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N-钙黏蛋白与Wnt/β-catenin通路在骨髓间充质干细胞与白血病干细胞中的耐药机制研究

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医学临床研究 2024年第5期41卷 688-692页

作者：马小美吴爱瑜邓嘉仪吴维颢陈隆天黄建清余莲福建省龙岩市第一医院血液风湿科福建龙岩364000

【目的】探讨N-钙黏蛋白(N-cadherin)与Wnt/β-catenin通路在骨髓间充质干细胞(MSC)与白血病干细胞(LSC)中的耐药机制研究。【方法】65例急性髓系白血病(AML)患者,完全缓解41例,未缓解24例,比较两组CD34+CD38-干细胞中N-cadherin的表达... 详细信息

【目的】探讨N-钙黏蛋白(N-cadherin)与Wnt/β-catenin通路在骨髓间充质干细胞(MSC)与白血病干细胞(LSC)中的耐药机制研究。【方法】65例急性髓系白血病(AML)患者,完全缓解41例,未缓解24例,比较两组CD34+CD38-干细胞中N-cadherin的表达差异。根据不同MSC或去甲氧柔红霉素(IDA)处理下将CD34+CD38-Kg1α细胞分为6组,检测细胞增殖和凋亡情况及N-cadherin、β-catenin水平,检测细胞黏附及抗凋亡能力。【结果】未缓解患者的N-cadherin表达水平高于完全缓解者(P<0.01);LSC+IDA组(B组)细胞凋亡率显著高于LSC与MSC直接共培养+IDA组(D组)(P<0.05);在IDA浓度为100 nmol/L、200 nmol/L时,B组的细胞增殖抑制率显著高于D组(P<0.05);B组的集落形成率显著低于D组(P<0.05)。Western blot结果显示:N-cadherin及β-catenin在MSC直接接触培养条件下表达高于单独培养或分离培养;LSC在MSC共培养条件下,N-cadherin及β-catenin表达水平上升,伴随细胞核内β-catenin水平上升。【结论】骨髓微环境的MSC可以通过N-cadherin与LSC的黏附作用支持LSC的增殖能力,同时促进LSC Wnt/β-catenin通路的激活,对化疗药物产生耐药性。

关键词：白血病,髓样,急性钙结合蛋白质类抗药性,肿瘤

NLRC4基因变异致自身炎症反应伴婴幼儿小肠结肠炎新生儿期发病1例

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中华围产医学杂志 2022年第12期25卷 968-970页

作者：程萍孙慧清余增渊李明超李利锋郑州大学附属儿童医院(河南省儿童医院、郑州儿童医院)新生儿科郑州450000

本文报道1例NLRC4基因变异导致的新生儿期发病的自身炎症反应伴婴幼儿小肠结肠炎(autoinflammation with infantile enterocolitis,AIFEC)患儿。患儿男,新生儿期发病,表现为反复发热、皮疹、肝脾大和小肠结肠炎,实验室检查显示铁蛋白、C... 详细信息

本文报道1例NLRC4基因变异导致的新生儿期发病的自身炎症反应伴婴幼儿小肠结肠炎(autoinflammation with infantile enterocolitis,AIFEC)患儿。患儿男,新生儿期发病,表现为反复发热、皮疹、肝脾大和小肠结肠炎,实验室检查显示铁蛋白、C-反应蛋白等升高,并发巨噬细胞活化综合征。抗感染治疗效果差。全外显子组测序提示NLRC4基因c.1021G>C(p.Val341Leu)新发杂合变异,诊断AIFEC。AIFEC罕见,在新生儿期即可发病,可通过全外显子组测序明确诊断,该病目前尚无有效治疗方法。

关键词：小肠结肠炎全身炎症反应综合征钙结合蛋白质类 CARD信号接头蛋白质类遗传变异婴儿新生

钙结合蛋白A9在子宫颈癌中的表达及其与疗效的关系

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肿瘤研究与临床 2023年第11期35卷 827-832页

作者：陈妮方喜平恩施土家族苗族自治州中心医院肿瘤科恩施445000

目的探讨子宫颈癌钙结合蛋白A9(S100A9)表达情况及其与患者TC(紫杉醇+卡铂)方案化疗效果的关系。方法选取2017年7月至2021年5月恩施土家族苗族自治州中心医院收治的拟行TC方案化疗的119例子宫颈癌患者开展前瞻性研究。患者均于治疗前行... 详细信息

