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铝佐剂颗粒化乳液制备及其免疫效果研究

过程工程学报 2022年第2期22卷 195-203页

作者：彭沙夏宇飞高晓冬江南大学生物工程学院糖化学与生物技术教育部重点实验室江苏无锡214122 中国科学院过程工程研究所生化工程国家重点实验室北京100190

铝佐剂是我国唯一临床批准使用的疫苗佐剂,但其自身难以引发有效的细胞免疫应答,无法对机体产生综合性的保护,难以满足日益增长的疫苗佐剂需求。因此,如何合理化改造铝佐剂,保证疫苗佐剂的安全及高效诱导免疫反应是亟待解决的问题。本... 详细信息

铝佐剂是我国唯一临床批准使用的疫苗佐剂,但其自身难以引发有效的细胞免疫应答,无法对机体产生综合性的保护,难以满足日益增长的疫苗佐剂需求。因此,如何合理化改造铝佐剂,保证疫苗佐剂的安全及高效诱导免疫反应是亟待解决的问题。本工作通过对商品化铝佐剂制备乳液超声条件的优化,最终研究表明当颗粒浓度为2.0 mg/mL,水相缓冲液选择蒸馏水且pH为7.0时能制备得到稳定的颗粒化乳液(Alum Particulate Emulsion,APE),制备得到的乳液平均粒径为2723.7±435.3 nm,Zeta电位为+40.5±1.5 m V。离心发现此时体系中没有游离的铝佐剂,表明2.0 mg/mL是能稳定乳液的最小颗粒浓度。将乳液与抗原共混,测量抗原的吸附率,结果显示,抗原的吸附率接近100%,共聚焦的结果也验证了乳液对抗原的高吸附特性。当乳液与DC(Dendritic Cells)细胞共孵育,可以观察到乳液的内吞及溶酶体逃逸,而传统的铝佐剂无法实现。ELISpot结果显示,APE组脾细胞中分泌IFN-γ的T细胞数量比铝佐剂组增加300%左右。将铝佐剂通过颗粒化的策略制备得到APE以后,改变了佐剂增强抗原的免疫效果,显著提升了传统铝佐剂的细胞免疫效果。

关键词：疫苗 Pickering乳液铝佐剂细胞免疫溶酶体逃逸

铝佐剂和MF59对HIV-1多表位蛋白MEP1佐剂活性的比较研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2019年第7期39卷 499-505页

作者：王月鹏李悄朱青杨裔郭彦周育森寇志华安徽医科大学北京微生物流行病研究所合肥230032 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的比较MF59和铝佐剂在HIV-1多表位蛋白MEP1小鼠体内诱导的免疫应答的异同,确定一种能诱导高水平免疫应答的佐剂配方。方法将MEP1蛋白与MF59或铝佐剂制备成免疫原,肌肉注射BALB/c雌性小鼠,分别在初次免疫和三次免疫后10d分离血清和单... 详细信息

目的比较MF59和铝佐剂在HIV-1多表位蛋白MEP1小鼠体内诱导的免疫应答的异同,确定一种能诱导高水平免疫应答的佐剂配方。方法将MEP1蛋白与MF59或铝佐剂制备成免疫原,肌肉注射BALB/c雌性小鼠,分别在初次免疫和三次免疫后10d分离血清和单个脾细胞,通过间接ELISA检测小鼠血清特异性抗MEP1抗体及亚类,ELISPOT检测脾脏分泌IFN-γ及IL-4淋巴细胞数量,比较两种佐剂诱导的体液和细胞免疫应答的异同。结果单次免疫后,铝佐剂相较MF59能更快促进MEP1诱导早期的体液和细胞免疫应答;三次免疫后,铝佐剂和MF59在促进MEP1诱导Th2偏倚的体液免疫应答的同时,MF59促进MEP1诱导Th1/Th2平衡的细胞免疫应答。结论铝佐剂相较于MF59更适合作为HIV-1多表位蛋白MEP1的佐剂。

关键词： MF59 铝佐剂蛋白疫苗细胞因子抗体

铝佐剂Aβ_(42)及其亚单位疫苗可有效诱导大鼠产生特异性抗体

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中山大学学报（医学科学版） 2004年第1期25卷 39-44页

