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无血清处理对甲状腺癌TT细胞内S100A13及FGF-1释放机制的初步研究

中华内分泌代谢杂志 2011年第11期27卷 941-944页

作者：杨井金文芳曹仁贤钟警文格波南华大学附属第一医院内分泌科衡阳421001

目的探讨无血清处理人甲状腺髓样癌细胞（TY细胞）内S100A13及成纤维细胞生长因子1（FGF—1）蛋白释放的机制，初步阐明Ca^2＋在S100A13及FGF-1蛋白释放过程中的作用。方法Western印迹检测无血清处理TT细胞S100A13及FGF-1蛋白表达；ELIS... 详细信息

目的探讨无血清处理人甲状腺髓样癌细胞（TY细胞）内S100A13及成纤维细胞生长因子1（FGF—1）蛋白释放的机制，初步阐明Ca^2＋在S100A13及FGF-1蛋白释放过程中的作用。方法Western印迹检测无血清处理TT细胞S100A13及FGF-1蛋白表达；ELISA检测培养上清液FGF—1蛋白浓度；激光共聚焦显微镜实时动态检测无血清处理TT细胞1h内Ca^2＋浓度（[Ca2^＋]i）变化；间接免疫荧光观察TT细胞内S100A13及FGF-1蛋白荧光分布。结果无血清处理111细胞4h和6h后S100A13及FGF-1蛋白表达降低（P〈0．05或P〈0．01），而TT细胞培养上清液中FGF-1蛋白浓度升高（P〈0．05或P〈0．01）。激光共聚焦Ca^2＋荧光显像发现无血清处理TT细胞23min内[Ca^2＋]i保持相对稳定，23min后[Ca^2＋]i迅速上升达到峰值1．6μmol／L，第40min后下降至一个较低水平，第40min至第60min[Ca^2＋]i接近0．3—0．6μmol／L。1h内TT细胞平均[Ca^2＋]i明显高于正常培养组、EGTA组和BAPTA—AM组。加入钙离子螯合剂EGTA组和BAPTA—AM组TT细胞内的S100A13、FGF-1蛋白表达无明显下降。结论无血清处理诱导，TT细胞内S100A13及FGF-1蛋白的释放与[Ca^2＋]i变化有关；Ca^2＋螯合剂EGTA、BAPTA—AM能有效拮抗无血清处理引起的TT细胞[CA^2＋]i升高，并抑制S100A13及FGF-1蛋白的释放。

关键词：无血清处理 S100A13 成纤维细胞生长因子1 [Ca^2+]浓度钙离子螯合剂

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Ca^(2+)/calpain信号调控纤连蛋白诱导的MCF-10A乳腺上皮细胞-间质转化的作用

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中国医院药学杂志 2018年第6期38卷 599-603页

作者：陈林洪端阳陈宗跃潘迪付凌云王婧樊双琴沈祥春陈妍贵州医科大学贵州贵阳550025 贵州省高等学校天然药物药理与成药性评价重点实验室贵州贵阳550025

目的:观察Ca^(2+)/calpain信号通路在纤连蛋白(FN)诱导MCF-10A乳腺上皮细胞-间质转化(EMT)中的作用。方法:以正常培养MCF-10A乳腺上皮细胞为实验对象。采用比色法检测细胞内Ca^(2+)浓度;采用荧光分光光度法检测钙蛋白酶-2(calpain-2)活... 详细信息

目的:观察Ca^(2+)/calpain信号通路在纤连蛋白(FN)诱导MCF-10A乳腺上皮细胞-间质转化(EMT)中的作用。方法:以正常培养MCF-10A乳腺上皮细胞为实验对象。采用比色法检测细胞内Ca^(2+)浓度;采用荧光分光光度法检测钙蛋白酶-2(calpain-2)活性;Western blot法检测calpain-2、波形蛋白(vimentin)、E-钙黏着蛋白(E-cadherin)的表达;采用划痕修复实验检测细胞迁移能力;Transwell小室实验检测细胞侵袭能力。结果:FN诱导MCF-10A细胞中Ca^(2+)浓度、calpain-2活性表达明显升高,上调vimentin、calpain-2蛋白表达,下调E-cadherin蛋白水平;FN诱导MCF-10A细胞迁移和侵袭能力显著增强。钙离子螯合剂(BAPTA-AM)和氨氯地平(amlodipine)均能显著抑制FN诱导的细胞Ca^(2+)浓度、calpain-2活性及表达升高;抑制vimentin蛋白表达上调及E-cadherin蛋白表达下调;抑制FN诱导MCF-10A细胞迁移和侵袭能力增强。结论:BAPTA-AM和Amlodipine均能够抑制FN诱导的上皮间质转化。FN能够诱导MCF-10A乳腺上皮细胞发生EMT,可能与Ca^(2+)/calpain信号通路激活有关。