目的探讨子宫颈癌钙结合蛋白A9(S100A9)表达情况及其与患者TC(紫杉醇+卡铂)方案化疗效果的关系。方法选取2017年7月至2021年5月恩施土家族苗族自治州中心医院收治的拟行TC方案化疗的119例子宫颈癌患者开展前瞻性研究。患者均于治疗前行活组织检查取组织标本,采用免疫组织化学法检测子宫颈癌组织与癌旁正常组织中S100A9、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、血管内皮生长因子(VEGF)表达情况,采用Spearman法分析子宫颈癌组织S100A9表达与MMP-9、VEGF表达的关系。根据化疗效果将患者分为有效组(完全缓解+部分缓解)和无效组(稳定+进展),对比两组癌组织中S100A9、MMP-9、VEGF表达情况。采用多因素logistic回归法分析TC方案化疗效果影响因素。结果与癌旁组织相比,子宫颈癌组织S100A9[90.76%(108/119)比45.38%(54/119)]、MMP-9[55.46%(66/119)比17.65%(21/119)]、VEGF[78.99%(94/119)比24.37%(29/119)]阳性表达率均升高(χ2值分别为47.03、36.69、71.09,均P<0.001);子宫颈癌组织S100A9表达与MMP-9、VEGF表达均呈正相关(r值分别为0.619、0.784,均P<0.001)。TC方案化疗有效率为47.06%(56/119)。有效组子宫颈癌组织S100A9阳性表达率较无效组高[98.21%(55/56)比84.13%(53/63),P<0.05],而MMP-9[35.71%(20/56)比73.02%(46/63)]、VEGF[67.86%(38/56)比88.89%(56/63)]阳性表达率均较无效组低(均P<0.001)。多因素logistic回归分析显示,临床分期Ⅳ期(OR=2.707,95%CI 1.865~4.119,P<0.05)、淋巴结转移(OR=4.468,95%CI 3.221~5.823,P<0.001)、深肌层浸润(OR=5.686,95%CI 4.308~7.247,P<0.001)、脉管瘤栓或子宫旁浸润(OR=3.758,95%CI 2.584~5.163,P<0.001)、癌组织MMP-9阳性表达(OR=3.904,95%CI 2.876~5.228,P<0.001)、癌组织VEGF阳性表达(OR=2.609,95%CI 1.793~4.052,P<0.05)均是TC方案化疗效果的独立危险因素,而癌组织S100A9阳性表达是TC方案化疗效果的独立保护因素(OR=0.660,95%CI 0.417~0.854,P<0.05)。结论子宫颈癌组织中S100A9表达升高,且与MMP-9、VEGF表达相关。S100A9高表达可提高子宫颈癌患者TC方案化疗的有效性,而临床分期Ⅳ期、淋巴结转移、深肌层浸润、脉管瘤栓或子宫旁浸润、MMP-9阳性表达、VEGF阳性表达可能增加患者TC方案化疗无效的风险。

关键词：子宫颈肿瘤钙结合蛋白质类药物疗法治疗结果

衰老标记蛋白30高表达对紫外线诱导人晶状体上皮细胞凋亡的影响

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中华眼科杂志 2017年第11期53卷 835-841页

作者：滕贺黄亮瑜田芳东莉洁张红天津医科大学眼科医院天津医科大学眼视光学院天津医科大学眼科研究所 300384

目的探讨衰老标记蛋白30（SMP-30）高表达对于紫外线B（UVB）诱导人晶状体上皮细胞凋亡的影响.方法实验研究.以人晶状体上皮细胞系（HLE-B3）为模型,构建真核质粒pRFP-N1-SMP-30,利用脂质体转染的方法将其导入不同分组的细胞中,并以UV... 详细信息

目的探讨衰老标记蛋白30（SMP-30）高表达对于紫外线B（UVB）诱导人晶状体上皮细胞凋亡的影响.方法实验研究.以人晶状体上皮细胞系（HLE-B3）为模型,构建真核质粒pRFP-N1-SMP-30,利用脂质体转染的方法将其导入不同分组的细胞中,并以UVB刺激,用MTT法检测高表达的SMP-30对UVB诱导的HLE-B3细胞生存力的影响;利用细胞凋亡检测试剂盒测定高表达的SMP-30对UVB诱导的HLE-B3细胞凋亡的作用;并用免疫印迹法验证高表达的SMP-30对UVB诱导的凋亡相关蛋白表达的影响,通过活性氧自由基水平的检测分析高表达的SMP-30对UVB诱导的HLE-B3细胞活性氧表达的作用.数据的分析选择方差分析联合Dunnett的统计学方法.结果DNA测序证实插入的序列正确,证明pRFP-N1-SMP-30质粒构建成功.UVB照射后SMP-30高表达组HLE-B3细胞生存率为0.90±0.14,细胞的凋亡率为0.43±0.06,活性氧的水平0.52±0.02,与对照组相比差异均有统计学意义（t=5.830,9.934,12.19;P〈0.05）.UVB处理后,SMP-30高表达可显著下调Bax和cleav-caspase-3的表达,同时上调Bcl-2和Pro-caspase-3的表达.结论高表达的SMP-30通过调控凋亡相关蛋白的表达及抑制活性氧的产生来缓解UVB照射导致的人晶状体上皮细胞的凋亡,从而发挥对晶状体上皮细胞的保护作用.

