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抗钙蛋白酶抑素C端Ⅳ区抗体在类风湿关节炎患者中的意义

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中华风湿病学杂志 2006年第5期10卷 280-283页

作者：徐建华连莉张锐徐胜前王芬王春淮安徽医科大学第一附属医院风湿免疫科合肥230022

目的检测抗钙蛋白酶抑素C端Ⅳ区抗体(ACAST-DⅣ)在类风湿关节炎(RA)中的阳性率,探讨ACAST-DⅣ在RA中的意义。方法人工合成已鉴定的钙蛋白酶抑素C端Ⅳ区A、B、C3个抗原表位多肽,分别以A、B、C肽(均为9肽)为抗原,并将3个肽稀释后混合作为... 详细信息

目的检测抗钙蛋白酶抑素C端Ⅳ区抗体(ACAST-DⅣ)在类风湿关节炎(RA)中的阳性率,探讨ACAST-DⅣ在RA中的意义。方法人工合成已鉴定的钙蛋白酶抑素C端Ⅳ区A、B、C3个抗原表位多肽,分别以A、B、C肽(均为9肽)为抗原,并将3个肽稀释后混合作为Ⅳ区抗原。用酶联免疫吸附试验(ELISA)分别检测191例RA、147例其他风湿病患者和106名正常人血清中抗A、B、C肽和ACAST-DⅣ的水平及阳性率。同时分析ACAST-DⅣ与类风湿因子(RF)、抗环瓜氨酸多肽(CCP)抗体相关性,比较ACAST-DⅣ阳性组与阴性组的血沉(ESR)、RF、C反应蛋白(CRP)和日常生活能力(HAQ)。结果RA患者ACAST-DⅣ抗原表位A、B和C肽的吸光度值水平和阳性率均明显高于其他风湿病和正常对照组(P<0.01),对RA诊断的敏感性分别为33.3%、28.9%和46.7%;特异性分别为96.7%、96.7%和87.8%。ACAST-DⅣ(3个肽混合)在RA、骨关节炎(OA)、系统性红斑狼疮(SLE)、脊柱关节病(SPA)和正常对照组中的阳性率分别为74.3%、2.8%、0、0和6.6%(P<0.01)。ACAST-DⅣ对RA诊断的敏感性和特异性为74.3%和96.3%;阳性预测值92.6%,阴性预测值85.8%。ACAST-DⅣ与抗CCP抗体之间有相关性(P<0.05),与RF之间无明显相关。ACAST-DⅣ阳性组ESR明显高于阴性组(P<0.05),但CRP、RF和HAQ两组之间差异无统计学意义。结论ACAST-DⅣ对RA诊断有较好的敏感性(74.3%)和特异性(96.3%)。ACAST-DⅣ与抗CCP抗体相关,且该抗体阳性患者的ESR明显升高,可能与疾病活动有关。ACAST-DⅣ可作为RA的血清学诊断指标。

关键词：类风湿关节炎肽水解酶类钙蛋白酶抑素抗钙蛋白酶抑素抗体

钙蛋白酶介导模拟失重大鼠心肌肌钙蛋白抑制亚基的降解

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生理学报 2010年第5期62卷 415-420页

作者：徐彭涛宋振李全张琳王云英余志斌第四军医大学航空航天生理教研室西安710032

本文旨在观察尾部悬吊模拟失重大鼠心肌钙蛋白酶(calpain)与钙蛋白酶抑素(calpastatin)表达的变化,以探讨心肌肌钙蛋白抑制亚基(cardiac troponin I,cTnI)降解的可能机制。采用尾部悬吊模拟失重大鼠模型,Western blotting技术观测心肌ca... 详细信息

本文旨在观察尾部悬吊模拟失重大鼠心肌钙蛋白酶(calpain)与钙蛋白酶抑素(calpastatin)表达的变化,以探讨心肌肌钙蛋白抑制亚基(cardiac troponin I,cTnI)降解的可能机制。采用尾部悬吊模拟失重大鼠模型,Western blotting技术观测心肌calpain-1、calpain-2与calpastatin的表达;PD150606抑制calpain活性,分析cTnI降解程度的变化。结果显示:与同步对照组相比,悬吊2周与4周组大鼠心肌calpastatin表达呈显著性降低(P抑制剂PD150606处理后,对照组及悬吊组cTnI的降解均被显著抑制(P<0.01)。这些结果提示模拟失重大鼠心肌calpain活性增高可能增加cTnI的降解。

