检索结果-南通市图书馆

作者：菊林花内蒙古农业大学

学位级别：硕士

本实验对日本北海道和种马、对洲马、宫古马、英国纯血马、阿拉伯马、布雷顿马、克里奥尔马、佩尔什马共9个品种马外周血单核细胞MxA蛋白cDNA进行了分析。从马外周血中提取RNA后，采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,获得MxA cDNA,... 详细信息

本实验对日本北海道和种马、对洲马、宫古马、英国纯血马、阿拉伯马、布雷顿马、克里奥尔马、佩尔什马共9个品种马外周血单核细胞MxA蛋白cDNA进行了分析。从马外周血中提取RNA后，采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,获得MxA cDNA,克隆到pGEM?-T Easy载体上。通过分析重组子的DNA序列，对其核苷酸序列的多态性进行分析。结果发现，马MxA cDNA全序列（2122bp）中的3个位点碱基发生有义突变，即977位点由G→A、1234位点T→A和1790位点由G→C。据推测，此3个位点的碱基替换分别引起其编码的MxA 蛋白第298位点由精氨酸（Arg ）改变成赖氨酸(Lys) 、377氨基酸由缬氨酸(Val)改变成谷氨酸(Glu)、 562氨基酸由色氨酸(Trp)改变成半胱氨酸(Cys)，并且发现该3个突变位点中977位点由G→A和1234位点T→A 均出现于所测9个马MxA cDNA序列中，未发现品种差异，只有1790位点由G→C，说明只是不同个体间产生差异。因此采用错配引物扩增限制性片断长度多态性方法（mismatch primer restriction fragment length polymorphism），来检测MxA 基因12外显子3’端（cDNA第1790）位点的多态性，其结果表明该位点变异，是因个体不同而异，有G/G、C/C和C/G 型，多个个体为C/G型，而未发现品种特征。

关键词： MxA基因马多态性错配引物限制性片段长度

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基于SNP位点快速鉴定药用、斑点野生稻的dCAPS标记体系的建立

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分子植物育种 2011年第2期9卷 169-173页

作者：赵红敬许瑾高必达徐涛朱水芳湖南农业大学生物安全科学技术学院长沙410128 中国检验检疫科学院北京100029

为防止野生稻重要基因资源流失,便于口岸准确快速鉴定,探讨了基于SNP位点建立dCAPS分子标记体系。采用生物信息学软件寻找了药用野生稻和斑点野生稻上7个基因碱基序列上适合设计错配引物的SNP位点,设计合成适当的错配引物进行PCR扩增,... 详细信息

为防止野生稻重要基因资源流失,便于口岸准确快速鉴定,探讨了基于SNP位点建立dCAPS分子标记体系。采用生物信息学软件寻找了药用野生稻和斑点野生稻上7个基因碱基序列上适合设计错配引物的SNP位点,设计合成适当的错配引物进行PCR扩增,选择相应的限制性内切酶进行酶切。在这2种野生稻DNA的matk基因上分别找到1个合适的SNP位点,设计了3对错配引物,PCR后3种相应的限切酶都可以特异性地切开PCR产物,将药用野生稻或斑点野生稻与栽培稻和其它野生稻区分开来。本结果证明了dCAPS分子标记可以在口岸查验上应用。

关键词： SNP 错配引物水稻 dCAPS

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