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日龄、钙和1,25-（OH）2-D3对肉鸡生长性能、骨骼发育及小肠钙转运蛋白基因表达的影响

日龄、钙和1,25-（OH）2-D3对肉鸡生长性能、骨骼发育及小肠钙转...

引用

作者：汪晓娜河南农业大学

学位级别：硕士

调节家禽肠道钙吸收的营养物质是维生素D。目前,我国农业农村部已经批准维生素D3和25-羟基维生素D3（25-OH-D3）作为维生素D饲料添加剂在家禽饲料中使用。维生素D最终活性产物是1,25-二羟基维生素D3（1,25-（OH）2-D3）。1,25-（OH）2-D... 详细信息

调节家禽肠道钙吸收的营养物质是维生素D。目前,我国农业农村部已经批准维生素D3和25-羟基维生素D3（25-OH-D3）作为维生素D饲料添加剂在家禽饲料中使用。维生素D最终活性产物是1,25-二羟基维生素D3（1,25-（OH）2-D3）。1,25-（OH）2-D3通过血液进入肠道上皮细胞,与维生素D受体（VDR）结合,调节钙转运蛋白基因表达,促进肠道钙吸收。家禽小肠上皮细胞顶膜钙离子通道蛋白TRPV6、细胞中钙结合蛋白CaBP-D28k、基底膜钙泵蛋白PMCAlb和钠钙交换蛋白NCX1为钙转运蛋白。肉鸡日龄、饲粮钙和1,25-（OH）2-D3水平对肉鸡小肠中钙转运蛋白基因表达的影响尚不明确。因此,本实验旨在研究不同日龄、饲粮钙水平和1,25-（OH）2-D3水平对肉鸡小肠道钙转运蛋白基因表达的影响,为促进肉鸡小肠钙吸收、改善钙的利用率、增强肉鸡骨骼质量提供理论依据。试验一、日龄对肉鸡生长、骨骼发育及小肠钙转运蛋白基因表达的影响试验研究不同日龄对肉鸡体重、骨骼生长及十二指肠钙结合蛋白（CaBP-D28k）、钙离子转运ATP酶B1（PMCAlb）、细胞核维生素D受体（nVDR）、细胞膜维生素D受体（mVDR）等钙转运蛋白基因表达的影响。将1日龄罗斯308肉鸡公雏96只随机分为8个重复,每个重复12只鸡。给肉鸡饲喂常规营养水平饲粮。在14、21、28、35、42日龄时,分别从每个重复中随机取出1只,空腹12小时后屠宰。刮取十二指肠黏膜,利用荧光定量qRT-PCR技术,分析钙转运蛋白基因的表达水平。结果显示:（1）14～42日龄时,肉鸡体重随日龄增加而线性提高（P＜0.001）;（2）14～42日龄时,肉鸡股骨重量、长度、直径、灰分重量随日龄增加线性增加（P＜0.001）,但股骨灰分含量、钙含量、磷含量随日龄增加而线性降低（P＜0.001）;胫骨生长呈现类似趋势;（3）14～42日龄肉鸡小肠钙吸收关键基因CaBP-D28k、PMCAlb、nVDR、mVDR mRNA表达水平随日龄增加呈现先升高后降低的趋势,在28日龄达到最高峰;但CaBP-D28k mRNA表达水平在各日龄间差异不显著。结果表明:尽管14～42日龄肉鸡体重、股骨与胫骨重量、灰分重量线性增加;但股骨与胫骨灰分含量线性降低;而CaBP-D28k、PMCAlb、nVDR、mVDR等钙吸收关键基因表达水平呈现先升高后降低的趋势,在28日龄达到最高峰。研究提示:肉鸡小肠钙吸收能力随日龄而改变。试验二、不同钙水平对肉鸡生长性能、骨骼发育和钙转运蛋白基因表达的影响为研究不同钙水平对肉鸡生长、骨骼发育及钙转运蛋白基因表达的影响,试验设计5种钙水平的饲粮,钙水平分别为0.50%、0.70%、0.90%、1.10%和1.30%。其中0.90%为对照。所有饲料中均含有0.45%非植酸磷（NPP）。以维生素D3作为维生素D添加剂,添加量为1000 IU/kg。将350只1日龄罗斯308肉鸡公雏随机分为5个处理,每个处理5个重复,每个重复14只。饲养至18日龄时从每个重复中随机取出2只（每个处理中随机取出10只）,空腹12小时后称重,屠宰取股骨和胫骨样品,并刮取十二指肠、空肠和回肠黏膜样品,利用荧光定量qRT-PCR技术,分析小肠CaBP-D28k、PMCAlb、NCX1、nVDR和mVDR基因表达水平。结果显示:（1）不同饲粮钙水平对罗斯308肉公鸡的平均体增重、采食量和料重比没有显著的影响（P＞0.05）;（2）饲粮钙水平增加后,显著提高股骨和胫骨灰分重量、灰分含量、钙含量和磷含量（P＜0.05）;（3）饲粮钙水平由0.50%提高1.30%后,十二指肠钙吸收相关蛋白CaBP-D28k、PMCA1b、NCX1、nVDR和mVDR的基因表达量显著降低（P＜0.05）;其中,0.90%钙组肉鸡十二指肠CaBP-D28k和PMCA1b mRNA表达水平显著低于0.50%钙组（P＜0.05）,0.90%-1.30%Ca 组间 CaBP-D28k和 PMCA1b mRNA 表达水平没有显著差异（P＞0.05）;1.10%Ca组nVDR和mVDR mRNA表达水平显著低于0.50%钙组（P＜0.05）,0.90%钙组nVDR和mVDR mRNA表达水平与其他钙水平组间没有显著差异（P＞0.05）;（4）空肠和回肠中钙转运蛋白基因表达呈现与十二指肠类似的趋势。结果表明:在饲粮磷水平正常情况下,提高饲粮钙水平会降低肉鸡小肠钙转运蛋白基因表达,以避免过多的钙在小肠吸收。试验三、1,25-（0H）2-D3不平对肉鸡生长、骨骼发育和小肠钙转运蛋白基因表达的影响试验旨在探究饲粮中不同1,25-（OH）2-D3水平对肉鸡生长和钙转运蛋白基因表达的影响。试验在肉鸡基础饲粮（不含维生素D）中添加1,25-（OH）2-D

关键词：肉鸡小肠钙吸收相关基因 1,25-(OH)2-D3

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