（化合物Ⅱ）、金丝桃苷（化合物Ⅲ）、槲皮素（化合物Ⅳ）、月桂酸（化合物V）和山奈酚（化合物Ⅵ）。其中化合物Ⅱ和化合物V为首次从长柱金丝桃药材中获得。化合物Ⅳ和化合物Ⅵ对革兰氏阳性菌有一定的抗菌活性,对金黄色葡萄球菌的抗菌作用较为明显。化合物Ⅳ对大肠杆菌的MIC值为16μg/mL,接近作为阳性对照的抗生素药品硫酸链霉素,具有一定的参考价值。本实验研究长柱金丝桃、柚子、桂皮提取物及其复方制剂进行抗菌活性的测定。通过超临界萃取工艺对长柱金丝桃进行提取,对柚子、桂皮进行95%乙醇提取,并对提取物及其复方进行不同菌种的抗菌活性测试。结果发现,长柱金丝桃复方对革兰氏阳性菌的最低抑菌浓度在3.2～50μg/mL,对革兰氏阴性菌的最低抑菌浓度为1OOμg/mL,而对于真菌的抑菌浓度在50μg/mL。对于耐药菌的活性远远大于诺氟沙星。已有报道证明复方中的长柱金丝桃、柚子、桂皮的毒性与副作用都要比万古霉素、苯唑西林的低,但是抗菌活性又较好,从而证明长柱金丝桃复方具有良好的开发价值和市场前景。

关键词：长柱金丝桃化学成分分离抗菌活性最低抑菌浓度

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长柱金丝桃中金丝桃苷和槲皮素的含量测定

中国中医药现代远程教育 2020年第12期18卷 113-115页

作者：孙悦李洁高长久张朝立崔芷菡郭淳孟令锴牡丹江医学院药学院黑龙江牡丹江157011 牡丹江医学院附属红旗医院血液科黑龙江牡丹江157011

目的建立同时测定长柱金丝桃中金丝桃苷和槲皮素含量的高效液相色谱分析方法。方法采用高效液相色谱法,色谱柱为Zorbax SB-C18柱(5μm,250 mm×4.6 mm),流动相为甲醇∶乙腈∶0.01 mol/L磷酸(10∶30∶60),流速1.0 m L/min,检测波长357 nm... 详细信息

目的建立同时测定长柱金丝桃中金丝桃苷和槲皮素含量的高效液相色谱分析方法。方法采用高效液相色谱法,色谱柱为Zorbax SB-C18柱(5μm,250 mm×4.6 mm),流动相为甲醇∶乙腈∶0.01 mol/L磷酸(10∶30∶60),流速1.0 m L/min,检测波长357 nm,柱温35℃。结果金丝桃苷和槲皮素分别在10.12~50.6μg和8.2~41μg范围内,进样量与色谱峰面积呈良好线性关系,r值分别为0.999 2和0.999 1;平均回收率(n=6)分别为99.13%和100.8%,RSD分别为2.26%和2.35%。结论本实验方法法操作简便、准确、稳定性及重复性好,可用于同时对长柱金丝桃中金丝桃苷和槲皮素成分的含量测定。

关键词：长柱金丝桃金丝桃苷槲皮素高效液相色谱法实验研究中药化学

长柱金丝桃对大鼠佐剂性关节炎治疗作用活性部位筛选研究

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中国中医药现代远程教育 2020年第13期18卷 127-129页

作者：孟令锴李洁张朝立高长久吴兆华牡丹江医学院药学院黑龙江牡丹江157011 牡丹江医学院附属红旗医院血液科黑龙江牡丹江157011

目的通过佐剂性关节炎大鼠模型,筛选出长柱金丝桃抗类风湿性关节炎的活性部位。方法制备长柱金丝桃石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、水部位提取物,参照经典急性毒性实验方法确定长柱金丝桃不同提取部位的急性毒性;将佐剂性关节炎模型大鼠,随... 详细信息

目的通过佐剂性关节炎大鼠模型,筛选出长柱金丝桃抗类风湿性关节炎的活性部位。方法制备长柱金丝桃石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、水部位提取物,参照经典急性毒性实验方法确定长柱金丝桃不同提取部位的急性毒性;将佐剂性关节炎模型大鼠,随机分成7组:正常对照组、模型对照组、阳性对照组(雷公藤多苷)、石油醚部位组、乙酸乙酯部位组、正丁醇部位组、水部位部位组,每组8只。分组给药24 d,观察测定足肿胀度、关节炎评分指数、免疫器官(胸腺、脾脏)指数的变化。结果长柱金丝桃乙酸乙酯部位、正丁醇部位半数致死量(LD50)分别为22.13 g·kg^-1、31.37 g·kg^-1;水部位、石油醚部位最大给药量(MLD)分别为58.66 g·kg^-1、60.12 g·kg^-1;与模型组相比,乙酸乙酯部位给药组大鼠足肿胀度及关节肿胀指数显著降低(P长柱金丝桃对大鼠佐剂性关节炎治疗作用活性部位为乙酸乙酯提取部位。

关键词：长柱金丝桃佐剂性关节炎活性部位动物实验痹证

长柱金丝桃(Hypericum ascyron L.)分泌结构的研究

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东北农业大学学报 2010年第10期41卷 43-47页

作者：徐庆华李淑玲胡国富胡宝忠东北农业大学成栋学院哈尔滨150030 东北农业大学生命科学学院哈尔滨150030

对长柱金丝桃各类器官进行了整体透明和解剖学研究,确定合理的采收部位和采摘时间。结果表明,植株富含分泌囊和分泌小管道两种分泌结构;叶片中分泌囊(道)的发育属于裂生型;地上部分泌结构分布较多,尤以叶片中数量最多、分布密度最大;确... 详细信息

对长柱金丝桃各类器官进行了整体透明和解剖学研究,确定合理的采收部位和采摘时间。结果表明,植株富含分泌囊和分泌小管道两种分泌结构;叶片中分泌囊(道)的发育属于裂生型;地上部分泌结构分布较多,尤以叶片中数量最多、分布密度最大;确定植物的最佳采收时期是每年8～9月的花果期、最佳采收部位是地上部。此研究结果为此药用植物合理的采收部位和采收时间的确定提供解剖学依据,同时为其他植物分泌囊(道)发育规律的研究提供理论依据。

关键词：长柱金丝桃分泌结构分泌囊发育分泌小管道发育