关键词：钙蛋白酶钙蛋白酶抑素心肌肌钙蛋白抑制亚基模拟失重蛋白降解

CSL与CaV 1.2钙通道N末端的相互结合作用

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解剖科学进展 2020年第6期26卷 622-625,629页

作者：薛迎春张峰慧雷帅周诗晏珊严玲邵冬雪苏敬阳胡慧媛郝丽英中国医科大学药学院药物毒理学教研室辽宁沈阳110122

目的探讨钙蛋白酶抑素结构域L(CSL)与CaV1.2钙通道N末端(NT)之间的相互结合作用。方法利用I-TASSER同源建模服务器,对豚鼠CaV 1.2钙通道N末端和人源CSL蛋白进行同源建模,利用MOE软件预测CSL和NT蛋白之间的结合,并采用GST pull-down实验... 详细信息

目的探讨钙蛋白酶抑素结构域L(CSL)与CaV1.2钙通道N末端(NT)之间的相互结合作用。方法利用I-TASSER同源建模服务器,对豚鼠CaV 1.2钙通道N末端和人源CSL蛋白进行同源建模,利用MOE软件预测CSL和NT蛋白之间的结合,并采用GST pull-down实验研究CSL和NT蛋白的结合特点。结果与MOE软件预测出CSL和NT蛋白可以结合,且在NT蛋白上存在两个结合位点;Pull-down实验进一步证实二者可以直接结合,且该结合具有CSL浓度依赖性。结论 CSL可以与NT蛋白结合,为进一步揭示CaV1.2钙通道的调节机制奠定了基础。

关键词： CaV1.2钙通道钙蛋白酶抑素 MOE GST pull-down

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CS_L载体构建表达纯化及活性鉴定

解剖科学进展 2018年第6期24卷 644-647页

作者：雷帅胡慧媛王一妃周诗苏敬阳曾晓荣郝丽英中国医科大学药学院药物毒理学教研室辽宁沈阳110122 西南医科大学心血管医学研究所医学电生理学教育部重点实验室四川泸州646000

目的构建Calpastatin N末端结构域Calpastatin domain L(CS L)(a.a.150-230)融合蛋白质粒,表达、提取、纯化CS L蛋白并进行生物学活性鉴定。方法将CS L的cDNA片段插入pGEX-6p-3质粒载体后,转化大肠杆菌BL21感受态细胞,大量培养后用异丙... 详细信息

目的构建Calpastatin N末端结构域Calpastatin domain L(CS L)(a.a.150-230)融合蛋白质粒,表达、提取、纯化CS L蛋白并进行生物学活性鉴定。方法将CS L的cDNA片段插入pGEX-6p-3质粒载体后,转化大肠杆菌BL21感受态细胞,大量培养后用异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(isopropy-β-D-thiogalactoside, IPTG)诱导蛋白表达,超声破碎法提取CS L蛋白。利用Glutathione-Sepharose 4B (GS-4B)beads和PreScission蛋白酶分离纯化蛋白,pull down assay检测其生物学活性。结果 CS L质粒经测序比对后表明构建成功;超声破碎法提取的CS L蛋白纯度和浓度均较高,并具有能够与GST-CT1融合蛋白浓度依赖性结合的生物学活性。结论成功构建CS L融合蛋白质粒,提取纯化具有生物活性的CS L蛋白,为探讨Cav1.2钙通道自身调节机制奠定基础。

关键词：钙蛋白酶抑素 pulldownassay 质粒构建

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钙蛋白酶在视网膜疾病中的作用

国际眼科纵览 2008年第2期32卷 117-120页

作者：许预赵世红第二军医大学附属长海医院眼科上海200433

钙蛋白酶（calpain）是一类与细胞凋亡和坏死过程密切相关的蛋白，在包括视网膜在内的人体众多组织中，它的活化均与神经变性和细胞死亡有关，其抑制剂在多种神经细胞中具有神经保护作用，但它的特异性和潜在副作用仍需进一步研究。本... 详细信息

钙蛋白酶（calpain）是一类与细胞凋亡和坏死过程密切相关的蛋白，在包括视网膜在内的人体众多组织中，它的活化均与神经变性和细胞死亡有关，其抑制剂在多种神经细胞中具有神经保护作用，但它的特异性和潜在副作用仍需进一步研究。本文综述钙蛋白酶及其抑制剂在神经损伤与保护方面的作用，并探讨它在治疗多种视网膜疾病中的应用前景。

关键词：钙蛋白酶视网膜变性钙蛋白酶抑素细胞凋亡