关键词：晶体上皮细胞细胞凋亡钙结合蛋白质类胞间信号肽类和蛋白质类紫外线氧化性应激

圆锥角膜基质细胞端粒长度与衰老相关标记物的变化

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中华眼科杂志 2009年第8期45卷 724-729页

作者：王佼佼李绍伟王宜强王晔钟文贤臧新杰山东省眼科研究所青岛266071 上海爱尔眼科医院

目的探讨圆锥角膜基质细胞内端粒长度的变化和圆锥角膜基质内衰老相关B-半乳糖苷酶与衰老标记蛋白30（SMP-30）的表达，以及其在圆锥角膜发生发展中的临床意义。方法实验研究。收集2006年1月至12月间于山东省眼科研究所青岛眼科医院接... 详细信息

目的探讨圆锥角膜基质细胞内端粒长度的变化和圆锥角膜基质内衰老相关B-半乳糖苷酶与衰老标记蛋白30（SMP-30）的表达，以及其在圆锥角膜发生发展中的临床意义。方法实验研究。收集2006年1月至12月间于山东省眼科研究所青岛眼科医院接受角膜移植治疗的圆锥角膜患者（32例）的病变角膜37份、来源于眼库的正常角膜20份。所收集圆锥角膜患者年龄范围13—34岁，平均（19±5）岁；正常角膜供体年龄范围9～25岁，平均（19±4）岁。采用Southern印迹杂交检测圆锥角膜和正常角膜基质细胞的端粒长度。以5-溴±氯-3-吲哚-β—D-半乳糖苷原位染色法染色圆锥角膜和正常角膜基质中的衰老相关B-半乳糖苷酶，应用逆转录PCR分别检测圆锥角膜和正常角膜基质中的SMP-30。同时对圆锥角膜和正常角膜基质进行组织病理学观察。应用t检验进行统计处理。结果圆锥角膜基质细胞的端粒长度为10．29—14．12kb，平均端粒长度为（11．54±1．41）kb；正常角膜基质细胞的端粒长度为12．64～15．32kb，平均端粒长度为（13．45±0．99）kb；统计学分析显示两者比较差异有统计学意义（t=4．753，P〈0．05）。组织化学染色显示圆锥角膜基质内X—Gal染色可见散在分布蓝色阳性着色，表明存在衰老相关β-半乳糖苷酶的表达；而正常角膜基质中X—Gal染色阴性，未见衰老相关-β-半乳糖苷酶表达。RT—PCR检测结果显示圆锥角膜与正常角膜中均无SMP-30蛋白的表达。组织学病理学观察显示正常角膜基质纤维排列规则紧密，角膜细胞规则地分布在基质中。而圆锥角膜基质胶原纤维排列呈现疏松不规则，细胞分布较前者散乱且数量减少。结论与正常角膜基质相比，圆锥角膜基质细胞的端粒长度有所缩短，基质中衰老相关β-半乳糖苷酶表达增加。圆锥角膜可能是-种与组织异常老化有关的疾病。

关键词：圆锥角膜端粒钙结合蛋白质类细胞内信号肽和蛋白质类衰老

S100A8/A9蛋白与牙周炎症性疾病关系的研究进展

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中华口腔医学杂志 2020年第9期55卷 679-684页

作者：郜洪宇孟焕新侯建霞北京大学口腔医学院·口腔医院牙周科国家口腔疾病临床医学研究中心口腔数字化医疗技术和材料国家工程实验室口腔数字医学北京市重点实验室100081 天津医科大学口腔医院牙周科 300070

S100A8/A9蛋白是由S100A8与S100A9蛋白组成的异二聚体,属于钙结合蛋白S100家族,是中性粒细胞的主要胞质蛋白,在免疫炎症反应中发挥多种胞内、胞外的生物学功能。近年研究发现,S100A8/A9与牙周炎症性疾病的发生发展关系密切。S100A8/A9... 详细信息

