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金樱根总黄酮提取工艺优选

中国实验方剂学杂志 2012年第3期18卷 13-15页

作者：赖红芳韦瑞松黄秀香河池学院化学与生命科学系广西宜州546300

目的:优选金樱根总黄酮的最佳提取工艺。方法:用正交试验法对金樱根总黄酮的半仿生法提取工艺进行优选。考察提取温度、提取时间、料液比对总黄酮提取率的影响,采用分光光度法,在505 nm测定金樱根总黄酮的含量。结果:最佳工艺为分别以pH... 详细信息

目的:优选金樱根总黄酮的最佳提取工艺。方法:用正交试验法对金樱根总黄酮的半仿生法提取工艺进行优选。考察提取温度、提取时间、料液比对总黄酮提取率的影响,采用分光光度法,在505 nm测定金樱根总黄酮的含量。结果:最佳工艺为分别以pH 2,7.5,8.3的磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲溶液作为提取液,固液比1∶20,恒温水浴温度60℃,提取时间20min,总黄酮提取率达到9.67%,RSD 1.52%,加样回收率为97.10%。结论:半仿生法提取金樱根总黄酮明显优于乙醇回流法。

关键词：金樱根总黄酮半仿生法正交试验提取工艺

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金樱根多糖的制备及其体内抗肿瘤作用初探

中国实验方剂学杂志 2011年第6期17卷 209-212页

作者：冯承恩田素英广东药学院中山校区实验中心广东中山528458

目的:从金樱根中分离提取金樱根多糖,并探索其抗肿瘤活性。方法:水提醇沉法提取,Sevag法除蛋白,大孔树脂脱色后获得金樱根多糖粗品。建立小鼠S180肉瘤腹水瘤模型,并将小鼠随机分为4组:生理盐水组(阴性对照组)、金樱根多糖低、中、高剂量... 详细信息

目的:从金樱根中分离提取金樱根多糖,并探索其抗肿瘤活性。方法:水提醇沉法提取,Sevag法除蛋白,大孔树脂脱色后获得金樱根多糖粗品。建立小鼠S180肉瘤腹水瘤模型,并将小鼠随机分为4组:生理盐水组(阴性对照组)、金樱根多糖低、中、高剂量组(50,100,200 mg·kg-1)。建立移植实体瘤模型,将小鼠随机分为8组:生理盐水组(阴性对照组)、阳性对照5-Fu(5-氟脲嘧啶)组(20 mg·kg-1)、金樱根多糖低、中、高剂量组(50,100,200 mg·kg-1)、金樱根多糖各剂量组+5-Fu组。腹腔注射给药结束后处死小鼠,计算各用药组抑瘤率、生命延长率和白细胞数、胸腺指数、脾指数,并用EILSA法测定荷瘤小鼠血清中IL-2(白细胞介素-2)、TNF-α(肿瘤坏死因子-α)水平。结果:制备得到金樱根多糖粗品含糖量为85.43%。金樱根多糖50,100,200 mg·kg-1剂量组荷瘤小鼠生命延长率分别为3.07%±2.35%,10.11%±4.32%,34.3%±8.31%,与对照组相比,仅高剂量组有统计学意义(P金樱根多糖低、中、高剂量组与5-Fu组(20 mg·kg-1)合用抑瘤率分别为62.74%±4.35%,67.92%±3.24%,78.79%±6.23%,明显优于单用5-Fu(P金樱根多糖单用不能有效抑制小鼠S180肉瘤生长,但与5-Fu合用有明显的增效减毒作用。

关键词：金樱根多糖抗肿瘤 S180肉瘤

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金樱根化学成分的研究

广西植物 2017年第2期37卷 255-259页

作者：丁阳黄永林刘金磊王磊颜小捷李典鹏广西植物功能物质研究与利用重点实验室广西壮族自治区中国科学院广西植物研究所广西桂林541006 广西中医药大学南宁530001

