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重庆医科大学学报 2014年第2期39卷 155-160页

作者：熊佳佳蒋莉陈恒胜胡越重庆医科大学附属儿童医院神经内科、儿童发育疾病研究教育部重点实验室、儿科学重庆市重点实验室、重庆市儿童发育重大疾病诊治与预防国际科技合作基地重庆400014

目的:研究幼年期大鼠长时程惊厥(status convulsion,SC)后海马电生理学与海马脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)表达变化,探索两者之间的可能关系。方法:选择生后21 d Wistar鼠160只,随机分为对照组和实验组... 详细信息

目的:研究幼年期大鼠长时程惊厥(status convulsion,SC)后海马电生理学与海马脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)表达变化,探索两者之间的可能关系。方法:选择生后21 d Wistar鼠160只,随机分为对照组和实验组,每组80只。腹腔注射氯化锂-匹罗卡品制造SC模型;以腹腔注射生理盐水为对照组。造模后1、7、14、21 d膜片钳技术检测海马场兴奋性突触后电位(field excitatory postsynaptic potentials,fEPSP)斜率与波幅的变化,比较长时程增强(long-term potentiation,LTP)现象。造模后12 h、1 d、3、7、14、21 d免疫组织化学观察海马区BDNF表达的定位情况,Western blot方法鉴定其表达情况。结果:(1)SC后7 d,实验组fEPSP斜率为(162.30±28.50)%高于对照组(124.01±26.46)%(P程度的增强,实验组在SC后12 h、1 d、3、7 d较正常组有增多趋势,14 d及21 d组无明显差别。(3)Western blot测定BDNF表达情况,SC后12 h、1 d、3、7 d分别为:1.08±0.10、1.39±0.08、0.85±0.04、0.53±0.06,对照组分别为:0.39±0.16、0.37±0.03、0.39±0.02、0.37±0.04,实验组与对照组比较有统计学差异(P程中可能起重要作用。

关键词：幼年大鼠长时程惊厥长时程增强脑源性神经营养因子

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持续惊厥后幼年大鼠海马突触可塑性及BDNF表达变化的研究

持续惊厥后幼年大鼠海马突触可塑性及BDNF表达变化的研究

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作者：熊佳佳重庆医科大学

学位级别：硕士

目的:研究幼年期大鼠长时程惊厥（status convulsion,SC）后海马突触可塑性：突触超微结构和长时程增强（long-term potentiation,LTP）变化，检测海马脑源性神经营养因子（brain-derived neurotrophicfactor,BDNF）表达变化，探讨BDNF... 详细信息

目的:研究幼年期大鼠长时程惊厥（status convulsion,SC）后海马突触可塑性：突触超微结构和长时程增强（long-term potentiation,LTP）变化，检测海马脑源性神经营养因子（brain-derived neurotrophicfactor,BDNF）表达变化，探讨BDNF与突触可塑性之间的可能关系。方法:选择无特定病原体级(specific pathogen,SPF)生后21d雄性Wistar鼠，随机分为对照组和实验组，每组80只。腹腔注射氯化锂-匹罗卡品制造SC模型;以腹腔注射生理盐水为对照组。电镜观察造模后1、7、14、21d这4个时间点的突触超微结构变化，比较突触间隙、突触后致密物（postsynaptic density,PSD）厚度、突触活性区（synaptic active zone,SAZ）长度;膜片钳技术检测这4个时间点的大鼠海马场兴奋性突触后电位（field excitatory postsynapticpotentials,fEPSP）斜率与波幅的变化，比较LTP的变化。造模后12h、1d、3、7、14、21d免疫组织化学方法观察海马区BDNF表达的定位情况，western blot方法鉴定其表达情况。结果：（1）电镜观察海马突触超微结构变化：SC后4个时间点，实验组与对照组突触间隙无明显变化(P＞0.05);SC后7、14d，实验组PSD平均厚度比对照组薄、SAZ平均长度比对照组短（P＜0.05）。（2）SC后7d，实验组fEPSP斜率为162.30%±28.50%，显著高于对照组的124.01%±26.46%，差异有统计学意义（P＜0.05）;SC后14d实验组和对照组fEPSP斜率分别为83.06%±8.32%和121.64%±23.12%，波幅分别为100.54%±16.03%和135.65%±35.85%，实验组较对照组斜率及波幅明显降低,有统计学差异（P＜0.05）。（3）免疫组织化学检查BDNF表达，苏木素染核发现SC后12h、1d、3、7d CA1区和CA3区锥体细胞皱缩，排列紊乱无序。SC后大鼠海马CA1，CA3区BDNF阳性着色均有不同程度的增强，实验组在SC后12h，1d,3d,7d较正常组有增多趋势，14d及21d组无明显差别。（4）western blot测定BDNF表达情况，SC后12h、1d、3d、7d分别为：1.08±0.10、1.39±0.08、0.85±0.04、0.53±0.06，对照组分别为：0.39±0.16、0.37±0.03、0.39±0.02、0.37±0.04，实验组BDNF表达比对照组显著增高（P＜0.05）。结论：（1）SC后潜伏期，突触超微结构发生变化：实验组PSD厚度及SAZ长度均较对照组小，可能影响突触传递信息功能。（2）幼年大鼠SC后fEPSP斜率在SC后7d较正常组增高;在SC后14dfEPSP斜率及波幅较正常组和其它实验组明显降低。提示SC后潜伏期早期阶段LTP增高，突触传递效能增强;潜伏期后期LTP降低，突触传递效能减弱。（3）经免疫组化和western blot方法检测，提示BDNF表达受SC刺激影响，在SC后7d内呈先增高后降低至正常的动态变化趋势。（4） BDNF与突触可塑性关系密切。

关键词：幼年大鼠长时程惊厥长时程增强突触可塑性脑源性神经营养因子

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