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预防日本血吸虫感染长效药物的研究

预防日本血吸虫感染长效药物的研究

作者：金一江苏省血吸虫病防治研究所

学位级别：硕士

血吸虫病是一种严重危害人体健康的人畜共患寄生虫病。目前在世界范围内，约有74个国家和地区的6亿人受到血吸虫感染的威胁，有近2亿人感染血吸虫。寄生人体的血吸虫主要有6种，在中国流行的是日本血吸虫。血吸虫感染具有“伴随免疫”... 详细信息

血吸虫病是一种严重危害人体健康的人畜共患寄生虫病。目前在世界范围内，约有74个国家和地区的6亿人受到血吸虫感染的威胁，有近2亿人感染血吸虫。寄生人体的血吸虫主要有6种，在中国流行的是日本血吸虫。血吸虫感染具有“伴随免疫”的特点，患者在其体内的血吸虫虫体被清除后不久即丧失对血吸虫感染的免疫力，当再次接触疫水可发生再次感染。日本血吸虫具有大量的保虫宿主，在自然界能形成血吸虫病流行的“自然疫源地”。疫区人群因生产与生活的需要，必须反复接触疫水，因而非常容易发生再感染。血吸虫虫卵沉积于肝组织，引起的持续性炎症反应导致虫卵肉芽肿、肝组织纤维化、肝功能障碍、劳动力丧失，甚至死亡是血吸虫感染对人体健康的主要危害。如果能采取预防性手段，使血吸虫幼虫在进入宿主体内后立即被杀灭或不能发育成熟为成虫并产卵，则可有效降低血吸虫感染对人体健康的损害。目前，由于血吸虫复杂的免疫逃避机制，使预防血吸虫感染疫苗的研宄存在严重障碍，现阶段控制血吸虫病流行仍主要依赖于化学药物治疗。最常用的血吸虫病治疗药物为吡喹酮，但因其对血吸虫童虫的杀灭效果不佳，不能用于预防血吸虫感染。上世纪八十年代早期，青蒿素及其衍生物的抗血吸虫活性被中国科学工作者发现。与吡喹酮不同的是，此类药物主要杀灭童虫期的血吸虫，因此这类药物主要用于预防血吸虫感染与早期治疗。有文献报道，在青蒿素衍生物中，若使用的剂量相同，青蒿琥酯(ArteSunate,AS)杀灭童虫的效果要明显优于蒿甲醚等其他衍生物。但青蒿琥酯亦存在半衰期较短，短时间内需反复用药，治疗成本高，病人的依从性低的缺点。若能延长青蒿琥酯在宿主体内的半衰期，则可以使其在宿主体内维持有效药物浓度的时间延长，不仅可以提高药物的治疗效果，亦可以更有效地预防血吸虫感染。在当前没有有效的预防血吸虫感染疫苗的情况下，给疫区人群及家畜使用长效的青蒿琥酯类药物，应该是达到预防血吸虫感染目标的理想策略之一。青蒿琥酯作为一种小分子化学药物，其本身及各种代谢产物极易在体内被肾小球滤过而被排出，从理论上讲，可以通过增加药物的流体动力学体积(比如将青蒿琥酯与某种大分子蛋白质偶联)来延长其半衰期，从而延长青蒿琥酯在体内维持有效药物浓度的时间，达到预防血吸虫感染的目的。本研宄采用化学偶联方法将青蒿琥酯与一种低免疫原性的人工蛋白一GST-XTEN’融合蛋白偶联，形成AS-GST-XTEN’偶联物，试图延长青蒿琥酯在宿主体内的半衰期，制备一种适合用于预防多种不同保虫宿主血吸虫感染的长效药物，以达到预防血吸虫感染、控制血吸虫病流行的目的。研宄内容主要包括以下几个方面：一、GST-XTEN’融合蛋白的表达与纯化根据Volker Schellenberger的设计策略，设计合成了全长为1368bp,分子量为41.858kDa的XTEN’蛋白基因，并委托上海捷瑞生物工程有限公司合成了编码XTEN’蛋白的基因片段。将编码XTEN’蛋白的基因片段通过限制性内切細細m和&/1位点亚克隆到表达载体pET41a中，构建成功重组表达质粒XTEN’-pET41a。将含重组表达质粒XTEN’-pET41a的转化子细菌接种到LB培养基中培养，用IPTG进行蛋白质诱导表达。通过对表达条件的优化，在细菌静止生长期用IPTG进行诱导，在37°C诱导4h，可表达出一分子量约120kDa的可溶性重组GST-XTEN’蛋白二聚体。采用Glutathione sepharose4B胶对重组蛋白进行亲和层析纯化，获得纯化的重组GST-XTEN’二聚体蛋白，纯度大于95%。二、GST-XTEN’蛋白与青蒿琥酯偶联物的制备及特性本研宄根据青蒿琥酯的化学结构特点，选择将青蒿琥酯长臂上的羧基与蛋白GST-XTEN’结构中的游离氨基用混合酸酐法进行偶联，制备了AS-GST-XTEN’偶联物。采用全波长分光光度计扫描法分别测定AS、GST-XTEN’和AS-GST-XTEN’偶联物的特征性吸收峰，结果发现AS-GST-XTEN’偶联物有自己特征性的紫外吸收峰，最大吸收波长为270nm，不同于AS (紫外最大吸收波长为260nm)和GST-XTEN’蛋白(最大吸收波长为280nm)，提示AS-GST-XTEN’偶联物制备成功。偶联率为1:506，平均每分子GST-XTEN’载体蛋白上结合了506个AS分子。将日本血吸虫童虫转移到预先加好培养液的24孔细胞培养板中，在含5%CO的37°C培养箱中培养。在实验孔中分别加入不同浓度的AS、AS-GST-XTEN’偶联物，分别于20min、4h、24h、48h后在倒置显微镜下观察虫体的死亡情况,同时设置RPMI1640对照组及5%NaHC03对照组。结果显示，AS杀虫用量小，速度快，而AS-GST-XTEN’同样具有杀虫效果，但是用药剂量大，杀虫速度慢。设置不同浓度梯度的AS