金樱根为三金片的主要成分,但目前对于金樱根的化学成分和药理作用研究甚少。为了阐明金樱根的物质基础和生物活性,该研究采用硅胶、Sephadex LH-20、MCI gel CHP 20P等柱色谱以及HPLC半制备等方法,对金樱根(Rosa laevigata)的化学成分... 详细信息

金樱根为三金片的主要成分,但目前对于金樱根的化学成分和药理作用研究甚少。为了阐明金樱根的物质基础和生物活性,该研究采用硅胶、Sephadex LH-20、MCI gel CHP 20P等柱色谱以及HPLC半制备等方法,对金樱根(Rosa laevigata)的化学成分进行研究。结果表明:从中共分离得到9个化合物,经过波谱数据分析结合文献对照分别鉴定为儿茶素(1),表儿茶素(2),rosamultin(3),sericoside(4),2α,3α,19α,23-tetrahydroxy-urs-12-en-28-oic acid-3-O-β-D-glucopyranosyl ester(5),kaji-ichigoside F1(6),β-D-Glucopyranosyl 3β,19α-dihydroxy-2-oxo-urs-12-en-28-oate(7),胡萝卜苷(8),β-谷甾醇(9),其中化合物2、4、5、7为首次从该植物中分离得到。该研究结果为金樱根在功能医药领域的开发利用提供了理论依据。

关键词：金樱根化学成分结构鉴定

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金樱根化学成分及质量标准研究

金樱根化学成分及质量标准研究

作者：庄彦广西师范学院

学位级别：硕士

瑶药金樱根为蔷薇科蔷薇属植物金樱子（Rose laevigata Michx）的根皮或根。金樱根入药的历史久远，《中华本草》、《本草纲目》等都有记载，也是广西的大宗中药材。本论文对金樱根化学成分及其含量较高的一种同分异构体进行工艺研究，... 详细信息

瑶药金樱根为蔷薇科蔷薇属植物金樱子（Rose laevigata Michx）的根皮或根。金樱根入药的历史久远，《中华本草》、《本草纲目》等都有记载，也是广西的大宗中药材。本论文对金樱根化学成分及其含量较高的一种同分异构体进行工艺研究，并对其质量标准进行研究，主要分以下三部分。一、本文对70%乙醇的提取物浸膏的正丁醇和乙酸乙酯萃取相进行了一系列的分离。采用聚酰胺柱色谱、硅胶柱色谱、ODS柱色谱、Sephadex LH-20凝胶过滤等分离手段，分离得到12个化合物，同时借助重结晶、TLC和HPLC法辅助鉴定样品纯度。通过ESI-MS、1H-NMR、13C-NMR等波谱鉴定了5个化合物结构。分别为：野蔷薇苷，熊果酸，没食子酸，2α,3α,19α-2,3,19-tridroxyurs-12-en-28-oic acid β-D-glucopyranosyl ester，2α,3β,19α-2,3,19-tridroxyurs-12-en-28-oic acid β-D-glucopyranosyl ester。二、对金樱根含量较多的2α,3α,19α-2,3,19-tridroxyurs-12-en-28-oic acid β-D-glucopyranosyl ester（皂苷D）和2α,3β,19α-2,3,19-tridroxyurs-12-en-28-oic acid β-D-glucopyranosyl ester（皂苷E）同分异构体进行了提取工艺条件优化，用HPLC法得出采用质量分数为70％的乙醇75倍量，超声提取60min为最适提取条件。结果表明：皂苷D含量平均为0.7236%、皂苷E的含量平均为0.8871%。三、金樱根质量标准研究，对金樱根11个产地的药材进行了定性定量研究，通过研究制定了其质量控制标准。

关键词：金樱根化学成分结构鉴定工艺研究质量标准

金樱根中两种皂苷制备工艺优化及其急性肺损伤保护作用的研究

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金樱根中两种皂苷制备工艺优化及其急性肺损伤保护作用的研究

