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RNA干扰技术在昆虫滞育机制研究中的应用

环境昆虫学报 2018年第6期40卷 1248-1254页

作者：韩艳华刘梦姚张洪志王曼姿高飞王孟卿刘晨曦陈红印张礼生中国农业科学院植物保护研究所中美生防实验室北京100193

滞育是昆虫对环境适应的一种重要的生理特性,研究其机理有助于对有益昆虫的开发利用和对害虫生态调控新途径的探索。RNA干扰是生物体内源基因发生转录后特异性降解的一种生理现象,作为一种强有力的分子生物学技术,已逐渐应用于昆虫功能... 详细信息

滞育是昆虫对环境适应的一种重要的生理特性,研究其机理有助于对有益昆虫的开发利用和对害虫生态调控新途径的探索。RNA干扰是生物体内源基因发生转录后特异性降解的一种生理现象,作为一种强有力的分子生物学技术,已逐渐应用于昆虫功能基因研究以及害虫防治等领域。本文围绕RNAi的作用机理及其对昆虫滞育相关基因的沉默研究展开综述,旨在为进一步研究滞育分子机制提供新思路。

关键词：滞育机制 RNA 干扰钟基因激素热激蛋白脂代谢

光照对大鼠外周血淋巴细胞生物钟相关基因表达的影响

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中华物理医学与康复杂志 2009年第6期31卷 386-389页

作者：杜玉珍高锋童建上海交通大学附属第六人民医院检验科上海200233 江苏省苏州大学放射医学与公共卫生学院卫生毒理教研室

目的探讨光照对机体外周血淋巴细胞钟基因clock及褪黑素膜受体基因（mt1和mt2）表达的影响,为生物钟应用于临床提供基础依据.方法将100只Sprague-Dawley大鼠随机分为2组,分别在全黑暗和光照-黑暗交替（12：12）条件下饲养.6周后用活... 详细信息

目的探讨光照对机体外周血淋巴细胞钟基因clock及褪黑素膜受体基因（mt1和mt2）表达的影响,为生物钟应用于临床提供基础依据.方法将100只Sprague-Dawley大鼠随机分为2组,分别在全黑暗和光照-黑暗交替（12：12）条件下饲养.6周后用活动度测定仪筛选昼夜节律表现比较一致的大鼠,每组36只,再根据不同检测时间点随机分6个亚组,每个亚组6只,继续于相应光照条件下（全黑暗和光照黑暗交替）饲养1周后,收集外周血淋巴细胞.用半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法检测生物钟相关基因clock、mt1和mt2的变化,用余弦软件进行节律特征分析,并比较在两种光照条件下基因表达的节律变化.结果在全黑暗光制下,clock、mt1和mt2均呈节律性表达,其峰值相位分别位于CT7、CT9和CT11;在光照-黑暗交替（12：12）光制下,各基因表达的节律特征发生了变化,峰值相位分别为ZT21、ZT8和ZT6.在不同光制下,基因表达的强度和振幅有所不同.结论光照能影响外周血淋巴细胞钟基因clock及相关基因的表达,光照可能通过clock对mt1和mt2的表达节律起调节作用.

关键词：生物钟外周血淋巴细胞钟基因褪黑素膜受体

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生物节律基因period3的研究进展

生命科学 2011年第5期23卷 465-469页

作者：安怀杰俞炜源赵晓航海军总医院全军航海航空医学中心北京100037 军事医学科学院生物工程研究所北京100071

昼夜节律是所有真核生物和部分原核生物的基本特征,一组节律表达的生物钟基因形成24 h周期振荡的自主调节转录-翻译反馈回路。period(per)基因家族是生物钟反馈回路中重要组成成分,per3基因是period基因家族成员之一。人类的per3基因定... 详细信息

昼夜节律是所有真核生物和部分原核生物的基本特征,一组节律表达的生物钟基因形成24 h周期振荡的自主调节转录-翻译反馈回路。period(per)基因家族是生物钟反馈回路中重要组成成分,per3基因是period基因家族成员之一。人类的per3基因定位于染色体1p36,其编码区第18外显子中含有一个灵长类特有的串联重复序列(variable number tandem repeat,VNTR)。该VNTR包含一簇理论上的磷酸化位点,能影响PER3蛋白的磷酸化降解,影响PER3蛋白的功能。近年研究发现,per3基因多态性与睡眠结构、睡眠紊乱发病年龄、睡眠剥夺后次日清晨执行能力等密切相关。