关键词：日本血吸虫青蒿琥酯长效药物 AS-GST-XTEN’偶联物免疫原性半衰期预防

神经性皮炎的长效药物治疗——奎宁——普鲁卡因溶液局部封闭法

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骨科 1964年第4期 257-260页

作者：于光元张禄刘侃武汉医学院附属第一医院皮肤性病学教研组上海市静安区中心医院河南信阳专区人民医院

神经性皮炎是一种常见的,易于复发的慢性皮肤病。据秦氏(1957)的统计,它占初诊病例总数的2.7%。天津医科大学统计报告,占4.8%。好发于颈后、颈两侧、眼睑、耳前、前额、阴囊、会阴及女阴等处。目前因对其病因学尚无一致的认识,所以在治... 详细信息

神经性皮炎是一种常见的,易于复发的慢性皮肤病。据秦氏(1957)的统计,它占初诊病例总数的2.7%。天津医科大学统计报告,占4.8%。好发于颈后、颈两侧、眼睑、耳前、前额、阴囊、会阴及女阴等处。目前因对其病因学尚无一致的认识,所以在治疗方法上也是多种多样的。过去较普遍使

关键词：普鲁卡因溶液神经性皮炎慢性单纯性苔藓神经性皮肤病局部封闭封闭疗法长效药物

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每三个月注射长效药物可防艾滋病

基础医学与临床 2015年第9期35卷 1161-1161页

据英国（（BBC新闻》（BBCNEWS）（2014—3—13）报道，美国两组研究团队的最新结果揭示，通过每三个月注射长效抗艾滋病药物，可以保护猴子完全不被一种类艾滋病病毒的感染。如果这一结果能在人类身上重现，可能将带来防范艾滋病的重... 详细信息

据英国（（BBC新闻》（BBCNEWS）（2014—3—13）报道，美国两组研究团队的最新结果揭示，通过每三个月注射长效抗艾滋病药物，可以保护猴子完全不被一种类艾滋病病毒的感染。如果这一结果能在人类身上重现，可能将带来防范艾滋病的重大突破。