作者：邓巧玉广西中医药大学

学位级别：硕士

目的:金樱根中两种乌苏烷型三萜皂苷刺梨苷和野蔷薇苷具有抗炎、镇痛、拮抗肿瘤化疗药物毒副反应等多种生物活性,具有成为先导化合物的巨大潜能。本论文首先对金樱根3种基原的根、茎、叶、果4个部位的刺梨苷和野蔷薇苷含量进行分析,确... 详细信息

目的:金樱根中两种乌苏烷型三萜皂苷刺梨苷和野蔷薇苷具有抗炎、镇痛、拮抗肿瘤化疗药物毒副反应等多种生物活性,具有成为先导化合物的巨大潜能。本论文首先对金樱根3种基原的根、茎、叶、果4个部位的刺梨苷和野蔷薇苷含量进行分析,确定最佳基原的最佳部位之后,优化提取纯化刺梨苷和野蔷薇苷的工艺,并探索技术中试,应用产业化设备放大制备,从金樱根药材中同时制备高纯度(99.0%以上)刺梨苷和野蔷薇苷,并通过体内实验研究刺梨苷和野蔷薇苷对脂多糖(LPS)所致急性肺损伤小鼠的保护作用,探讨其可能的作用机制,为后续开展刺梨苷和野蔷薇苷系统研究打下坚实基础。方法:1、采用HPLC法建立金樱根3种基原植物小果蔷薇、粉团蔷薇、金樱子的根、茎、叶、果4个不同部位的刺梨苷和野蔷薇苷含量测定方法。2、以刺梨苷和野蔷薇苷含量为评价指标,通过单因素和Box-Behnken响应面法优化工艺,考察乙醇体积分数、提取时间、提取次数、料液比对金樱根中刺梨苷和野蔷薇苷提取效果的影响,优化提取工艺;以刺梨苷和野蔷薇苷吸附率及解析率为评价指标,筛选大孔树脂、上样液质量浓度、吸附时间、上样量,考察洗脱剂(乙醇)体积分数,优化从金樱根中纯化刺梨苷和野蔷薇苷的最佳工艺。3、采用D101大孔树脂、硅胶等柱色谱,结合制备液相等方法对金樱根中的刺梨苷和野蔷薇苷进行中试级分离制备,根据理化性质及波谱数据进行结构鉴定。4、将90只雄性BALB/c小鼠按体质量随机分为正常组、模型组、地塞米松组,刺梨苷高、中、低剂量组,野蔷薇苷高、中、低剂量组,利用脂多糖(LPS)气管滴注建立小鼠急性肺损伤模型。肺组织湿/全身质量比测定肺指数;苏木素-伊红(HE)染色观察肺组织损伤情况;ELISA检测肺组织中炎性因子如肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-6(IL-6)水平的变化;蛋白免疫印迹法(Western blot)测定核转录因子-κB(NF-κB)通路中NF-κB p65,NF-κB抑制蛋白α(IκBα)及磷酸化等蛋白的表达。结果:1、与三种植物根部刺梨苷和野蔷薇苷含量相比,茎、叶、果部位的刺梨苷和野蔷薇苷含量存在统计学差异,茎、叶、果部位之间二者含量则无统计学差异。小果蔷薇、粉团蔷薇、金樱子三者根部位刺梨苷、野蔷薇苷含量分别为10.971、6.895 mg/g,7.208、6.491 mg/g,2.373、3.078 mg/g。小果蔷薇、粉团蔷薇、金樱子三者不同部位的刺梨苷、野蔷薇苷含量结果为:根部位刺梨苷含量10.791～2.373 mg/g,野蔷薇苷含量6.895～3.078 mg/g,平均含量分别为6.851、5.488 mg/g;茎部位刺梨苷含量1.054～0.350 mg/g,野蔷薇苷含量1.259～0.166 mg/g,平均含量分别为0.605、0.672 mg/g;叶部位刺梨苷含量0.698～0.117mg/g,野蔷薇苷含量0.535～0.179 mg/g,平均含量分别为0.337、0.353mg/g;果部位刺梨苷含量0.352～0.018 mg/g,野蔷薇苷含量0.580～0.023 mg/g,平均含量分别为0.150、0.240 mg/g。2、优化后的金樱根最佳提取工艺为乙醇体积分数80.0%,料液比1:25,提取时间80 min,提取次数3次,实测与响应面法模型拟合。最佳纯化工艺为选用D101大孔树脂,上样液质量浓度为0.4 g/m L,上样量20 m L,吸附时间270 min,解吸过程设定为:水,45%,90%乙醇。3、中试制备从金樱根部分浸膏中分离得到2个单体化合物,分别鉴定为刺梨苷(1.1321 g)、野蔷薇苷(1.2755 g),纯度均大于99.3%,理论计算得率分别为0.27%,0.31%。4、与正常组比较,模型组小鼠肺组织出现明显损伤,其中大量炎性细胞浸润,且肺泡完整性被破坏。肺组织中炎症因子TNF-α,IL-6及NF-κB p65,IκBα,IKKα/β磷酸化蛋白表达水平显著升高(P金樱根三种不同基原植物中根部刺梨苷和野蔷薇苷含量远高于其他部位,其中尤以小果蔷薇根含量为最高。本工艺优化可以高效制备高纯度刺梨苷和野蔷薇苷。刺梨苷和野蔷薇苷对LPS诱导小鼠急性肺损伤具有保护作用,其机制可能与调控NF-κB信号通路有关。本论文所建立的方法结果准确、重复性好,可用于金樱药材的质量评价,合理优化金樱根中刺梨苷和野蔷薇苷的提取纯化工艺,为进一步研究开发提供技术支撑。