关键词：昼夜节律钟基因 period3基因串联重复多态性

近日节律基因Clock对雄性小鼠生殖功能的影响

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航天医学与医学工程 2007年第5期20卷 354-357页

作者：蒋小辉叶珊汪宇辉刘延友江舟张路王正荣四川大学华西医学中心基础医学与法医学院四川成都610041

目的通过干扰小鼠睾丸节律基因Clock的表达,研究Clock对雄性小鼠生殖能力的影响。方法通过RNA干扰技术干扰雄性小鼠睾丸节律基因Clock的表达,以Western blot检测干扰效果,研究干扰Clock表达后对小鼠体内胎仔数和精子数量、精子活力、体... 详细信息

目的通过干扰小鼠睾丸节律基因Clock的表达,研究Clock对雄性小鼠生殖能力的影响。方法通过RNA干扰技术干扰雄性小鼠睾丸节律基因Clock的表达,以Western blot检测干扰效果,研究干扰Clock表达后对小鼠体内胎仔数和精子数量、精子活力、体外受精率的影响。结果Clock干扰质粒使小鼠睾丸Clock蛋白的表达明显下调。在体内实验不但影响了雄性小鼠的胎仔数,而且其相对应的精子体外受精能力也明显下降。结论节律基因Clock与雄性小鼠的生殖功能有密切的关系。

关键词：时间生物学近日节律基因钟基因圆形精子顶体受精能力

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果蝇衰老与昼夜节律和睡眠相关的研究进展

应用昆虫学报 2021年第6期58卷 1234-1244页

作者：吕鹏飞赵章武杜娟中国农业大学植物保护学院农业部作物有害生物监测与绿色防控重点实验室北京100193

人类和果蝇都具有保守的昼夜节律系统。对果蝇因衰老而引起的节律和睡眠变化的相关研究是了解人类衰老后身体机能发生怎样变化的重要途经。昼夜生物钟节律系统主要包括输入系统、核心时钟系统和输出系统。睡眠是生物周期性出现的一种自... 详细信息

人类和果蝇都具有保守的昼夜节律系统。对果蝇因衰老而引起的节律和睡眠变化的相关研究是了解人类衰老后身体机能发生怎样变化的重要途经。昼夜生物钟节律系统主要包括输入系统、核心时钟系统和输出系统。睡眠是生物周期性出现的一种自发和可逆的静息状态,普遍存在于低等和高等生物中。昼夜节律和睡眠都会随着果蝇的衰老而逐渐变弱。早期研究表明,衰老后昼夜节律系统变弱跟体内外周神经元的钟基因表达量大幅度降低有关,但是衰老后核心钟基因的表达量变化却不清楚。本文对果蝇中节律、睡眠及其与衰老关系的研究进行综述。

关键词：果蝇昼夜节律睡眠衰老钟基因

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光照对大鼠视网膜隐色素2表达的影响

江苏医药 2011年第21期37卷 2481-2484,F0002页

作者：林琳王育良徐金华南京中医药大学附属医院 210029

目的探讨日光灯长期照射对SD大鼠视网膜钟基因隐色素2(Cry2)表达的影响。方法健康SD大鼠30只,随机分成2组,每组15只。实验组接受人工光源循环照射,对照组接受自然光线的照射,观察时间3个月。采用免疫组织化学法和实时定量-PCR检测Cry2... 详细信息

目的探讨日光灯长期照射对SD大鼠视网膜钟基因隐色素2(Cry2)表达的影响。方法健康SD大鼠30只,随机分成2组,每组15只。实验组接受人工光源循环照射,对照组接受自然光线的照射,观察时间3个月。采用免疫组织化学法和实时定量-PCR检测Cry2蛋白和Cry2mRNA在视网膜组织的表达。结果两组视网膜节细胞及部分内核层细胞均有Cry2蛋白的阳性表达。实验组Cry2蛋白和Cry2mRNA表达均较对照组减少(P钟基因Cry2的表达降低,提示光照对视网膜生物钟可能产生影响。

关键词：隐色素钟基因视网膜人工光源

脱氧核酶抑制近日基因period1表达的实验研究

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中国科学（C辑） 2005年第2期35卷 98-103页

作者：周薇王跃锜刘延友彭文珍肖静朱彬王正荣四川大学华西基础与法医学院生物医学工程研究室成都610041 四川大学华西基础与法医学院生物化学与分子生物学教研室成都610041