作者：胡金家汪华侨林贤曲怀刚徐杰姚志彬中山大学基础医学院解剖学教研室脑研究室广东广州510080

[目的]探讨铝佐剂AB42及其C端亚单位肽Aβ36-42疫苗接种大鼠能否产生特异性抗Aβ42抗体。[方法]24只SD大鼠随机分为Aβ42肽疫苗、Aβ36-42肽疫苗和对照组,每组8只。将Aβ42肽疫苗及Aβ36-42与七聚赖氨酸耦联制成的亚单位疫苗分别接种于S... 详细信息

[目的]探讨铝佐剂AB42及其C端亚单位肽Aβ36-42疫苗接种大鼠能否产生特异性抗Aβ42抗体。[方法]24只SD大鼠随机分为Aβ42肽疫苗、Aβ36-42肽疫苗和对照组,每组8只。将Aβ42肽疫苗及Aβ36-42与七聚赖氨酸耦联制成的亚单位疫苗分别接种于SD大鼠,对照组用等体积PBS加铝佐剂。用间接ELISA法检测大鼠血清和脑匀浆上清液中特异性抗体的滴度;用Morris水迷宫测试大鼠的行为学变化;用HE染色观察大鼠的脑、肝、脾和肾组织学变化;用接种后血清与老年性痴呆患者的脑片作免疫组织化学染色。[结果]第3次接种后ABβ42和Aβ36-42组鼠的血清均开始有抗Aβ42抗体产生,抗体滴度随接种次数的增多而增高,第6次接种后两组鼠血清的抗ABβ42抗体滴度均达到1:1 600以上,同时脑匀浆上清液也检测到低滴度的抗Aβ42抗体,血和脑匀浆的抗体滴度与对照组相比,差异有显著性(P0.05);对照组、Aβ42组和Aβ36-42组鼠平台象限游泳距离占总游泳距离百分比分别为59.78±5.68、65.14±4.98和61.34±4.19,各组间差异也无显著性(P>0.05);3组鼠的脑、肝、脾和肾均未出现病理性变化;Aβ42组鼠的血清能结合AD患者脑组织中的老年斑,?

关键词： 13-淀粉样蛋白疫苗铝佐剂老年斑老年性痴呆

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影响含铝佐剂疫苗吸附率和解离率的因素分析

中国医药工业杂志 2023年第5期54卷 719-725页

作者：刘超张艳艳北京博康健基因科技有限公司北京102200 印度瑞迪博士实验室有限公司北京代表处北京100022

吸附率和解离率作为含铝佐剂疫苗重要的体外质量评价指标,是降低临床试验风险的重要保证。随着含铝佐剂疫苗评价手段的不断升级和工艺研究的日益深化,行业也对可为相关产品提供系统解析和深入分析的参考资料提出了更高层次的需求。该文... 详细信息

吸附率和解离率作为含铝佐剂疫苗重要的体外质量评价指标,是降低临床试验风险的重要保证。随着含铝佐剂疫苗评价手段的不断升级和工艺研究的日益深化,行业也对可为相关产品提供系统解析和深入分析的参考资料提出了更高层次的需求。该文基于项目实践经验,重点从佐剂特性、抗原特点和工艺特征方面论述分析,辅以评价方法设计的改善建议,系统总结了原辅料、铝佐剂、制剂工艺、检测方法等影响含铝佐剂疫苗吸附率和解离率的因素,旨在为制剂产品的开发提供参考和借鉴。

关键词：铝佐剂疫苗吸附率解离率

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铝佐剂在幽门螺杆菌疫苗中的应用

免疫学杂志 2004年第z1期20卷 50-51页

作者：刘开云邹全明第三军医大学检验系临床微生物教研室重庆400038

铝佐剂是到目前为止唯一被批准用于人用疫苗的佐剂,长期普遍用于多种疫苗。最近,在幽门螺杆菌(Helico-bacter pylori,Hp)疫苗的研究中,有一些关于铝佐剂的报道。本文就铝佐剂的组成、制备、免疫机制及在抗幽门螺杆菌疫苗中的研究状况做... 详细信息