关键词：金樱根刺梨苷野蔷薇苷工艺优化中试制备急性肺损伤

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紫草混伪品──金樱根的鉴别

中草药 1995年第9期26卷 486-489页

作者：杜泽乡桂林医学院药学系 641001

对紫草混伪品──金樱根进行了药材性状、显微特征和理化鉴别研究，并与紫草进行比较区别。

关键词：紫草金樱根鉴别

广西不同产地金樱根及炮制品中没食子酸和儿茶素的含量差异分析

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广西植物 2022年第5期42卷 833-844页

作者：韦熹苑邓琦卢小玲舒柯卓燊范家文潘思杏广西科技大学广西柳州545005 贵州省食品药品检验所贵阳550004

为了建立金樱根中没食子酸和儿茶素含量的测定方法,分析广西不同产地金樱根及炮制品中没食子酸和儿茶素含量的变化,该文以没食子酸和儿茶素的含量作为指标成分,采用HPLC法对广西产金樱根生品、炒炙品、酒炙品、盐炙品及醋炙品进行测定,... 详细信息

为了建立金樱根中没食子酸和儿茶素含量的测定方法,分析广西不同产地金樱根及炮制品中没食子酸和儿茶素含量的变化,该文以没食子酸和儿茶素的含量作为指标成分,采用HPLC法对广西产金樱根生品、炒炙品、酒炙品、盐炙品及醋炙品进行测定,并采用SPSS 23.0软件进行方差分析和聚类分析。结果表明:广西不同产地金樱根及炮制品中没食子酸和儿茶素含量均存在差异,所有样品中儿茶素的含量均比没食子酸高,南部地区(除贵港桂平外)的没食子酸和儿茶素含量整体上比北部地区高,在炮制品中醋炙后没食子酸和儿茶素含量最高。该研究表明HPLC测定方法简单可行,金樱根中没食子酸和儿茶素含量的变化差异主要表现为产地地域及炮制方法的不同,可为今后金樱根资源的合理利用、质量标准制定以及临床用药的研究提供一定科学依据。