关键词：钙离子螯合剂氨氯地平 MCF-10A乳腺上皮细胞纤连蛋白上皮间质转化

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Ca^(2+)螯合剂对三尖杉酯碱诱导HL60细胞凋亡的影响

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安徽医科大学学报 1998年第6期33卷 427-429页

作者：夏瑞祥林果为励雁峰钱耕荪上海医科大学华山医院血液科安徽医科大学第一附属医院血液科上海市肿瘤研究所

目的了解细胞内Ｃａ２＋在三尖杉酯碱诱导ＨＬ６０细胞凋亡中的作用。方法以三尖杉酯碱单独或与Ｃａ２＋螯合剂ＥＧＴＡ共同处理ＨＬ６０细胞后，用流式细胞仪和ＤＮＡ凝胶电泳检测细胞凋亡的发生。结果Ｃａ２＋螯合剂ＥＧＴＡ抑制了细... 详细信息

目的了解细胞内Ｃａ２＋在三尖杉酯碱诱导ＨＬ６０细胞凋亡中的作用。方法以三尖杉酯碱单独或与Ｃａ２＋螯合剂ＥＧＴＡ共同处理ＨＬ６０细胞后，用流式细胞仪和ＤＮＡ凝胶电泳检测细胞凋亡的发生。结果Ｃａ２＋螯合剂ＥＧＴＡ抑制了细胞凋亡。

关键词：细胞凋亡钙离子螯合剂三尖杉碱酯 HL60 白血病

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螯合白血病患者骨髓细胞内外钙离子对硫化氢生成影响的实验研究相关检索词免疫组化蛋白表达白血病硫化细胞增殖 cell proliferation bax h2s 骨髓胃癌硫化氢细胞周期 bcl-2 间充质干细胞图像分析单个核细胞电极乳腺癌钙离子 leukemia 相关专家李杰张旻李艳平葛楚天相关机构 · 中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所 · 中国科学院上海生命科学研究院 · 北京师范大学 · 浙江大学动物科学学院 · 浙江大学螯合白血病患者骨髓细胞内外钙离子对硫化氢生成影响的实验研究

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潍坊医学院学报 2011年第3期33卷 161-164页

作者：孙晓红于志刚张雪莉庄宝祥张圣明潍坊医学院组织胚胎学教研室山东潍坊261053 潍坊医学院附属潍坊市人民医院血液病科潍坊医学院形态学实验室

目的观察钙离子螯合剂对白血病患者骨髓单个核细胞（BMMNC）生成硫化氢（H2S）的影响.方法采用BAPTA-AM和EGTA螯合细胞内外的钙离子,用敏感硫电极检测细胞外硫离子,计算出H2S含量的变化;免疫组化方法和图像分析系统检测bcl-2,bax的表... 详细信息

目的观察钙离子螯合剂对白血病患者骨髓单个核细胞（BMMNC）生成硫化氢（H2S）的影响.方法采用BAPTA-AM和EGTA螯合细胞内外的钙离子,用敏感硫电极检测细胞外硫离子,计算出H2S含量的变化;免疫组化方法和图像分析系统检测bcl-2,bax的表达变化.结果 BAPTA-AM和EGTA各实验组与对照组比较,H2S生成量均明显降低（P〈0.05）.免疫组化结果显示,bcl-2和bax均表达于细胞浆和胞膜上.图像分析光密度值（OD值）,BAPTA-AM和EGTA各实验组bcl-2蛋白表达与对照组比较,12h,24h和48h均高于对照组（P〈0.05）.bax蛋白的表达在BAPTA-AM和EGTA各实验组与对照组相比,12h,24h和48h均低于对照组（P〈0.05）.结论细胞内外钙离子螯合剂均能减少白血病患者BMMNC生成H2S,H2S生成降低在较短时间内可能抑制细胞凋亡,促进细胞增殖.

关键词：钙离子螯合剂白血病细胞凋亡 H2S

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