关键词：抗艾滋病药物长效药物注射艾滋病病毒研究团队

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长效药物漏服不宜加倍补服

医药食疗保健 2013年第8期 4-4页

多数长效药物，如降糖药、治疗帕金森氏病的药物、抗精神病药物、糖皮质激素以及降压药（患者的血压一直比较稳定）等，如果是每日服用一次的，次日才发现前一天漏服的，可不必补服。大多数长效药只能少服一次，不宜加倍补服。

关键词：长效药物补服漏服抗精神病药物帕金森氏病糖皮质激素每日服用降糖药

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院外精神分裂症长效药物维持治疗的对照研究

国外医学参考资料.精神病学分册 1976年第2期 99-99页

作者：刘恒文

作者进行了长效药物氟奋乃静癸酸盐双盲对照研究,以确定对已确诊的慢性精神分裂症患者门诊维持治疗的价值.本研究挑选了两组院外慢性精神分裂症患者,使用长效氟奋乃静癸酸酯至少已经8周,但未使用其他安定剂.将病人分为治疗组和安慰剂组... 详细信息

作者进行了长效药物氟奋乃静癸酸盐双盲对照研究,以确定对已确诊的慢性精神分裂症患者门诊维持治疗的价值.本研究挑选了两组院外慢性精神分裂症患者,使用长效氟奋乃静癸酸酯至少已经8周,但未使用其他安定剂.将病人分为治疗组和安慰剂组,治疗组每月规定注射长效氟奋乃静癸酸盐25mg或每两周12.5mg,在此期间病情如果十分恶化则改用其他治疗或住院(住院期可不停止用此药治疗)或接受抗震颤麻痹治疗、抗忧郁治疗.进入观察时1/3的患者

关键词：维持治疗癸酸饱和脂肪酸早发性痴呆精神分裂症氟吩嗪氟奋乃静长效药物院外

快速缓解疗法与长效药物控制法在小儿哮喘治疗中的应用

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世界核心医学期刊文摘（儿科学分册） 2005年第7期1卷 29-29页

作者： Walders N. Kopel S.J. Koinis-Mitchell D. McQuaid E.L. 冉海红 Psychosocial Medicine A103 Natl.Jewish Med.and Res.Center 1400 Jackson Street Denver CO 80206 United States Dr.

Objectives: To simultaneously examine adherence to long-term controller and quick-relief medications and to contrast patterns of medication use in children with *** design: Cross-sectional, 1-month follow-up study conducted with 75 children ages 8 to 16 years diagnosedwith persistent asthma and prescribed quick-relief and long-term controller medications by metered dose *** were a subsample of a larger adherence *** primary outcome measure was adherence to both medications as measured by electronic monitoring devices.A classification framework for contrasting adherence patterns between medication classes was developed to identify cases for individual ***: High levels of nonadherence to long-term controller medications (median = 46%of prescribed doses taken) and variable patterns of quick-relief medication use (range = 0 to 251 doses over the month) were documented,whereas consistent relationships between patterns of medication use across both classes were not *** cases identified by the classification scheme illustrated the complexity and clinical utility of contrasting adherence ***: Monitoring long-term controller medication adherence may be more predictive of morbidity than quick-relief medication use, except in outlier cases in which monitoring both medication types may be valuable for clinical and empirical purposes.

关键词：小儿哮喘长效药物持续性哮喘个别病例控制法药物依赖给药模式电子检测仪交叉研究受试对象

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成人生长激素缺乏症长效药物获批

家庭用药 2020年第10期 5-5页

美国食品和药物管理局(FDA)于2020年8月28日批准了每周使用一次的长效生长激素衍生物Sogroya(somapacitan-beco),用于成人治疗生长激素缺乏症(GHD)。在治疗成人GHD方面,Sogroya是第一种每周只需皮下注射一次的人生长激素(hGH),而其他经... 详细信息

美国食品和药物管理局(FDA)于2020年8月28日批准了每周使用一次的长效生长激素衍生物Sogroya(somapacitan-beco),用于成人治疗生长激素缺乏症(GHD)。在治疗成人GHD方面,Sogroya是第一种每周只需皮下注射一次的人生长激素(hGH),而其他经FDA批准的hGH制剂必须每天注射。每周一次的长效疗法将意味着一个重大进步,可通过提高治疗依从性来获得更好的治疗结果。

关键词：生长激素缺乏症长效药物治疗依从性人生长激素 GHD 皮下注射