关键词：高效液相色谱金樱根炮制品没食子酸儿茶素方差分析聚类分析

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金樱根活性成分及质量评价研究

金樱根活性成分及质量评价研究

作者：朱萱萱中国中医科学院

学位级别：硕士

目的阐明金樱根中发挥抗炎、抗氧化和降血糖活性的药效物质;对于文献研究极少的鞣质类成分进行分离纯化,鉴定其结构,以阐明金樱根中鞣质类成分的组成;运用网络药理学方法探讨金樱根主要活性成分(三萜和鞣质)的抗炎作用机制;对不同基源... 详细信息

目的阐明金樱根中发挥抗炎、抗氧化和降血糖活性的药效物质;对于文献研究极少的鞣质类成分进行分离纯化,鉴定其结构,以阐明金樱根中鞣质类成分的组成;运用网络药理学方法探讨金樱根主要活性成分(三萜和鞣质)的抗炎作用机制;对不同基源、不同产地的金樱根和金樱茎中的大类成分进行分析,并对其指纹图谱进行对比研究。方法1、采用巴豆油致小鼠耳廓肿胀实验,考察金樱根乙醇提取物及其不同极性萃取部位的抗炎活性;通过DPPH、ABTS和FRAP法测定各部位的体外抗氧化活性;采用α-葡萄糖苷酶抑制作用考察各部位的降血糖活性。采用紫外分光光度法测定金樱根各部位的总三萜、总酚、总鞣质和缩合鞣质的含量;采用UPLC-Q-TOF-MS/MS技术对各部位化学成分进行分析,推测主要色谱峰的结构,从而辨识金樱根发挥抗炎、抗氧化、降血糖的活性成分。2、利用大孔树脂柱色谱、硅胶柱色谱、MCI色谱、反相ODS柱色谱、制备HPLC以及半制备HPLC等现代分离纯化手段对金樱根正丁醇萃取部位的活性成分进行系统分离。3、通过大量文献挖掘与整理并结合本实验室前期的研究基础,获取已报道的金樱根的三萜或鞣质类成分。利用Swiss ADME预测活性成分和潜在作用靶点;通过Gencards和OMIM数据库获取抗炎主要靶点,采用Cytoscape3.7.2软件构建活性成分-抗炎靶点网络。利用String平台进行蛋白质的相互作用分析,并采用Metascape平台进行KEGG通路分析。4、采用紫外分光光度法测定金樱根和金樱茎中总三萜和总鞣质的含量。采用正交试验法考察试剂浓度、料液比、提取时间、提取温度对提取工艺的影响,确定最佳提取工艺。根据最佳提取工艺,比较不同基源、不同产地金樱根和金樱茎中总三萜和总鞣质的含量。5、采用色谱柱Kromasil C8(4.6×250 mm,5μm),以甲醇-0.05%磷酸水为流动相梯度洗脱,体积流量1 ***-1,检测波长280 nm,柱温30℃,建立金樱根和金樱茎药材的HPLC的指纹图谱,并对指纹图谱进行聚类分析及主成分分析。结果1、乙酸乙酯萃取部位抗炎和抗氧化活性最好,正丁醇萃取部位降血糖活性最好。由各部位化学成分测定结果可知,乙酸乙酯萃取部位中总三萜、总酚、总鞣质和缩合鞣质的含量分别为3.81%,50.33%,3.32%,39.79%,正丁醇萃取部位中依次为0.88%,41.42%,2.25%,23.55%,经LC-MS/MS分析,从乙酸乙酯萃取部位中推测出26个化合物,包括11个缩合鞣质,4个可水解鞣质,6个三萜类,3个黄酮类,1个苯甲酸衍生物和1个绿原酸类化合物;正丁醇萃取部位中推测出19个化合物,包括4个缩合鞣质,5个可水解鞣质,3个三萜类,5个黄酮类,1个苯甲酸衍生物和1个绿原酸类化合物。2、从正丁醇萃取部位分离得到9个化合物,鉴定了其中5个,包括2个黄酮类,3个可水解鞣质类,分别为(1)表儿茶素、(2)儿茶素、(3)鞣花酸-4’-O-木糖苷、(4)鞣花酸、(5)3-甲基鞣花酸-4’-O-木糖苷,其中5是首次从金樱根中分离得到。3、金樱根主要成分抗炎的核心靶点有IL-6、TNF、MAPK3、PTGS2、EGFR、AKT1、VEGFA、SRC等,抗炎的靶点主要涉及癌症通路,IL-17信号通路,癌症中的蛋白多糖、Endocrineresistance、5-羟色胺能神经突触、EGFR受体酪氨酸激酶抑制剂信号通路、膀胱癌、MicroRNAs癌症通路、甾体激素生成等信号通路。4、正交设计结果确定金樱根总三萜的最佳提取工艺为溶剂为三氯甲烷,料液比1:40,回流提取时间60 min,回流温度60℃;总鞣质的最佳提取工艺为乙醇浓度为70%,料液比1:10,超声提取时间30min。金樱根总三萜的含量范围为0.70%～1.60%,总鞣质的含量范围为5.17%～10.92%;金樱茎总三萜的含量范围为0.53%～0.90%,总鞣质的含量范围为2.50%～9.58%。5、采用HPLC建立了 21批金樱根和茎药材的指纹图谱,选出了 25个共有峰,通过对照品比对指认了其中6个共有峰,包括没食子酸,儿茶素,表儿茶素,鞣花酸-4’-O-木糖苷,鞣花酸-4’-O-阿拉伯呋喃糖苷和鞣花酸。21批药材具有一定的差异,相似度为0.408-0.978。聚类分析将21批金樱根和茎药材的指纹图谱聚为5类,批号JY6为第1类;批号JY5为第2类;批号JY1和JY2为第3类,批号JY7为第4类,其余样品聚为一类。主成分分析可知广西桂林兴安县所产JY1、湖南怀化溆浦所产JY6、湖南吉首所产JY7、湖南所产JY17的金樱根药材在所有样品中的综合得分位于前4名,表明该4个批号的金樱根药材质量较好。结论1、乙酸乙酯萃取部位是金樱根抗炎和抗氧化的主要活性部位,正丁醇萃取部位是降血糖的主要活性部位,以鞣质为主的