铝佐剂是到目前为止唯一被批准用于人用疫苗的佐剂,长期普遍用于多种疫苗。最近,在幽门螺杆菌(Helico-bacter pylori,Hp)疫苗的研究中,有一些关于铝佐剂的报道。本文就铝佐剂的组成、制备、免疫机制及在抗幽门螺杆菌疫苗中的研究状况做一综述。

关键词：疫苗铝佐剂免疫

铝佐剂对HBoV1 VP2 VLPs诱导小鼠免疫应答的影响

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中国免疫学杂志 2016年第1期32卷 56-58,64页

作者：邓中华段招军谢志萍谢乐云张兵曹友德湖南省人民医院检验科长沙410005 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京100052

目的:探讨铝佐剂对HBoV1 VP2 VLPs诱导小鼠免疫应答的影响。方法:BABL/c小鼠随机分为VLPs实验组、明矾佐剂实验组、PBS对照组和明矾佐剂对照组。实验组小鼠分别采用HBoV1 VP2 VLPs和HBoV1 VP2 VLPs加明矾佐剂肌肉注射免疫,对照组小鼠同... 详细信息

目的:探讨铝佐剂对HBoV1 VP2 VLPs诱导小鼠免疫应答的影响。方法:BABL/c小鼠随机分为VLPs实验组、明矾佐剂实验组、PBS对照组和明矾佐剂对照组。实验组小鼠分别采用HBoV1 VP2 VLPs和HBoV1 VP2 VLPs加明矾佐剂肌肉注射免疫,对照组小鼠同期注射等量明矾佐剂或PBS缓冲液;实验8周后ELISA检测两实验组特异性Ig G抗体效价和活性,ELIspot检测两实验组特异性细胞免疫反应强度,从细胞免疫和体液免疫强度探讨铝佐剂对HBoV1 VP2 VLPs诱导小鼠免疫应答的影响。结果:明矾佐剂降低HBoV1 VP2 VLPs诱导细胞免疫反应强度(P佐剂使HBoV1 VP2 VLPs诱导的体液免疫反应增强而细胞免疫反应减弱。HBoV1 VP2 VLPs作为预防性疫苗使用时应添加明矾佐剂,作为治疗性疫苗使用时应不加明矾佐剂。

关键词：铝佐剂人博卡病毒1(HBoV1) 病毒蛋白2(VP2) 病毒样颗粒(VLPs)

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铝佐剂机制及其纳米化前景

世界华人消化杂志 2003年第11期11卷 1764-1768页

作者：何萍吕凤林任建敏何凤慈中国人民解放军第三军医大学大坪医院野战外科研究所重庆市400042

铝佐剂是得到公认的疫苗佐剂,但其具体作用机制不甚明了.随着新型疫苗和人工合成多肽疫苗的出现,常规铝佐剂暴露出一些缺点,其应用受到了限制.人们不得不寻找新型的疫苗佐剂或对现有佐剂予以改良.若将铝佐剂纳米化,因其比表面积大、黏... 详细信息

铝佐剂是得到公认的疫苗佐剂,但其具体作用机制不甚明了.随着新型疫苗和人工合成多肽疫苗的出现,常规铝佐剂暴露出一些缺点,其应用受到了限制.人们不得不寻找新型的疫苗佐剂或对现有佐剂予以改良.若将铝佐剂纳米化,因其比表面积大、黏附力强,在增强佐剂活性的同时,可提高抗原的靶向投递、大大降低副作用,不失为一个崭新而有前景的研究方向.还有可能进一步提高黏附和刺激抗原提呈细胞(APC)细胞吞噬的能力,以此为新型的疫苗佐剂将是可行的.本文在对铝佐剂机制进行分析探讨的基础上,联系其应用现状、发展趋势以及化学特性,展望纳米铝佐剂的可能性及应用前景.