S100A8/A9蛋白是由S100A8与S100A9蛋白组成的异二聚体,属于钙结合蛋白S100家族,是中性粒细胞的主要胞质蛋白,在免疫炎症反应中发挥多种胞内、胞外的生物学功能。近年研究发现,S100A8/A9与牙周炎症性疾病的发生发展关系密切。S100A8/A9在诊断牙周炎症性疾病、监测牙周炎症活动性、评价牙周治疗效果以及预测牙周炎易感性等方面有望成为新的生物标志物。本文就S100A8/A9蛋白与牙周炎症性疾病关系的临床研究进展作一文献综述。

关键词：钙结合蛋白质类钙粒蛋白A 钙粒蛋白B 牙周炎牙龈炎

Citrin缺陷导致的新生儿肝内胆汁淤积症SLC25A13基因三个新突变的识别及诊断

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中华儿科杂志 2008年第6期46卷 411-415页

作者：宋元宗盛建胜牛飼美晴胡務亮张春花小林圭子日本鹿儿岛大学医齿総学合研究科分子病熊生化学教研室 890-8544 暨南大学附属第一医院儿科广州510630 台湾大学医学院附设医院小儿部暨基因医学部日本松本国际生命科学研究所

目的探讨中国citrin缺陷导致的新生儿肝内胆汁淤积症(NICCD)SLC25A13基因的新突变类型,并建立其分子诊断方法.方法从分别来自中国台湾、广东和河北三省的3例NICCD患者的血样中提取基因组DNA标本,对SLC25A13基因的18个外显子及其侧翼序... 详细信息

目的探讨中国citrin缺陷导致的新生儿肝内胆汁淤积症(NICCD)SLC25A13基因的新突变类型,并建立其分子诊断方法.方法从分别来自中国台湾、广东和河北三省的3例NICCD患者的血样中提取基因组DNA标本,对SLC25A13基因的18个外显子及其侧翼序列进行直接测序,以寻找新的突变类型.新突变的PCR扩增片段用相应的限制性内切酶消化后再进行琼脂糖凝胶电泳.结果在3例NICCD患儿的SLC25A13基因中分别发现了3个新突变,即剪接异常突变IVS7-2A>G.错义突变A541D和无义突变R319X.上述突变的PCR扩增片段分别用限制性内切酶MspI,Hpyl88 I和Taq I消化后,琼脂糖凝胶电泳均得到了分离清晰的突变特异性条带.结论从中国的NICCD患者中发现了SLC25A13基因的3个新突变,并建立了相应的PCR-RFLP诊断方法.

关键词： Citrin 钙结合蛋白质类突变胆汁淤积,肝内

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小儿胆汁淤积性肝病的病因学特征

中华儿科杂志 2009年第8期47卷 624-627页

作者：宋元宗牛飼美晴小林圭子佐伯武赖暨南大学附属第一医院儿科广州510630 日本鹿儿岛大学医齿学総合研究科分子病態生化学教研室日本德岛文理大学健康科学研究所

目的研究胆汁淤积性肝病（CLD）患儿的主要病因学特征，并探讨SLC25A13基因突变类型在CLD的分子流行病学分布。方法2003年10月至2009年3月问我科诊治的CLD患儿63例，其中男36例，女27例。采用临床横断面研究，收集整理研究对象的临床资... 详细信息

目的研究胆汁淤积性肝病（CLD）患儿的主要病因学特征，并探讨SLC25A13基因突变类型在CLD的分子流行病学分布。方法2003年10月至2009年3月问我科诊治的CLD患儿63例，其中男36例，女27例。采用临床横断面研究，收集整理研究对象的临床资料，分析总结其病因及临床转归；应用课题组已建立方法常规筛查SLC25A13基因的13～17种突变类型；在部分患儿中通过基因组DNA直接测序寻找SLC25A13基因突变。结果63例CLD患儿中有24例病因不明，另外39例病因明确。在已明确的CLD病因中，遗传代谢病居首位，包括citrin缺陷导致的新生儿肝内胆汁淤积症（NICCD）、暂时性半乳糖血症、酪氨酸血症Ⅰ型、半乳糖激酶缺陷病、鸟氨酸氨甲酰基转移酶缺陷病和糖原累积病Ⅰ型等6种疾病共27例患儿，其中NICCD 21例；其次是获得性因素，包括全胃肠道外营养相关胆汁淤积症、巨细胞病毒肝炎和先天性梅毒共7例；再次为先天性胆道畸形，包括胆道闭锁、Caroli病和胆囊息肉共5例。55例随访CLD患儿中有10例已夭折，其余45例临床改善或痊愈。44例CLD患儿接受了SLC25A13突变分析，其中来自20个家庭（共40个等位基因）的21例患儿被发现携带基因突变。检测到的7种突变类型分别为851—854del（23／40），IVS6＋5G〉A（6／40），IVS16ins3kb（3／40），1638—1660dup（2／40），A541D（1／40），R319X（1／40）和G333D（1／40），还有3个等位基因中的新突变有待识别（3／40）。结论虽部分CLD患儿病因不能明确，但遗传代谢病，尤其是NICCD，是CLD的常见病因。少数CLD患儿预后不良，但大部分患儿可获临床改善甚至痊愈。本组检测到SLC25A13基因突变类型7种，其中前4位最常见者依次是851—854del，IVS6＋5G〉A，IVS16ins3kb和1638—1660dup。