关键词：金樱根鞣质抗炎抗氧化降血糖质量控制

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大孔吸附树脂纯化金樱根总黄酮的研究

安徽农业科学 2011年第20期39卷 12143-12144,12146页

作者：吴功庆易运红邹梅清田素英赵增阳广东药学院中山校区广东中山528458 中山大学生命科学学院广东广州510275

[目的]筛选出一种树脂,并优化大孔吸附树脂纯化金樱根总黄酮成分的工艺。[方法]比较ADS-7、HPD300、AB-8、D-101型4种大孔吸附树脂对金樱根粗总黄酮提取液的吸附-解吸效果,考察上样液浓度、洗脱液浓度对解吸效果的影响。[结果]AB-8型大... 详细信息

[目的]筛选出一种树脂,并优化大孔吸附树脂纯化金樱根总黄酮成分的工艺。[方法]比较ADS-7、HPD300、AB-8、D-101型4种大孔吸附树脂对金樱根粗总黄酮提取液的吸附-解吸效果,考察上样液浓度、洗脱液浓度对解吸效果的影响。[结果]AB-8型大孔树脂对金樱根总黄酮成分吸附分离效果最佳;其纯化金樱根最佳条件为以20.0 ml浓度为0.200 mg/ml的样液进行吸附,用4 BV 50%乙醇进行洗脱。最佳工艺下,金樱根总黄酮的精制度为205.40%。[结论]通过该研究得到的方法可获得高纯度的金樱根总黄酮。

关键词：金樱根大孔吸附树脂总黄酮分离纯化