检索结果-南通市图书馆

南京农业大学学报 2024年

作者：刘鑫欢张纹纹程子龙金前跃郭志睿郭大伟龙云凤杨蕾蕾刘茂军白娟李文良南京农业大学动物医学院江苏省农业科学院兽医研究所/农业部兽用生物制品工程技术重点实验室/江苏省食品质量安全重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地兽用生物制品(泰州)国泰技术创新中心河南省农业科学院动物疫病防控研究所南京医科大学附属第二医院南京海关动植物与食品检测中心

[目的]本研究使用金-银纳米颗粒标记纯化的牛病毒性腹泻病毒1型（BVDV-1）重组E2蛋白，建立基于金-银纳米颗粒的E2蛋白抗体侧流免疫层析检测方法。[方法]通过对金-银纳米颗粒标记条件进行优化，选取2 mg·mL-1的金黄色葡萄球菌A蛋白（St... 详细信息

[目的]本研究使用金-银纳米颗粒标记纯化的牛病毒性腹泻病毒1型（BVDV-1）重组E2蛋白，建立基于金-银纳米颗粒的E2蛋白抗体侧流免疫层析检测方法。[方法]通过对金-银纳米颗粒标记条件进行优化，选取2 mg·mL-1的金黄色葡萄球菌A蛋白（Staphylococal Protein A，SPA）和，BVDV-1 单克隆抗体1E2B3包被于硝酸纤维膜（NC膜）上，分别作为检测线（Test line，T线）和质控线（Control line，C线），对反应条件进行优化，建立侧流免疫层析检测方法。[结果]金-银纳米颗粒最佳标记条件为：以pH=7.4的硼酸-硼砂缓冲液作为金-银纳米颗粒的溶剂；最佳标记蛋白浓度为10 μg·mL-1。进而优化侧流免疫层析检测方法的反应条件为：2 mg·mL-1的SPA作为T线；0.6 mg·mL-1的mAb-1E2B3作为C线；待检血清作用浓度为1：50。特异性实验结果表明建立的金-银纳米颗粒免疫层析试纸条不与猪瘟病毒（CSFV）、牛病毒性腹泻病毒2型（BVDV-2）、牛副流感病毒3型（BPIV3）、传染性牛鼻气管炎病毒（IBRV）、口蹄疫病毒（FMDV）、牛支原体和布鲁氏菌阳性血清发生交叉反应。敏感性试验结果显示，将BVDV阳性血清（中和抗体效价为1:2048）稀释512倍时金-银纳米颗粒免疫层析试纸条仍可检出。使用金-银纳米颗粒试免疫层析纸条检测125份牛血清，并与中和试验结果比较。两者阴性血清符合率为100%，阳性血清符合率为96.04%，总体符合率为96.80%。[结论]实验表明基于金-银纳米颗粒的免疫层析抗体检测方法具有特异性好、灵敏度高、操作简便快捷的特点，为临床一线简便快速地检测BVDV-1抗体提供了有力的支撑。

关键词：牛病毒性腹泻病毒 E2蛋白抗体金-银纳米颗粒侧流免疫层析方法

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