关键词：铝佐剂疫苗佐剂纳米制剂抗原提呈细胞发展趋势化学特性免疫应答

植物源多糖联合铝佐剂在水痘-带状疱疹亚单位疫苗中的免疫佐剂活性研究

维普期刊数据库评论

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中华微生物学和免疫学杂志 2019年第6期39卷 454-459页

作者：聂梅凤李宜珂黄小芬程通赵勤俭厦门大学公共卫生学院分子疫苗学和分子诊断学国家重点实验室国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心361102

目的评价枸杞多糖、当归多糖、甘草多糖及菊粉多糖单独或者联合铝佐剂对水痘-带状疱疹病毒(varicella-zoster virus, VZV)糖蛋白E(glycoprotein, gE)的免疫佐剂活性。方法4种植物源多糖单独或联合铝佐剂配伍重组蛋白VZV gE后,分别在第0... 详细信息

目的评价枸杞多糖、当归多糖、甘草多糖及菊粉多糖单独或者联合铝佐剂对水痘-带状疱疹病毒(varicella-zoster virus, VZV)糖蛋白E(glycoprotein, gE)的免疫佐剂活性。方法4种植物源多糖单独或联合铝佐剂配伍重组蛋白VZV gE后,分别在第0、2周对BALB/c小鼠进行肌肉免疫。ELISA法检测小鼠血清抗体滴度与亚型;CCK-8法检测脾淋巴细胞增殖;ELISA法检测脾细胞上清中IFN-γ和IL-4的含量;流式细胞术检测T细胞亚群。结果4种植物源多糖联合铝佐剂对重组蛋白VZV gE显示出良好的佐剂活性,其中甘草多糖联合铝佐剂可提高IgG2类抗体水平,促进脾淋巴细胞增殖和细胞因子IFN-γ以及IL-4的分泌,此外,还能提高CD3+CD4+和CD3+CD8+ T细胞的百分比。结论4种植物源多糖联用铝佐剂可提高抗体水平,其中甘草多糖联用铝佐剂可能会对机体细胞免疫应答具有一定的刺激作用。

关键词：水痘-带状疱疹病毒疫苗植物源多糖铝佐剂免疫刺激效果

铝佐剂类型及吸附率对吸附无细胞百白破联合疫苗免疫原性的影响

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免疫学杂志 2015年第7期31卷 580-584页

作者：韩露朱涛邵忠琦司伟雪天津科技大学生物工程学院 300457 天津康希诺生物技术有限公司 300457

目的研究铝佐剂类型及吸附能力对吸附无细胞百白破联合疫苗免疫原性的影响,筛选最佳佐剂。方法用磷酸铝(AP)、不同浓度磷酸盐处理的氢氧化铝(PTAH)以及氢氧化铝(AH)佐剂吸附百白破抗原,检测不同佐剂对各抗原的吸附率。制备不同佐剂类型... 详细信息

目的研究铝佐剂类型及吸附能力对吸附无细胞百白破联合疫苗免疫原性的影响,筛选最佳佐剂。方法用磷酸铝(AP)、不同浓度磷酸盐处理的氢氧化铝(PTAH)以及氢氧化铝(AH)佐剂吸附百白破抗原,检测不同佐剂对各抗原的吸附率。制备不同佐剂类型和吸附率的制剂,腹腔免疫NIH小鼠,ELISA法测定免疫后各组小鼠血清抗体滴度。结果百日咳丝状血凝素(FHA)在所有佐剂中吸附率≥95%,百日咳类毒素(PT)、百日咳溶血素(PRN)、精制白喉类毒素(DT)和破伤风类毒素(TT)则随着铝佐剂中磷酸根增多吸附率降低。动物实验产生PT抗体水平大小关系:AP/AH>PTAH/无佐剂组;产生FHA抗体水平大小关系:AP/PTAH-3/AH>PTAH-2/PTAH-3>无佐剂组;产生PRN抗体水平大小关系:PTAH/AP/AH>无佐剂组;产生DT抗体水平大小关系:AP>PTAH>AH>无佐剂组;产生TT抗体水平大小关系:PTAH>AH/AP/无佐剂组。结论铝佐剂吸附力不影响抗原(DT除外)免疫原性,磷酸铝更适合作吸附无细胞百白破联合疫苗的佐剂。

关键词：铝佐剂百白破疫苗吸附率免疫原性