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猪旋毛虫病时间分辨荧光免疫层析试纸条的研制

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中国兽医科学 2023年第4期53卷 412-418页

作者：李艾哲张惠媛刘琰白雪丁静李辰刘晓雷王洋刘明远吉林大学人兽共患病研究所人兽共患病研究教育部重点实验室吉林长春130062

应用旋毛虫混合排泄分泌蛋白(ES)和家兔IgG分别偶联铕(Eu)纳米颗粒(EuNPs)制备2个荧光探针,即EuNPs-ES探针和EuNPs-Rabbit IgG探针。将小鼠抗猪IgG与山羊抗家兔IgG分别包被于检测线与质控线上,制备时间分辨荧光免疫层析试纸条。采用15... 详细信息

应用旋毛虫混合排泄分泌蛋白(ES)和家兔IgG分别偶联铕(Eu)纳米颗粒(EuNPs)制备2个荧光探针,即EuNPs-ES探针和EuNPs-Rabbit IgG探针。将小鼠抗猪IgG与山羊抗家兔IgG分别包被于检测线与质控线上,制备时间分辨荧光免疫层析试纸条。采用15头不同剂量人工感染旋毛虫猪的全血评估研制的试纸条性能。结果显示,用试纸条检测感染200、400、1000、10000条旋毛虫肌幼虫的猪全血样品时,结果均为阳性。而使用集样消化法消化对应的猪膈肌样本时,低剂量(200条)未全部检出。以上结果表明,本研究中建立的时间分辨荧光免疫层析试纸条方法相比于集样消化法具有更高的灵敏度,且操作简便,仅需5~10 min即可出结果,本研究成功建立了一种用于现场快速检测旋毛虫病的方法。

关键词：旋毛虫病肌幼虫排泄分泌抗原铕纳米颗粒全血免疫层析试纸条

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旋毛虫病荧光免疫层析检测试纸条的研制

中国兽医科学 2020年第12期50卷 1475-1480页

作者：王鑫瑜杨丽张小波董子健刘琰王洋刘明远吉林大学动物医学学院人兽共患病研究教育部重点实验室吉林长春130062

为研制一种快速诊断旋毛虫病的免疫层析试纸条,以铕纳米颗粒作为捕获探针,共价偶联山羊抗猪Ig G抗体,并将肌幼虫期排泄分泌抗原、兔抗山羊Ig G抗体分别喷涂于检测线和质控线,制备免疫层析试纸条。结果显示:检测感染75、150、1000和5000... 详细信息

为研制一种快速诊断旋毛虫病的免疫层析试纸条,以铕纳米颗粒作为捕获探针,共价偶联山羊抗猪Ig G抗体,并将肌幼虫期排泄分泌抗原、兔抗山羊Ig G抗体分别喷涂于检测线和质控线,制备免疫层析试纸条。结果显示:检测感染75、150、1000和50000条肌幼虫的猪血清,试纸条分别可以在感染后第60、45、35和26天检测到旋毛虫抗体阳性,其检测结果与ELISA方法一致。此外,该试纸条检测时间大大缩短,在10 min内即可完成检测。该试纸条与猪蛔虫、华支睾吸虫、猪囊虫感染猪血清均无交叉反应,特异性良好。上述结果表明,成功建立了一种快速、灵敏的旋毛虫病免疫层析诊断试纸条。

关键词：旋毛虫病肌幼虫排泄分泌抗原铕纳米颗粒免疫层析试纸条

一锅煮法制备蓝色荧光铕纳米粒子及其荧光性能研究

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化学研究与应用 2018年第12期30卷 1956-1960页

作者：杨凤廖彩云王美娜李静吴莉郭勇四川大学化学学院四川成都610064 乐山市市中区环境检测站四川乐山614000 成都产品质量检验研究院有限公司四川成都610100 四川大学分析测试中心四川成都610064

利用简单"一锅煮"的方法快速制备稳定性好、荧光强度高的铕纳米颗粒(Eu NPs@BSA/H2O2)。以氯化铕为铕源、BSA为稳定剂和还原剂,在含有H2O2体系中合成Eu NPs@BSA/H2O2。利用荧光光谱仪考察了合成体系和合成条件对所得纳米颗粒荧光性能的... 详细信息

利用简单"一锅煮"的方法快速制备稳定性好、荧光强度高的铕纳米颗粒(Eu NPs@BSA/H2O2)。以氯化铕为铕源、BSA为稳定剂和还原剂,在含有H2O2体系中合成Eu NPs@BSA/H2O2。利用荧光光谱仪考察了合成体系和合成条件对所得纳米颗粒荧光性能的影响。结果表明,反应体系的最佳p H为12. 0,BSA最佳浓度为14. 0 mg m L-1,最佳反应温度为55℃,最佳反应时间为25 min。Eu NPs@BSA/H2O2的粒径分布为2～7nm,其荧光激发和发射峰分别位于～340和～450 nm。

关键词：铕纳米颗粒荧光特性湿化学法荧光传感器

猪伪狂犬病毒gE抗体阻断荧光侧向免疫层析现场检测方法的建立

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猪伪狂犬病毒gE抗体阻断荧光侧向免疫层析现场检测方法的建立

作者：陈辉暨南大学

学位级别：硕士

目的:建立快速灵敏的猪伪狂犬病毒（pseudorabies virus,PRV）g E抗体阻断荧光侧向免疫层析试纸条,用于PRV g E抗体的快速检测,实现PRV野毒感染和疫苗免疫猪的现场鉴别诊断。方法:以铕纳米颗粒（europium nanoparticles,Eu NPs）标记PR... 详细信息

目的:建立快速灵敏的猪伪狂犬病毒（pseudorabies virus,PRV）g E抗体阻断荧光侧向免疫层析试纸条,用于PRV g E抗体的快速检测,实现PRV野毒感染和疫苗免疫猪的现场鉴别诊断。方法:以铕纳米颗粒（europium nanoparticles,Eu NPs）标记PRV病毒颗粒和羊抗鸡Ig Y制备荧光探针,分别以鸡Ig Y和PRV-g E单克隆抗体包被C线和T线,基于阻断侧向免疫层析策略,建立猪伪狂犬病毒g E抗体阻断荧光侧向免疫层析试纸条（blocking fluorescence lateral flow immunochromatographic strip,PRV-g EBLFIA）。试纸条组装完成后进行了一系列的条件优化。在最优条件下对试纸条的灵敏度、特异性、重复性和保存期进行了评价。对临床样品的检测结果与IDEXX PRV g E-ELISA试剂盒进行比较。结果:PRV-g E-BLFIA能检测的最大血清稀释倍数为1:80,与其他猪病病毒感染血清的交叉反应率低,批内和批间重复性的变异系数（coefficient of variation,CV值）均小于15%,可以在室温保存半年以上。在临床样品测试时（n=356）,与IDEXX g E-ELISA试剂盒的阳性符合率为91.7%（89/97）,阴性符合率为97.7%（253/259）,总符合率为96.1%（342/356）。结论:成功制备了PRV-g E抗体检测阻断荧光侧向免疫层析试纸条（PRV-g EBLFIA）,该方法具有较高的灵敏度、特异性和稳定性,同时,操作简便,反应快速（15 min）,价格经济,十分符合猪伪狂犬病现场快速鉴别诊断的要求。

关键词：伪狂犬病毒荧光侧向免疫层析试纸条铕纳米颗粒鉴别诊断