关键词：胆汁淤积,肝内线粒膜转运蛋白质类突变钙结合蛋白质类有机阴离子转运子

卵巢上皮性癌组织中Jagged1 mRNA的表达及沉默Jagged1基因的表达对裸鼠移植瘤生长的影响

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中华妇产科杂志 2016年第6期51卷 448-453页

作者：刘国燕郜智慧李力宋亭亭盛修贵河南省新乡市中心医院妇瘤科 453000 山东省肿瘤医院妇瘤科

目的：探讨Notch基因的配体——Jagged1 mRNA在卵巢上皮性癌（卵巢癌）组织中的表达及沉默Jagged1基因的表达对卵巢癌裸鼠移植瘤生长的影响。方法（1）收集2011年2月至2014年3月在河南省新乡市中心医院行手术治疗的48例卵巢癌及30例良... 详细信息

目的：探讨Notch基因的配体——Jagged1 mRNA在卵巢上皮性癌（卵巢癌）组织中的表达及沉默Jagged1基因的表达对卵巢癌裸鼠移植瘤生长的影响。方法（1）收集2011年2月至2014年3月在河南省新乡市中心医院行手术治疗的48例卵巢癌及30例良性卵巢上皮性肿瘤患者的存档组织标本，采用实时荧光定量逆转录（RT）-PCR技术检测肿瘤组织中Jagged1、Notch受体——Notch1及其下游靶基因Hes1、Hey1 mRNA的表达。（2）培养卵巢浆液性囊腺癌细胞系SKOV3细胞接种于裸鼠腋窝皮下，构建卵巢癌裸鼠移植瘤模型，随机将裸鼠分为3组，Jagged1干扰组、空载体组和对照组，每组10只裸鼠，分别转染重组载体pcDNA3.1（＋）-siRNA-Jagged1质粒（特异性沉默Jagged1基因的表达）、空载体pDC3.1质粒和磷酸盐缓冲液。转染结束后14 d，测量3组裸鼠移植瘤体积和瘤体质量，计算抑瘤率；采用实时荧光定量RT-PCR技术和蛋白印迹（western blot）法分别检测裸鼠移植瘤组织中Jagged1、Notch1、Hes1和Hey1 mRNA和蛋白的表达。结果（1）实时荧光定量RT-PCR技术检测显示，卵巢癌组织中Jagged1、Notch1、Hes1和Hey1 mRNA的表达水平均高于良性卵巢上皮性肿瘤组织，分别比较，差异均有统计学意义（P〈0.01）。（2）转染结束后14 d，Jagged1干扰组裸鼠的移植瘤体积和瘤体质量分别为（491±68）mm3和（2.6±0.4）g，均明显小于空载体组[分别为（842±88）mm3和（4.4±0.8）g]和对照组[分别为（851±90）mm3和（4.5±0.9）g；P〈0.05]；Jagged1干扰组裸鼠的抑瘤率为42.2%，显著高于空载体组和对照组（分别为2.2%、0；P〈0.05）；Jagged1干扰组裸鼠移植瘤组织中Jagged1、Hes1和Hey1 mRNA和蛋白的表达水平均明显低于空载体组和对照组（P〈0.05），而3组间Notch1 mRNA和蛋白的表达水平无明显差异（P〉0.05）。结论 Jagged1 mRNA在卵巢癌组织中呈高表达；特异性沉默Jagged1基因的表达后，可抑制裸鼠移植瘤的生长，这可能是通过抑制Notch1信号通路而发挥抑癌作用。

关键词：卵巢肿瘤钙结合蛋白质类膜蛋白质类胞间信号肽类和蛋白质类 RNA干扰肿瘤,实验性