研究脱氧核酶对近日钟基因period1(per1)表达的影响,进而寻找治疗和近日节律有关疾病的基因疗法.设计合成针对per1的脱氧核酶DRz164,DRz256,并构建pcDNA3-per1164:256体外转录载体,将转录产物和脱氧核酶混合,在一定反应条件下进行体外... 详细信息

研究脱氧核酶对近日钟基因period1(per1)表达的影响,进而寻找治疗和近日节律有关疾病的基因疗法.设计合成针对per1的脱氧核酶DRz164,DRz256,并构建pcDNA3-per1164:256体外转录载体,将转录产物和脱氧核酶混合,在一定反应条件下进行体外切割反应,地高辛酶联免疫及酶催化显色法检测脱氧核酶的体外切割效率.将pcDNA3-per1和DRz164或DRz256在脂质体的介导下转染NIH3T3细胞,通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、流式细胞术(FCM)检测脱氧核酶对近日基因表达的影响.于37℃孵育2h后,DRz164对底物的剪切百分率为63%,DRz256为50.5%.RT-PCR半定量检测per1mRNA表达水平明显下降,FCM结果显示细胞内Per1蛋白的合成受到抑制.脱氧核酶DRz164,DRz256体外具有定点切割近日钟基因per1mRNA组分的活性,使转染细胞per1mRNA和Per1蛋白表达下降.

关键词：实验研究酶抑制 NIH3T3细胞脱氧核酶聚合酶链反应 mRNA表达 RT-PCR 流式细胞术半定量检测设计合成基因疗法近日节律体外转录转录产物切割反应反应条件切割效率酶联免疫基因表达蛋白表达转染细胞钟基因

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物质成瘾与昼夜节律相互关系的研究进展

中国药物依赖性杂志 2019年第2期28卷 83-90页

作者：王德权吕佳王源刘可智李素霞北京大学中国药物依赖性研究所北京100191 西南医科大学临床医学院四川泸州646000 西南医科大学附属医院四川泸州646000 西南医科大学附属医院卫生学校四川泸州646000

药物成瘾是一个突出的社会问题,给家庭和社会带来了巨大损失。然而其发生机制尚不完全清楚,近年来,在众多机制假说中生物节律机制的研究越来越受到关注。本文将以可卡因为例,从其体内代谢过程、对人体危害、作用机制,到昼夜节律系统、... 详细信息

药物成瘾是一个突出的社会问题,给家庭和社会带来了巨大损失。然而其发生机制尚不完全清楚,近年来,在众多机制假说中生物节律机制的研究越来越受到关注。本文将以可卡因为例,从其体内代谢过程、对人体危害、作用机制,到昼夜节律系统、以及物质成瘾和昼夜节律两者相互关系的研究进展,做一详细综述。

关键词：药物成瘾可卡因昼夜节律钟基因

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昆虫生物钟分子调控研究进展

应用昆虫学报 2011年第6期48卷 1586-1595页

作者：陈文锋贺春霞安春菊赵章武中国农业大学农业与生物技术学院昆虫系北京100193

昆虫生物钟节律的研究是人类了解生物节律的重要途径。昆虫在生理和行为上具有广泛的节律活动,如运动、睡眠、学习记忆、交配、嗅觉等节律活动,其中昼夜活动行为节律的研究广泛而深入。昆虫乃至高等动物普遍具有保守的昼夜节律系统,昼... 详细信息

昆虫生物钟节律的研究是人类了解生物节律的重要途径。昆虫在生理和行为上具有广泛的节律活动,如运动、睡眠、学习记忆、交配、嗅觉等节律活动,其中昼夜活动行为节律的研究广泛而深入。昆虫乃至高等动物普遍具有保守的昼夜节律系统,昼夜生物钟节律主要包括输入系统:用于接受外界光和温度等环境信号并传入核心振荡器,使得生物时钟与环境同步;核心时钟系统:自我维持的昼夜振荡器;输出系统:将生物钟产生的信号传递出去而控制生物行为和生理的节律变化。早期分子和遗传学研究主要关注昼夜节律振荡器的分子机制及神经生物学,阐明了昼夜生物钟节律的主要分子机制及相关神经网络。最近更多的研究关注生物钟信号是如何输入和输出。本文以果蝇运动节律的相关研究为主要内容,围绕生物钟输入系统、振荡器、输出系统这3个组成部分对昆虫生物钟研究进展进行总结。

关键词：昆虫昼夜节律生物钟钟基因神经网络